【背景】纖維素在自然界中儲量豐富,但天然纖維素的難降解性成為廣泛應(yīng)用纖維素資源的壁壘,近年來利用微生物來降解纖維素成為熱點研究。【目的】篩選分離得到一株具有降解纖維素功能的放線菌菌株Lb1,通過全基因組測序確定其產(chǎn)纖維素酶關(guān)鍵基因5676,對基因5676進(jìn)行克隆轉(zhuǎn)化,使其在大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)�！痉椒ā客ㄟ^基因工程技術(shù)將產(chǎn)纖維素基因連接到表達(dá)質(zhì)粒上并導(dǎo)入表達(dá)菌株,對其降解纖維素生成葡萄糖的能力進(jìn)行探究�！窘Y(jié)果】將Lb1菌株的16S rRNA基因進(jìn)行比對,確定菌株Lb1屬于鏈霉菌屬,命名為Streptomyces sp. Lb1。成功構(gòu)建出纖維素酶表達(dá)載體,并且導(dǎo)入表達(dá)菌株大腸桿菌BL21(DE3),重組菌株的產(chǎn)纖維素酶能力大于空載菌株�！窘Y(jié)論】通過基因工程技術(shù)成功克隆出產(chǎn)纖維素酶基因,從而表達(dá)纖維素酶,為今后利用微生物降解纖維素的大規(guī)模應(yīng)用提供參考。

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 培養(yǎng)基
        1.1.2 主要試劑和儀器
    1.2 方法
        1.2.1 菌株的篩選
        1.2.2 菌株的鑒定
        1.2.3 菌株Lb1的全基因組學(xué)分析
        1.2.4 纖維素酶分泌表達(dá)載體的構(gòu)建
        1.2.5 纖維素酶重組表達(dá)菌株的構(gòu)建
        1.2.6 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
        1.2.7 纖維素酶活力的測定
2 結(jié)果與分析
    2.1 菌株的篩選
    2.2 菌株的鑒定
    2.3 Lb1的全基因組學(xué)分析
        2.3.1 Lb1的基因組特征
        2.3.2 Lb1的GO功能注釋
        2.3.3 菌株Lb1的碳水化合物活性酶注釋
        2.3.4 菌株Lb1的KEGG代謝通路分析
    2.4 纖維素酶表達(dá)載體的構(gòu)建
    2.5 纖維素酶表達(dá)菌株的構(gòu)建
    2.6 表達(dá)菌株纖維素酶活性的測定
3 討論
4 結(jié)論



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