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雞源益生菌的篩選及穿梭載體的構(gòu)建

發(fā)布時(shí)間:2024-05-17 00:34
  隨著抗生素濫用所暴露出的弊病,國家越來越重視無抗養(yǎng)殖。因此,篩選具有優(yōu)良性質(zhì)的益生菌以替代抗生素的使用變得十分迫切。益生菌作為飼料添加劑已經(jīng)成為了一個(gè)研究熱點(diǎn)。本研究從廣西多地農(nóng)戶自養(yǎng)自繁的雞群中采集出生1周以內(nèi)雛雞的雞糞樣品,從中篩選對病原微生物有抑制作用且擁有作為飼料添加劑特性的候選菌株。評估了候選菌株對病原微生物的抑制能力、抗生素敏感性以及對模擬胃腸液、高滲透壓和強(qiáng)酸性的耐受能力,初步分析了各菌株的抑菌物質(zhì)的類型,構(gòu)建了大腸桿菌-乳酸菌穿梭質(zhì)粒。本研究經(jīng)初篩和復(fù)篩得到4株(分別編號為J13、J26、J30和J31)對病原性大腸桿菌、沙門氏菌及金黃色葡萄球菌均有較強(qiáng)抑制作用的益生菌,經(jīng)形態(tài)學(xué)及16S r DNA序列分析初步鑒定,4種菌株均屬乳酸菌,菌株J13屬于屎腸球菌屬(Enterococcus faecium)、菌株J26和J31均屬于植物乳桿菌屬(Lactobacillus plantarum),菌株J30屬于乳酸乳球菌屬(Lactococcus lactis)。菌株的生長曲線分析結(jié)果表明,菌株J26及J31生長趨勢相似,均在培養(yǎng)2-4 h后進(jìn)入對數(shù)期,16-20 h后進(jìn)入穩(wěn)...

【文章頁數(shù)】:87 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1-1益生菌的主要作用機(jī)制[13]

圖1-1益生菌的主要作用機(jī)制[13]

廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文雞源益生菌的篩選及穿梭載體的構(gòu)建3圖1-1益生菌的主要作用機(jī)制[13]Fig.1-1Majormechanismsofactionofprobiotics.(1)增強(qiáng)上皮組織屏障腸道是多種微生物共生的優(yōu)良場所,這使得大多數(shù)病原微生物同樣能在此生存,當(dāng)腸道菌群發(fā)....


圖1-2:nisin基因簇示意圖[72]

圖1-2:nisin基因簇示意圖[72]

廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文雞源益生菌的篩選及穿梭載體的構(gòu)建11由nisin誘導(dǎo)控制的啟動(dòng)子,nisRK參與調(diào)控nisin基因簇的表達(dá),B、T、C和P四個(gè)基因涉及nisin修飾、轉(zhuǎn)位和加工,I、F、E和G四個(gè)基因參與nisin免疫反應(yīng)[63]。圖1-2:nisin基因簇示意圖[72]Fi....


圖2-1膽固醇標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2-1膽固醇標(biāo)準(zhǔn)曲線

廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文雞源益生菌的篩選及穿梭載體的構(gòu)建24PCR擴(kuò)增條件預(yù)變性98℃4min變性98℃10s退火57℃15s延伸72℃70s終延伸72℃10min參照2.2.5中的方法,將PCR產(chǎn)物純化后與pMD10-Tvector進(jìn)行連接,將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化至JM109感受態(tài)細(xì)胞并進(jìn)....


圖3-1:16SrDNAPCR凝膠電泳分析

圖3-1:16SrDNAPCR凝膠電泳分析

廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文雞源益生菌的篩選及穿梭載體的構(gòu)建30表3-1菌株的菌落形態(tài)Table3-1Colonymorphologyofstrains編號菌落形態(tài)J13卵圓形,菌落較小,不透明,呈乳白色,邊緣整齊J26卵圓形,菌落約為1-2mm,不透明,呈乳黃色,邊緣整齊,表面濕潤J3....



本文編號:3975132

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