目的:研究藏族精子蛋白表達水平與漢族的差異及其對高原缺氧環(huán)境適應的意義。方法:收集移居漢族、世居藏族和平原漢族可育男性精液標本。純化精子進行差異蛋白質組學分析,揭示不同組別蛋白表達水平差異,篩選高原環(huán)境中藏、漢精子差異表達蛋白,分析其參與的通路與生物學過程,揭示其對高原環(huán)境適應的意義。結果:移居漢族和世居藏族精子差異表達蛋白富集于凋亡相關的分子通路,而移居漢族與平原漢族的精子差異表達蛋白在DNA損傷修復相關通路中富集。蛋白質組分析顯示移居漢族精子中膜聯(lián)蛋白表達上調,但免疫印跡未能驗證其在移居漢族與世居藏族精子中的差異。結論:高原低氧環(huán)境導致精子DNA損傷。移居漢族與世居藏族精子膜聯(lián)蛋白差異表達提示漢族和藏族精子通過不同機制適應高原低氧環(huán)境,維持基因組完整性。

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【部分圖文】：

圖1IPA分析揭示差異表達蛋白富集的主要通路

使用IPA預測差異表達蛋白所涉及的通路，具體見圖1。其中，圖1A為移居漢族和世居藏族精子中差異表達蛋白質富集水平最高的前10個通路；圖1B為移居漢族和平原漢族的精子中差異表達蛋白質富集水平最高的前10個通路；圖1C為世居藏族和平原漢族精子中差異表達蛋白質富集水平最高的前10個通路....

圖2差異表達蛋白參與的生物過程的GO注釋

值得注意的是，在差異表達的蛋白質中出現(xiàn)了4種膜聯(lián)蛋白（ANAXA5、ANXA6、ANXA7和ANXA6isoform2），這些蛋白質在移居漢族樣本的精子中高表達。結合原始數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)在移居漢族精子中，其他6種膜聯(lián)蛋白（ANXA1、ANXA2、ANXA3、ANXA4、ANXA11和A....

圖3免疫染色檢測精子標本中的膜聯(lián)蛋白

通過質譜分析，與世居藏族相比，ANXA5、ANXA6和ANXA7在移居漢族樣本中上調，因此被選中進行進一步實驗。但是，通過蛋白質印跡分析，該3種蛋白在移居漢族和世居藏族中沒有發(fā)現(xiàn)顯著差異，具體見圖4。其中，圖4A為用于膜聯(lián)蛋白檢測的印跡，樣品來源顯示在樣品編號下方，GAPDH作為....

圖4免疫印跡檢測精子標本中的膜聯(lián)蛋白表達水平

圖3免疫染色檢測精子標本中的膜聯(lián)蛋白3結論與討論

本文編號：3930307