發(fā)布時(shí)間：2024-04-10 00:13

　　近年來,國(guó)際上關(guān)于非O157大腸桿菌,尤其是“big six”暴發(fā)流行的報(bào)道逐漸增多,已成為重要的食源性致病菌之一。食品加工及貯藏過程中,各種柵欄因子聯(lián)合應(yīng)用可對(duì)有害菌產(chǎn)生抑制甚至殺滅效應(yīng),但越來越多的研究發(fā)現(xiàn)它們有可能產(chǎn)生交叉保護(hù)作用,提高細(xì)菌的存活率,反而增大了食品風(fēng)險(xiǎn)。非O157大腸桿菌與O157相似,也具有較強(qiáng)耐酸性,目前關(guān)于熱休克-酸應(yīng)激對(duì)非O157大腸桿菌存活的影響,尤其是應(yīng)激過程中應(yīng)激基因、毒力基因表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化方面的研究少見報(bào)道。因此,本文首先調(diào)查牛糞和牛肉樣本中非O157大腸桿菌的污染情況,并以最主要的血清型O26為對(duì)象進(jìn)行鹽酸乳酸耐受性比較;進(jìn)一步選取乳酸耐受性不同的有毒菌株和無毒菌株,研究熱休克-酸應(yīng)激下菌株的存活、毒力基因表達(dá)的變化,以探討熱休克/酸適應(yīng)與酸應(yīng)激的聯(lián)合效應(yīng);進(jìn)而從細(xì)菌膜脂肪酸組成和應(yīng)激基因的變化來研究熱休克-酸應(yīng)激時(shí)大腸桿菌O26的應(yīng)激響應(yīng)機(jī)制。1、牛源性大腸桿菌非O157的分離鑒定參考USDA檢測(cè)方法,對(duì)樣品進(jìn)行選擇性增菌,用多重PCR方法進(jìn)行初步篩選,檢測(cè)O抗原(O157、O121、O111、O103、O26),陽(yáng)性樣本用選擇性顯色培養(yǎng)基Ra...

【文章頁(yè)數(shù)】：85 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 致病性大腸桿菌
        1.1.1 O157 STEC與非O157 STEC
        1.1.2 STEC生物學(xué)特性
        1.1.3 “big six”非O157 STEC的流行情況
    1.2 非O157 STEC毒力因子及致病機(jī)制
        1.2.1 志賀毒素
        1.2.2 黏附素
        1.2.3 腸溶血素
        1.2.4 細(xì)胞致死腫脹毒素
    1.3 應(yīng)激與STEC應(yīng)激響應(yīng)
        1.3.1 酸應(yīng)激對(duì)非O157 STEC的影響
        1.3.2 溫度對(duì)非O157 STEC的影響
        1.3.3 多種應(yīng)激聯(lián)合對(duì)非O157 STEC的影響
        1.3.4 應(yīng)激與毒力基因
    1.4 存在問題及本研究意義
    1.5 本課題技術(shù)路線
第2章 牛源性非O157大腸桿菌的分離與鑒定
    2.1 材料與方法
        2.1.1 菌種與試劑
        2.1.2 儀器與設(shè)備
        2.1.3 方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 樣品O血清型檢測(cè)結(jié)果
        2.2.2 菌株O血清型檢測(cè)結(jié)果
        2.2.3 菌株鞭毛抗原分型
        2.2.4 毒力基因檢測(cè)結(jié)果
    2.3 討論
    2.4 本章小結(jié)
第3章 熱休克-酸應(yīng)激對(duì)大腸桿菌O26存活及其毒力基因表達(dá)的影響
    3.1 材料與方法
        3.1.1 菌株與試劑
        3.1.2 儀器與設(shè)備
        3.1.3 大腸桿菌O26酸耐受試驗(yàn)
        3.1.4 大腸桿菌O26熱休克-酸應(yīng)激試驗(yàn)
        3.1.5 熱休克-酸應(yīng)激對(duì)大腸桿菌O26毒力基因表達(dá)的影響
        3.1.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 大腸桿菌O26耐酸性比較試驗(yàn)結(jié)果
        3.2.2 熱休克-酸應(yīng)激存活菌數(shù)檢測(cè)結(jié)果
        3.2.3 內(nèi)參基因篩選
        3.2.4 毒力基因表達(dá)
    3.3 討論
    3.4 本章小結(jié)
第4章 熱休克-酸應(yīng)激對(duì)大腸桿菌O26膜脂肪酸的影響
    4.1 材料與方法
        4.1.1 菌株與試劑
        4.1.2 儀器與設(shè)備
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.1.4 統(tǒng)計(jì)分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 菌株S433細(xì)胞膜脂肪酸組成的變化
        4.2.2 菌株G13Z1膜脂肪酸組成的變化
        4.2.3 菌株110Z4膜脂肪酸組成的變化
    4.3 討論
    4.4 本章小結(jié)
第5章 熱休克-酸應(yīng)激對(duì)大腸桿菌O26相關(guān)基因表達(dá)的影響
    5.1 材料與方法
        5.1.1 菌種與試劑
        5.1.2 儀器與設(shè)備
        5.1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.1.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 一般應(yīng)激基因表達(dá)
        5.2.2 酸應(yīng)激相關(guān)基因表達(dá)
        5.2.3 熱應(yīng)激基因表達(dá)
    5.3 討論
    5.4 本章小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
工作展望
參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果
致謝



本文編號(hào)：3949848