豬流行性腹瀉病毒(PEDV)和豬偽狂犬病病毒(PRV)是嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的兩種典型病毒,給我國乃至全世界養(yǎng)豬業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失。建立病毒新的檢測方法、發(fā)展新型抗病毒手段,對于控制病毒的流行具有重要的意義。本論文采用細(xì)胞-指數(shù)富集的配體系統(tǒng)進(jìn)化技術(shù)(Cell-SELEX)成功篩選出針對PEDV感染細(xì)胞的核酸適配體候選物;研究了二氧化錳(Mn O₂)納米片對PEDV及PRV的抑制效果,具體內(nèi)容如下:利用Cell-SELEX技術(shù),成功篩選出針對豬流行性腹瀉病毒感染非洲綠猴腎細(xì)胞(VERO)的核酸適配體候選物。在合成寡核苷酸文庫、上游引物及下游引物的基礎(chǔ)上,通過瓊脂糖凝膠電泳表征方法對初始ss DNA序列進(jìn)行了鑒定,并利用間接免疫熒光方法探究了PEDV病毒感染VERO合適的時間和劑量。以PEDV感染的VERO細(xì)胞為正篩細(xì)胞,以正常的VERO細(xì)胞為反篩細(xì)胞,經(jīng)過13輪篩選獲得了核酸適配體富集文庫,借助NUPACK軟件對第11輪文庫高通量測序結(jié)果中的優(yōu)選序列進(jìn)行分析和結(jié)構(gòu)預(yù)測,最終得到3條核酸適配體候選物。研究結(jié)果對PEDV感染VERO細(xì)胞表面標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)、PEDV的早期診斷及...

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1PEDV基因組及結(jié)構(gòu)示意圖（王興葉2018）

針對豬流行性腹瀉病毒感染細(xì)胞的核酸適配體的篩選及二氧化錳納米片抗病毒研究3圖1.1PEDV基因組及結(jié)構(gòu)示意圖（王興葉2018）Fig.1.1GenomeandschematicrepresentationofPEDV2.1.3PEDV的基本性質(zhì)PEDV能夠?qū)θ说募t細(xì)胞或者鼠、牛、....

圖1.2PRV結(jié)構(gòu)示意圖（Pomeranzetal2005）

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2020屆碩士研究生學(xué)位（畢業(yè)）論文82.2.2PRV的病毒學(xué)分類及分子結(jié)構(gòu)PRV歸屬于皰疹病毒目（Herpesvirales），皰疹病毒科（Herpesviridae），水痘病毒屬（Varicellovirus）成員，是宿主為脊椎動物的線性雙股DNA病毒（張瑩等20....

圖1.3核酸適配體特異性識別靶標(biāo)示意圖（Stoltenburgetal2007）

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2020屆碩士研究生學(xué)位（畢業(yè)）論文123核酸適配體3.1核酸適配體及SELEX技術(shù)簡單介紹1990年，Ellington等（EllingtonandSzostak1990）通過對有機(jī)染料的初始文庫進(jìn)行體外篩選獲得了能特異性識別小分子的核酸適配體（aptamer）。同....

圖1.4Cell-SELEX技術(shù)篩選核酸適配體的流程圖（Sefahetal2010）

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2020屆碩士研究生學(xué)位（畢業(yè)）論文14圖1.4Cell-SELEX技術(shù)篩選核酸適配體的流程圖（Sefahetal2010）Fig.1.4RoadmapofaptamerselectionbyCell-SELEXtechnology3.2.2Cell-SELEX技術(shù)的....

本文編號：3923478