作為蛋白質(zhì)重要的翻譯后修飾之一,蛋白質(zhì)的糖基化廣泛存在于超過(guò)50%的蛋白質(zhì)中,影響著蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能,不僅在細(xì)胞重要的生命過(guò)程中起著調(diào)控作用,而且某些疾病發(fā)生與發(fā)展的生理過(guò)程也與蛋白質(zhì)糖基化相關(guān),是許多臨床生物標(biāo)志物及治療的靶標(biāo),因此糖蛋白的研究具有重要的生物學(xué)意義及臨床價(jià)值。然而其在生物樣本中的低豐度性,糖鏈的微觀不均一性,導(dǎo)致了糖蛋白的分離富集成為研究的重要前提。目前,針對(duì)糖蛋白的分離富集方法報(bào)道的有很多,其中將苯硼酸作為親和配體搭載于磁性納米材料表面的方法得到了廣泛的應(yīng)用。但是現(xiàn)有的苯硼酸功能化磁性材料應(yīng)用中也存在一些問(wèn)題,如結(jié)合后的目標(biāo)蛋白需在酸性條件下洗脫,但是酸洗脫條件存在不一致性,且過(guò)酸的條件也會(huì)對(duì)糖蛋白結(jié)構(gòu)造成一定的影響,另一方面對(duì)酸敏感的材料也會(huì)受到應(yīng)用限制,另外酸洗脫共沉淀下來(lái)的非糖蛋白,對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)會(huì)造成時(shí)間與經(jīng)濟(jì)上的浪費(fèi)。為解決以上問(wèn)題,本研究首先對(duì)磁性納米材料進(jìn)行碳質(zhì)包覆,一方面提高了材料的親水性來(lái)對(duì)抗非特異性吸附的問(wèn)題,另一方面為進(jìn)一步修飾提供了活性位點(diǎn)。然后制備了以二硫鍵連接的苯硼酸功能化磁性材料Fe₃O₄@C-...

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1.引言
    1.1 糖基化蛋白質(zhì)組學(xué)簡(jiǎn)介
        1.1.1 糖蛋白的類型及作用
        1.1.2 生物質(zhì)譜技術(shù)在糖蛋白研究中的應(yīng)用
    1.2 糖蛋白、糖肽的富集分離技術(shù)
        1.2.1 非共價(jià)鍵連接法
        1.2.2 化學(xué)反應(yīng)形成共價(jià)鍵連接法
    1.3 可斷裂連接器在生物分子分離方面的應(yīng)用
        1.3.1 酶可分裂的連接器
        1.3.2 還原敏感性連接器
        1.3.3 可光解的連接器
        1.3.4 酸敏感的連接器
    1.4 磁性納米材料在蛋白質(zhì)分離中的應(yīng)用
        1.4.1 對(duì)磷酸化蛋白質(zhì)的富集
        1.4.2 對(duì)糖蛋白的分離富集
    1.5 本論文研究?jī)?nèi)容及意義
2.兩種硼酸功能化磁性材料的制備
    2.1 實(shí)驗(yàn)部分
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.3 Fe₃O₄ MNPs的合成
        2.1.4 兩種硼酸功能化修飾的Fe₃O₄ MNPs的制備
    2.2 測(cè)試與表征
        2.2.1 透射電子顯微鏡(TEM)
        2.2.2 粒徑及Zeta電位測(cè)試
        2.2.3 磁強(qiáng)度檢測(cè)
        2.2.4 水分散性及磁響應(yīng)的考察
        2.2.5 傅里葉變換紅外光譜(FTIR)測(cè)定
        2.2.6 熱失重分析(TGA)
        2.2.7 X射線光電子能譜測(cè)定(XPS)
        2.2.8 紫外-可見(jiàn)分光光計(jì)(UV-Vis)的應(yīng)用
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.3.1 TEM結(jié)果分析
        2.3.2 磁強(qiáng)度檢測(cè)結(jié)果
        2.3.3 水分散性及磁響應(yīng)性結(jié)果
        2.3.4 粒徑及Zeta電位測(cè)定結(jié)果
        2.3.5 FTIR結(jié)果分析
        2.3.6 TGA分析結(jié)果
        2.3.7 XPS結(jié)果分析
        2.3.8 紫外-可見(jiàn)分光光計(jì)(UV-Vis)的結(jié)果分析
    2.4 本章小結(jié)
3.硼酸功能化磁性材料特異性分離糖蛋白的應(yīng)用
    3.1 實(shí)驗(yàn)部分
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.3 兩種硼酸功能化材料對(duì)糖蛋白的吸附性能測(cè)定
        3.1.4 對(duì)吸附的糖蛋白進(jìn)行斷鍵釋放性能測(cè)定
        3.1.5 硼酸功能化磁性材料對(duì)雞蛋清中糖蛋白的分離應(yīng)用
        3.1.6 硼酸功能化磁性材料對(duì)人血清中糖蛋白的分離應(yīng)用
    3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.2.1 對(duì)糖蛋白吸附性能的測(cè)定結(jié)果分析
        3.2.2 對(duì)吸附的糖蛋白斷鍵釋放性能測(cè)定的結(jié)果分析
        3.2.3 雞蛋清中糖蛋白的分離應(yīng)用結(jié)果分析
        3.2.4 人血清中糖蛋白的分離應(yīng)用結(jié)果分析
    3.3 本章小結(jié)
4.總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3875283