共軛亞油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)是多種含共軛雙鍵的十八碳二烯酸類物質(zhì)的總稱,具有多種益于生物體的生理功效。研究發(fā)現(xiàn),乳酸菌可以將亞油酸(linoleic acid,LA)轉(zhuǎn)化并生成CLA。在該轉(zhuǎn)化過程中,需要脂肪酸水合酶(Fatty acid hydratase,CLA-HY)、羥基脂肪酸脫氫酶(Hydroxy fatty acid dehydrogenase,CLA-DH)、乙酰乙酸脫羧酶(Acetoacetate decarboxylase,CLA-DC)參與,還與烯酮還原酶(Enone reductase,CLA-ER)和烯醇化酶(Enolase,Eno)有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)完成了 LA誘導(dǎo)和醇脅迫對植物乳桿菌p-8菌株CLA轉(zhuǎn)化率的影響及機(jī)制初探的研究,為闡明植物乳桿菌p-8菌株產(chǎn)CLA的分子機(jī)制和尋找有效提高CLA生成的調(diào)控手段奠定了基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)得到以下結(jié)果和結(jié)論:1.植物乳桿菌p-8菌株具有較低的轉(zhuǎn)化LA為CLA的能力,生成的CLA主要分布在發(fā)酵液中,有c9,t11-CLA、t10,c12-CLA和t9,t11-CLA三種異構(gòu)體形式。但菌體中只有...

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【學(xué)位級別】：碩士

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摘要
Abstract
縮略詞表
1 引言
    1.1 共軛亞油酸的生理功能
        1.1.1 預(yù)防及抑制癌癥
        1.1.2 減少體內(nèi)脂肪積累
        1.1.3 提高身體免疫力
        1.1.4 清除血管垃圾
        1.1.5 提高骨骼密度
    1.2 共軛亞油酸的合成方式
        1.2.1 化學(xué)合成
        1.2.2 生物合成
    1.3 微生物轉(zhuǎn)化共軛亞油酸機(jī)制
        1.3.1 瘤胃微生物
        1.3.2 丙酸桿菌
        1.3.3 乳酸菌
    1.4 與CLA合成相關(guān)的酶
        1.4.1 亞油酸異構(gòu)酶
        1.4.2 脂肪酸水合酶
        1.4.3 羥基脂肪酸脫氫酶
        1.4.4 乙酰乙酸脫羧酶
        1.4.5 烯酮還原酶
        1.4.6 烯醇化酶
    1.5 LA對細(xì)胞影響
    1.6 影響CLA產(chǎn)生的因素
    1.7 亞油酸異構(gòu)酶基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究
    1.8 植物乳桿菌P-8菌株
    1.9 研究意義與內(nèi)容
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 菌株
        2.1.2 引物
        2.1.3 培養(yǎng)基
        2.1.4 試劑盆
        2.1.5 生化試劑
        2.1.6 溶液配制
        2.1.7 主要儀器設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 L.plantarum P-8菌株培養(yǎng)
        2.2.2 不同底物濃度對植物乳桿菌p-8菌株培養(yǎng)
        2.2.3 不同濃度的甲醇脅迫下植物乳桿菌p-8菌株的培養(yǎng)
        2.2.4 不同濃度的乙醇脅迫對植物乳桿菌p-8菌株的培養(yǎng)
        2.2.5 CLA的檢測
        2.2.6 產(chǎn)CLA相關(guān)酶轉(zhuǎn)錄水平分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 菌種活化及生長曲線測定
    3.2 標(biāo)準(zhǔn)樣品和待測樣品色譜圖
    3.3 不同底物濃度對植物乳桿菌p-8菌株CLA轉(zhuǎn)化率
    3.4 不同底物濃度誘導(dǎo)下植物乳桿菌p-8菌株CLA合成相關(guān)酶基因轉(zhuǎn)錄水平
        3.4.1 不同底物濃度誘導(dǎo)下植物乳桿菌p-8菌株RNA提取結(jié)果
        3.4.2 不同底物濃度誘導(dǎo)下植物乳桿菌p-8菌株CLA合成相關(guān)酶基因及內(nèi)參基因的轉(zhuǎn)錄水平
    3.5 不同濃度甲醇脅迫下植物乳桿菌p-8菌株CLA的轉(zhuǎn)化率
    3.6 不同甲醇濃度脅迫下植物乳桿菌p-8菌株CLA合成相關(guān)酶基因的轉(zhuǎn)錄水平
        3.6.1 不同甲醇濃度脅迫下植物乳桿菌p-8菌株RNA提取結(jié)果
        3.6.2 不同甲醇濃度脅迫下植物乳桿菌p-8菌株CLA合成相關(guān)酶基因的轉(zhuǎn)錄水平
    3.7 不同乙醇濃度脅迫下植物乳桿菌p-8菌株CLA的轉(zhuǎn)化率
    3.8 不同乙醇濃度脅迫下植物乳桿菌p-8菌株CLA生成相關(guān)酶基因的轉(zhuǎn)錄水平
        3.8.1 醇脅迫對植物乳桿菌p-8菌株CLA合成相關(guān)酶基因轉(zhuǎn)錄水平的影響
        3.8.2 不同乙醇濃度脅迫下植物乳桿菌p-8菌株CLA合成相關(guān)酶基因的轉(zhuǎn)錄水平
4 討論
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡介



本文編號：3935302