發(fā)布時(shí)間：2024-01-03 17:27

　　將實(shí)驗(yàn)室克隆得到的E. coli BL21/pET28a-bga B-18重組菌株在IPTG的誘導(dǎo)下進(jìn)行表達(dá),對(duì)其表達(dá)的β-半乳糖苷酶性質(zhì)進(jìn)行研究.首先,通過離心收取重組菌菌體;其次,通過超聲破碎菌體細(xì)胞,再用鎳柱對(duì)重組蛋白質(zhì)進(jìn)行親和層析;最后,收集層析液,再利用紫外分光光度計(jì)測(cè)定重組β-半乳糖苷酶活性,并研究其酶學(xué)性質(zhì).結(jié)果表明:該酶的最適反應(yīng)溫度為37℃,最適pH值為7.5;在溫度30～50℃、pH 6.0～8.0范圍內(nèi)酶穩(wěn)定性較好; Mg²⁺、Mn²⁺為其激活劑,Cu²⁺為其抑制劑;測(cè)得K_m=0.816 mmol/L,V_max=45.87 mmol/(L·min).

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