將實驗室克隆得到的E. coli BL21/pET28a-bga B-18重組菌株在IPTG的誘導下進行表達,對其表達的β-半乳糖苷酶性質(zhì)進行研究.首先,通過離心收取重組菌菌體;其次,通過超聲破碎菌體細胞,再用鎳柱對重組蛋白質(zhì)進行親和層析;最后,收集層析液,再利用紫外分光光度計測定重組β-半乳糖苷酶活性,并研究其酶學性質(zhì).結(jié)果表明:該酶的最適反應溫度為37℃,最適pH值為7.5;在溫度30～50℃、pH 6.0～8.0范圍內(nèi)酶穩(wěn)定性較好; Mg²⁺、Mn²⁺為其激活劑,Cu²⁺為其抑制劑;測得K_m=0.816 mmol/L,V_max=45.87 mmol/(L·min).

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