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昆蟲保幼激素和核型多角體病毒膜受體的篩選

發(fā)布時(shí)間:2024-03-10 20:08
  1.昆蟲保幼激素膜上介導(dǎo)受體的篩選保幼激素(juvenile hormone,JH)是一種倍半萜類激素,由位于昆蟲腦后的咽側(cè)體合成并分泌,主要調(diào)控昆蟲蛻皮變態(tài)和生殖等。JH發(fā)揮功能依賴于其核受體Met(Methoprene-tolerant)介導(dǎo)的基因組轉(zhuǎn)錄途徑和細(xì)胞膜依賴的非基因組信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。JH核基因組轉(zhuǎn)錄途徑中,JH結(jié)合核受體Met并與Taiman(Tai)形成轉(zhuǎn)錄復(fù)合體調(diào)控下游基因轉(zhuǎn)錄,如:Cdc、Mcm、Kr-h1、Ago等,繼而調(diào)控飛蝗(Locusta migratoria)卵黃發(fā)生。其中Kr-h1是JH通路早期響應(yīng)基因,能夠響應(yīng)JH誘導(dǎo)并介導(dǎo)L.migratoria卵黃原蛋白(Vitellogenin,Vg)合成。近年研究表明,JH能夠通過G蛋白偶聯(lián)受體(G Protein-Coupled Receptors,GPCRs)和受體酪氨酸激酶(receptor protein tyrosine kinase,RTKs)觸發(fā)非基因組信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,與核基因組轉(zhuǎn)錄途徑協(xié)同調(diào)控JH響應(yīng)基因轉(zhuǎn)錄,但是相關(guān)研究并不深入。據(jù)此,本論文以JH依賴性飛蝗卵黃發(fā)生為研究對(duì)象,蟲體RNAi沉默G...

【文章頁數(shù)】:64 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1-1保幼激素信號(hào)通路(Jindraetal.,2015)

圖1-1保幼激素信號(hào)通路(Jindraetal.,2015)

昆蟲保幼激素和核型多角體病毒膜受體的篩選4圖1-1保幼激素信號(hào)通路(Jindraetal.,2015)1.2G蛋白偶聯(lián)受體和受體酪氨酸激酶G蛋白偶聯(lián)受體家族是最大的膜受體家族,人類G蛋白偶聯(lián)受體有大約800個(gè)(FredrikssonandSchith,2005),GPCRs由六大....


圖2-1PM處理后Kr-h1,VgA和VgB的時(shí)空表達(dá)模式

圖2-1PM處理后Kr-h1,VgA和VgB的時(shí)空表達(dá)模式

昆蟲保幼激素和核型多角體病毒膜受體的篩選14PBS/DMSO溶液以及注射后直接取樣。qPCR結(jié)果顯示在當(dāng)methoprene溶液濃度在2μg~5μg(圖2-1B),且誘導(dǎo)時(shí)間在6h~12h(圖2-1A)時(shí),Kr-h1,VgA和VgB的mRNA表達(dá)量呈上升趨勢。所以我們把metho....


圖2-2干擾待檢測基因后Kr-h1,VgA和VgB的變化量dsRNA(15μg)或dsGFP(15μg)在0PAE(postadulteclosion)注射蟲體體內(nèi),3天后再加強(qiáng)一針

圖2-2干擾待檢測基因后Kr-h1,VgA和VgB的變化量dsRNA(15μg)或dsGFP(15μg)在0PAE(postadulteclosion)注射蟲體體內(nèi),3天后再加強(qiáng)一針

篩選和鑒定飛蝗JH的膜上受體17圖2-2干擾待檢測基因后Kr-h1,VgA和VgB的變化量dsRNA(15μg)或dsGFP(15μg)在0PAE(postadulteclosion)注射蟲體體內(nèi),3天后再加強(qiáng)一針。早熟素Precocious從0PAE開始處理7天后,5ugMet....


圖2-3疑似基因MC23025和Un8878的ELISA檢測結(jié)果

圖2-3疑似基因MC23025和Un8878的ELISA檢測結(jié)果

昆蟲保幼激素和核型多角體病毒膜受體的篩選18圖2-3疑似基因MC23025和Un8878的ELISA檢測結(jié)果0PAE(postadulteclosion,PAE)的蟲體,dsMC23025(15μg)或dsUn8878(15μg)或dsGFP(15μg)在0PAE注射蟲體體內(nèi),3....



本文編號(hào):3925250

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