煙草是重要的經(jīng)濟作物,但其生產(chǎn)過程中會產(chǎn)生大量的含有尼古丁的廢棄物。因為尼古丁是一種具有毒性的含氮雜環(huán)化合物,這些含有尼古丁的廢棄物如果處理不當,會污染環(huán)境并影響人類健康。因此,必須開發(fā)有效的技術來處理或回收利用煙草廢棄物。在多數(shù)情況下,與物理和化學方法相比,微生物可以更高效、更經(jīng)濟地無害化處理有毒化學品。據(jù)文獻報道已發(fā)現(xiàn)多種微生物可以降解代謝尼古丁,比如本論文使用的Agrobacterium tumefaciens S33可以通過新型的吡啶途徑和吡咯途徑的“雜合途徑”氧化降解尼古丁,進而以尼古丁為唯一碳源、氮源和能源生長。在該途徑中,吡啶環(huán)被開環(huán)分解之前至少有六個步驟是氧化還原反應,S33通過這六個氧化還原反應將電子從尼古丁及其中間代謝物沿著電子傳遞鏈(ETC)傳遞到最終的電子受體02,最終通過氧化磷酸化合成ATP獲得能量。在這六個氧化反應中,催化第四步反應(6-羥基假氧化尼古丁氧化脫氨生成6-羥基-3-琥珀酰半醛吡啶)的6-羥基假氧化尼古丁氧化酶Pno的生理電子受體仍不清楚。此外,該途徑中一些中間代謝物可以作為底物進一步化學合成一些有價值的藥物,如6-羥基尼古丁,這為資源化利用煙草...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２?Ａ?中的大質(zhì)粒ｐＡＯｌ上尼古丁代謝相關基因簇??

ＴＣＡ循環(huán)?ＴＣＡ術環(huán)??圖１－１?Ａ?ｗ／ｏ＾／？６＞ｖｏｎｍｓ中的卩比陡途徑（Ａ）和尸Ｓ１６中的卩比略途徑（Ｂ）??ＦＩＧ?１－１?Ｔｈｅ?ｐｙｒｉｄｉｎｅ?ｐａｔｈｗａｙ?ｆｒｏｍ?Ａ．

圖４－１通過敲除／基因積累６－羥基尼古丁的途徑??

對以ＥｔｆＡＢ－Ｉ為電子受體的催化產(chǎn)物進行鑒定。此外，通過ｄ／ｌ／和基因??敲除菌株的生長測定和它們在野生型菌株和敲除菌株的轉(zhuǎn)錄水平分析，對??ＥｔｆＡＢ－丨和ＥｔｆＡＢ－ＩＩ的功能進行驗證；??（２）根據(jù)序列比對結(jié)果和實驗室前期的轉(zhuǎn)錄組分析（Ｈｕａｎｇ?ｅ／ｏ／．?２０１７）推....

圖２－１－２不同生物中ＥｔｆＡＢｓ的進化分析（數(shù)據(jù)見表２－１－１）??ＦＩＧ?２－１－２?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＥｔｆＡＢｓ?ｆｒｏｍ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｏｒｇａｎｉｓｍｓ?（ｆｏｒ?ｄｅｔａｉｌｓ，??ｐｌｅａｓｅ?ｒｅｆｅｒ?Ｔａｂｌｅ?ＳＩ）．??注：所用序列為ＥｔｆＡｓ和Ｅｔｆｆｉｓ的拼合序列，且僅ＥｔｆＡｓ的ＧｅｎＢａｎｋ號在圖中顯示

圖２－１－２不同生物中ＥｔｆＡＢｓ的進化分析（數(shù)據(jù)見表２－１－１）??ＦＩＧ?２－１－２?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＥｔｆＡＢｓ?ｆｒｏｍ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｏｒｇａｎｉｓｍｓ?（ｆｏｒ?ｄｅｔａｉｌｓ，??ｐｌｅａｓｅ?ｒｅｆｅｒ?Ｔａｂｌｅ?....

圖２－２－３利用凝膠過濾測定ＥｔｆＡＢ－Ｉ和ＥｔｆＡＢ－ＩＩ的分子量??－－

２．３假氧化尼古丁可作為Ｐｎｏ催化反應的底物??由于沒有商品銷售的６－羥基假氧化尼古丁，本實驗測試了其類似物假氧化尼??古丁能否作為Ｐｎｏ催化反應的底物。如圖２－３－１Ａ所示，在假氧化尼古丁和ＰＭＳ??存在的情況下，ＤＣＰＩＰ可以被還原，反應的最適ｐＨ為８．５。在ｐＨ?８．５的Ｔ....

本文編號：3893443