基因編輯技術(shù)是指通過(guò)人為方式在基因組插入、缺失或替換特定堿基,對(duì)遺傳物質(zhì)進(jìn)行精確修飾和定向編輯的一種技術(shù)。近年來(lái),鋅指核酸內(nèi)切酶(zinc-finger endonuclease, ZFN)、類(lèi)轉(zhuǎn)錄激活因子效應(yīng)物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease, TALEN)、成簇規(guī)律間隔短回文重復(fù)序列及其相關(guān)系統(tǒng)(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein 9, CRISPR/Cas9)等基因編輯技術(shù)的出現(xiàn),使特異性靶向修飾動(dòng)物基因組序列成為可能。雖然利用CRISPR/Cas9等基因編輯工具可以在細(xì)胞基因組高效產(chǎn)生雙鏈斷裂(double-strand breaks, DSB),但利用同源定向修復(fù)(homology directed repair, HDR)介導(dǎo)的精確插入(knock in, KI)效率卻十分低下。本文結(jié)合當(dāng)前基因編輯技術(shù)的發(fā)展現(xiàn)狀,對(duì)目前提高CRISPR/Cas9介導(dǎo)的動(dòng)物基因組KI策略進(jìn)行了綜...

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【文章目錄】：
1 基因編輯技術(shù)
2 提高CRISPR/Cas9介導(dǎo)的動(dòng)物基因組KI策略
    2.1 靶位點(diǎn)選擇
    2.2 SpCas9蛋白改造
    2.3 dsDNA供體模板優(yōu)化
    2.4 ssODN供體模板設(shè)計(jì)與優(yōu)化
    2.5 小分子化合物調(diào)控DNA修復(fù)
    2.6 利用NHEJ途徑實(shí)現(xiàn)KI
3 結(jié)語(yǔ)與展望



本文編號(hào)：3848286