種間雜交和異源多倍體化給遠(yuǎn)緣植物物種之間的基因交換、遺傳性狀變異以及新種質(zhì)資源的創(chuàng)建提供了一個(gè)重要途徑。蕓薹屬三個(gè)二倍體基本種(甘藍(lán)、白菜、黑芥)之間通過兩兩雜交的方式,獲得了甘藍(lán)型油菜、芥菜型油菜、埃塞俄比亞芥菜等一系列豐富種質(zhì)資源,極大豐富了蔬菜、油料等經(jīng)濟(jì)作物資源庫。目前,人工合成的蕓薹屬異源多倍體成為研究蕓薹屬之間遺傳重組和穩(wěn)定性的優(yōu)秀模式材料,但對(duì)三基因組單倍型材料的研究報(bào)道較少。因此,在本研究中,使用異源四倍體種埃塞俄比亞芥菜(BBCC)作為母本,同源二倍體種白菜(AA)作為父本,通過人工雜交,成功創(chuàng)制出蕓薹屬異源三倍體新雜交種ABC。對(duì)異源三倍體及其親本的表型特征進(jìn)行觀察統(tǒng)計(jì);對(duì)比異源三倍體雜交種及親本的減數(shù)分裂過程;通過免疫熒光染色技術(shù),研究其減數(shù)分裂過程中調(diào)控聯(lián)會(huì)復(fù)合體形成的特異蛋白ZYP1的表達(dá)情況;通過免疫熒光定位技術(shù)研究其減數(shù)分裂過程中細(xì)胞骨架的動(dòng)態(tài)定位情況;利用基因組原位雜交研究異源三倍體雜交種的染色體分別在基因組內(nèi)和組間的配對(duì)現(xiàn)象;利用石蠟切片技術(shù)研究雜交種與親本的花藥發(fā)育情況;利用熒光定量PCR對(duì)7個(gè)調(diào)控減數(shù)分裂過程的基因,以及2個(gè)調(diào)控花藥發(fā)育的重要基因,...

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 蕓薹屬植物遠(yuǎn)緣雜交研究進(jìn)展
        1.1.1 蕓薹屬遠(yuǎn)緣雜交不親和性的機(jī)理
        1.1.2 克服遠(yuǎn)緣雜交不親和性的方法
        1.1.3 遠(yuǎn)緣雜交中常見的染色體特殊行為
    1.2 蕓薹屬A,B,C三基因組研究進(jìn)展
    1.3 人工合成多倍體雜交材料細(xì)胞學(xué)研究進(jìn)展
        1.3.1 流式倍性細(xì)胞鑒定術(shù)研究進(jìn)展
        1.3.2 免疫熒光研究進(jìn)展
        1.3.3 原位雜交研究進(jìn)展
    1.4 減數(shù)分裂研究進(jìn)展
        1.4.1 減數(shù)分裂過程及意義
        1.4.2 減數(shù)分裂調(diào)控機(jī)制研究進(jìn)展
        1.4.3 聯(lián)會(huì)復(fù)合體的研究進(jìn)展
    1.5 異源多倍體與同源多倍體減數(shù)分裂調(diào)控的研究進(jìn)展
    1.6 植物花藥與花粉發(fā)育的研究進(jìn)展
    1.7 研究目的及意義
2 異源三倍體雜種的材料鑒定與性狀分析
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 雜交種獲得與植株鑒定
        2.2.2 形態(tài)學(xué)觀察
        2.2.3 氣孔觀察
        2.2.4 花粉育性鑒定
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.3.1 異源三倍體雜種的形態(tài)學(xué)特征
        2.3.2 花粉育性鑒定
        2.3.3 異源三倍體氣孔觀察
    2.4 討論
3.異源三倍體雜種減數(shù)分裂過程觀察
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 鑒定減數(shù)分裂時(shí)期的取材范圍
        3.2.2 減數(shù)分裂時(shí)期分裂相細(xì)胞的染色體制片
        3.2.3 聯(lián)會(huì)復(fù)合體調(diào)控蛋白ZYP1抗體在異源三倍體雜交種中的免疫定位
        3.2.4 異源三倍體雜種的基因組原位熒光雜交
        3.2.5 細(xì)胞骨架β-tubulin微管蛋白在異源三倍體雜交種中的免疫定位
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 減數(shù)分裂時(shí)期取材范圍
        3.3.2 減數(shù)分裂時(shí)期細(xì)胞學(xué)鑒定
        3.3.3 聯(lián)會(huì)復(fù)合體調(diào)控蛋白ZYP1抗體在異源三倍體雜交種中的免疫定位
        3.3.4 異源三倍體雜種的基因組原位熒光雜交
        3.3.5 細(xì)胞骨架β-tubulin微管蛋白在異源三倍體雜交種中的免疫定位
    3.4 討論
4.異源三倍體花藥發(fā)育過程觀察
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 成熟花藥與柱頭的掃描電鏡觀察
        4.2.2 成熟花粉粒的掃描電鏡觀察
        4.2.3 花藥不同發(fā)育時(shí)期的石蠟切片
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 成熟花藥與柱頭的掃描電鏡觀察結(jié)果
        4.3.2 成熟花粉粒的掃描電鏡觀察
        4.3.3 花藥不同發(fā)育時(shí)期的石蠟切片觀察結(jié)果
    4.4 討論
5 異源三倍體中調(diào)控減數(shù)分裂與花藥發(fā)育的關(guān)鍵基因表達(dá)量分析
    5.1 實(shí)驗(yàn)材料
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1 減數(shù)分裂調(diào)控基因、花藥發(fā)育調(diào)控基因以及內(nèi)參基因的選取和引物設(shè)計(jì)
        5.2.2 提取檢測RNA
        5.2.3 RNA反轉(zhuǎn)錄
        5.2.4 實(shí)時(shí)定量熒光PCR測定
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 總RNA的質(zhì)量與濃度
        5.3.2 異源三倍體中涉及減數(shù)分裂及花藥發(fā)育幾個(gè)關(guān)鍵基因表達(dá)量變化分析
    5.4 討論
結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
附錄一：本實(shí)驗(yàn)所用主要儀器設(shè)備
個(gè)人簡介
致謝



本文編號(hào)：3846162