轉(zhuǎn)座反應(yīng)在生物體的抗逆應(yīng)激性反應(yīng)、效應(yīng)因子遷移等過程中扮演著重要角色,越來越多的轉(zhuǎn)座元件被發(fā)現(xiàn)并應(yīng)用于未知功能基因的發(fā)現(xiàn)、生物遺傳特性與功能等研究。Tn3、Tn5、Tn10、Tn7來源于原核生物,Mariner來源于真核生物,其中Tn3屬于TnA家族,采用復(fù)制型轉(zhuǎn)座,其余采用非復(fù)制型轉(zhuǎn)座。實(shí)際應(yīng)用中,相對于Tn3、Tn5存在插入熱點(diǎn)區(qū)域,Mariner和Tn10具有更高的插入頻率和隨機(jī)性,且得到更為廣泛的應(yīng)用。詳細(xì)總結(jié)了廣泛應(yīng)用于芽孢桿菌、假單胞菌、黃單胞菌、勞爾氏菌等細(xì)菌研究領(lǐng)域的Tn3、Tn5、Tn10、Tn7、Mariner類轉(zhuǎn)座子的分類、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、轉(zhuǎn)座過程和調(diào)控機(jī)制,以及最新的應(yīng)用進(jìn)展,為后續(xù)研究者提供了理論說明和應(yīng)用建議。

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【部分圖文】：

圖1轉(zhuǎn)座子的分類

轉(zhuǎn)座子分為編碼蛋白質(zhì)的DNA類轉(zhuǎn)座子和反轉(zhuǎn)錄類轉(zhuǎn)座子,IS、復(fù)合型轉(zhuǎn)座子Tn、TnA類、Muphage存在于原核生物。其中最先被鑒定出的轉(zhuǎn)座元件是細(xì)菌中的插入序列IS。IS能獨(dú)立發(fā)揮轉(zhuǎn)座,例如IS1、IS2、IS4、IS5、IS10R、IS50R、IS903。其中IS1、IS....

圖2轉(zhuǎn)座子的分子結(jié)構(gòu)*

Tn5最早發(fā)現(xiàn)于大腸埃希菌(Escherichiacoli),含編碼卡那霉素、博來霉素、鏈霉素等抗性基因,末端含IS50反向重復(fù)序列,IS50R轉(zhuǎn)錄翻譯轉(zhuǎn)座酶Tnp和抑制蛋白Inh,而IS50L由于一個(gè)氨基酸位點(diǎn)突變而無法轉(zhuǎn)錄,但形成抗性基因的啟動(dòng)子序列。IS50R/IS....

圖3Tn3、Tn5、Tn7、Tn10和Mariner轉(zhuǎn)座模型*

Tn7使用雜聚肽轉(zhuǎn)座酶進(jìn)行剪切-粘貼轉(zhuǎn)座,在TnsABCDE5個(gè)蛋白中,TnsC主要為互作蛋白,TnsA-TnsB以核酸內(nèi)切酶復(fù)合體的形式進(jìn)行定位,二者協(xié)作直接進(jìn)行目標(biāo)DNA的切割反應(yīng),以形成線性轉(zhuǎn)移產(chǎn)物,隨后通過TnsC的互作,結(jié)合TnsD或TnsE,形成TnsABC+....

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