目的:研究藏族精子蛋白表達(dá)水平與漢族的差異及其對(duì)高原缺氧環(huán)境適應(yīng)的意義。方法:收集移居漢族、世居藏族和平原漢族可育男性精液標(biāo)本。純化精子進(jìn)行差異蛋白質(zhì)組學(xué)分析,揭示不同組別蛋白表達(dá)水平差異,篩選高原環(huán)境中藏、漢精子差異表達(dá)蛋白,分析其參與的通路與生物學(xué)過(guò)程,揭示其對(duì)高原環(huán)境適應(yīng)的意義。結(jié)果:移居漢族和世居藏族精子差異表達(dá)蛋白富集于凋亡相關(guān)的分子通路,而移居漢族與平原漢族的精子差異表達(dá)蛋白在DNA損傷修復(fù)相關(guān)通路中富集。蛋白質(zhì)組分析顯示移居漢族精子中膜聯(lián)蛋白表達(dá)上調(diào),但免疫印跡未能驗(yàn)證其在移居漢族與世居藏族精子中的差異。結(jié)論:高原低氧環(huán)境導(dǎo)致精子DNA損傷。移居漢族與世居藏族精子膜聯(lián)蛋白差異表達(dá)提示漢族和藏族精子通過(guò)不同機(jī)制適應(yīng)高原低氧環(huán)境,維持基因組完整性。

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圖1IPA分析揭示差異表達(dá)蛋白富集的主要通路

使用IPA預(yù)測(cè)差異表達(dá)蛋白所涉及的通路，具體見(jiàn)圖1。其中，圖1A為移居漢族和世居藏族精子中差異表達(dá)蛋白質(zhì)富集水平最高的前10個(gè)通路；圖1B為移居漢族和平原漢族的精子中差異表達(dá)蛋白質(zhì)富集水平最高的前10個(gè)通路；圖1C為世居藏族和平原漢族精子中差異表達(dá)蛋白質(zhì)富集水平最高的前10個(gè)通路....

圖2差異表達(dá)蛋白參與的生物過(guò)程的GO注釋

值得注意的是，在差異表達(dá)的蛋白質(zhì)中出現(xiàn)了4種膜聯(lián)蛋白（ANAXA5、ANXA6、ANXA7和ANXA6isoform2），這些蛋白質(zhì)在移居漢族樣本的精子中高表達(dá)。結(jié)合原始數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)在移居漢族精子中，其他6種膜聯(lián)蛋白（ANXA1、ANXA2、ANXA3、ANXA4、ANXA11和A....

圖3免疫染色檢測(cè)精子標(biāo)本中的膜聯(lián)蛋白

通過(guò)質(zhì)譜分析，與世居藏族相比，ANXA5、ANXA6和ANXA7在移居漢族樣本中上調(diào)，因此被選中進(jìn)行進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。但是，通過(guò)蛋白質(zhì)印跡分析，該3種蛋白在移居漢族和世居藏族中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)顯著差異，具體見(jiàn)圖4。其中，圖4A為用于膜聯(lián)蛋白檢測(cè)的印跡，樣品來(lái)源顯示在樣品編號(hào)下方，GAPDH作為....

圖4免疫印跡檢測(cè)精子標(biāo)本中的膜聯(lián)蛋白表達(dá)水平

圖3免疫染色檢測(cè)精子標(biāo)本中的膜聯(lián)蛋白3結(jié)論與討論

本文編號(hào)：3930307