煙草是重要的經(jīng)濟(jì)作物,但其生產(chǎn)過程中會(huì)產(chǎn)生大量的含有尼古丁的廢棄物。因?yàn)槟峁哦∈且环N具有毒性的含氮雜環(huán)化合物,這些含有尼古丁的廢棄物如果處理不當(dāng),會(huì)污染環(huán)境并影響人類健康。因此,必須開發(fā)有效的技術(shù)來處理或回收利用煙草廢棄物。在多數(shù)情況下,與物理和化學(xué)方法相比,微生物可以更高效、更經(jīng)濟(jì)地?zé)o害化處理有毒化學(xué)品。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道已發(fā)現(xiàn)多種微生物可以降解代謝尼古丁,比如本論文使用的Agrobacterium tumefaciens S33可以通過新型的吡啶途徑和吡咯途徑的“雜合途徑”氧化降解尼古丁,進(jìn)而以尼古丁為唯一碳源、氮源和能源生長。在該途徑中,吡啶環(huán)被開環(huán)分解之前至少有六個(gè)步驟是氧化還原反應(yīng),S33通過這六個(gè)氧化還原反應(yīng)將電子從尼古丁及其中間代謝物沿著電子傳遞鏈(ETC)傳遞到最終的電子受體02,最終通過氧化磷酸化合成ATP獲得能量。在這六個(gè)氧化反應(yīng)中,催化第四步反應(yīng)(6-羥基假氧化尼古丁氧化脫氨生成6-羥基-3-琥珀酰半醛吡啶)的6-羥基假氧化尼古丁氧化酶Pno的生理電子受體仍不清楚。此外,該途徑中一些中間代謝物可以作為底物進(jìn)一步化學(xué)合成一些有價(jià)值的藥物,如6-羥基尼古丁,這為資源化利用煙草...

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２?Ａ?中的大質(zhì)粒ｐＡＯｌ上尼古丁代謝相關(guān)基因簇??

ＴＣＡ循環(huán)?ＴＣＡ術(shù)環(huán)??圖１－１?Ａ?ｗ／ｏ＾／？６＞ｖｏｎｍｓ中的卩比陡途徑（Ａ）和尸Ｓ１６中的卩比略途徑（Ｂ）??ＦＩＧ?１－１?Ｔｈｅ?ｐｙｒｉｄｉｎｅ?ｐａｔｈｗａｙ?ｆｒｏｍ?Ａ．

圖４－１通過敲除／基因積累６－羥基尼古丁的途徑??

對以ＥｔｆＡＢ－Ｉ為電子受體的催化產(chǎn)物進(jìn)行鑒定。此外，通過ｄ／ｌ／和基因??敲除菌株的生長測定和它們在野生型菌株和敲除菌株的轉(zhuǎn)錄水平分析，對??ＥｔｆＡＢ－丨和ＥｔｆＡＢ－ＩＩ的功能進(jìn)行驗(yàn)證；??（２）根據(jù)序列比對結(jié)果和實(shí)驗(yàn)室前期的轉(zhuǎn)錄組分析（Ｈｕａｎｇ?ｅ／ｏ／．?２０１７）推....

圖２－１－２不同生物中ＥｔｆＡＢｓ的進(jìn)化分析（數(shù)據(jù)見表２－１－１）??ＦＩＧ?２－１－２?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＥｔｆＡＢｓ?ｆｒｏｍ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｏｒｇａｎｉｓｍｓ?（ｆｏｒ?ｄｅｔａｉｌｓ，??ｐｌｅａｓｅ?ｒｅｆｅｒ?Ｔａｂｌｅ?ＳＩ）．??注：所用序列為ＥｔｆＡｓ和Ｅｔｆｆｉｓ的拼合序列，且僅ＥｔｆＡｓ的ＧｅｎＢａｎｋ號在圖中顯示

圖２－１－２不同生物中ＥｔｆＡＢｓ的進(jìn)化分析（數(shù)據(jù)見表２－１－１）??ＦＩＧ?２－１－２?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＥｔｆＡＢｓ?ｆｒｏｍ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｏｒｇａｎｉｓｍｓ?（ｆｏｒ?ｄｅｔａｉｌｓ，??ｐｌｅａｓｅ?ｒｅｆｅｒ?Ｔａｂｌｅ?....

圖２－２－３利用凝膠過濾測定ＥｔｆＡＢ－Ｉ和ＥｔｆＡＢ－ＩＩ的分子量??－－

２．３假氧化尼古丁可作為Ｐｎｏ催化反應(yīng)的底物??由于沒有商品銷售的６－羥基假氧化尼古丁，本實(shí)驗(yàn)測試了其類似物假氧化尼??古丁能否作為Ｐｎｏ催化反應(yīng)的底物。如圖２－３－１Ａ所示，在假氧化尼古丁和ＰＭＳ??存在的情況下，ＤＣＰＩＰ可以被還原，反應(yīng)的最適ｐＨ為８．５。在ｐＨ?８．５的Ｔ....

本文編號：3893443