隨著測(cè)序技術(shù)的發(fā)展,已知的DNA序列數(shù)量呈指數(shù)性增加,為了能更快的探索其未知的生物功能,一些簡(jiǎn)化組裝流程的DNA克隆及組裝新技術(shù)爭(zhēng)相發(fā)展起來(lái)。其中大部分需要在菌體外構(gòu)建重組體,但重組酶純化過(guò)程復(fù)雜,運(yùn)送和保存方法要求嚴(yán)格,致使成本較高。最近研究者開(kāi)發(fā)了一些在菌體內(nèi)進(jìn)行DNA組裝的簡(jiǎn)易、低成本的新方法。主要對(duì)各類(lèi)基因克隆及組裝方法的研究現(xiàn)狀、原理和優(yōu)缺點(diǎn)等進(jìn)行綜述,并結(jié)合實(shí)際的工作內(nèi)容展望了未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì),希望能為進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)新技術(shù)提供參考。

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【文章目錄】：
1 限制性內(nèi)切酶
2 體外重組
    2.1 Gateway技術(shù)
    2.2 Rec ET技術(shù)
    2.3 SLi CE技術(shù)
    2.4 CATCH技術(shù)
    2.5 ExoCET技術(shù)
3 體內(nèi)重組
    3.1 Red/ET重組技術(shù)
    3.2 基于DH5α的重組
    3.3 DH5α重組方法的初步改進(jìn)
4 總結(jié)與展望



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