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沼澤紅假單胞菌pucBA基因的敲除及其特性研究

發(fā)布時間:2023-06-04 03:24
  紫細菌作為不產(chǎn)氧光合細菌的一大類群,是研究光合作用機理的模式生物,在光適應過程中進化出了多種響應機制,例如調(diào)控外周捕光復合體(LH2)的數(shù)量和形成異常光譜的LH2,如LH3(B800-820)和LH4(B800-low-850)。目前對于異常光譜LH2形成機制的認識主要是由于LH2的αβ多肽中關鍵氨基酸發(fā)生突變,以及在基因組中存在編碼αβ肽的多拷貝pucBA基因。關于異常光譜LH2是否有利于菌體適應低光的生長,目前還不甚清楚,僅報道少數(shù)菌株中的LH3比LH2能量傳遞效率高,而有關LH4的研究鮮有報道,尤其缺乏其低光促生長的實驗證據(jù)。因此,針對異常光譜LH2是否有利于菌體適應低光生長以及多拷貝pucBA基因在細菌生長過程中貢獻尚不明確的問題,本研究采用基因敲除的方法,以沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudononas palustris)CGA009為材料,依次敲除了編碼LH2多肽的5對pucBA基因,共獲5個缺失突變株,對其進行了生物學特性研究;并將LH4(pucBAd)基因回補至pucBA基因全部缺失的突變株中。本研究揭示出LH4在低光強下更有利于菌株生長,提出了一種新的LH4低光促...

【文章頁數(shù)】:110 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
縮略詞中英對照表
第1章 緒論
    1.1 紫細菌色素蛋白復合體的研究進展
        1.1.1 光合作用單元
        1.1.2 RC-LH1 的功能與結構
        1.1.3 LH2 的功能與結構
    1.2 異常光譜LH2 的研究進展
        1.2.1 異常光譜LH2 的類型
        1.2.2 異常光譜LH2 的結構
        1.2.3 異常光譜LH2 的形成機制
    1.3 本課題的研究內(nèi)容和創(chuàng)新性
        1.3.1 本課題的研究內(nèi)容
        1.3.2 本課題的創(chuàng)新性
第2章 沼澤紅假單胞菌CGA009 LH4 低光促生長作用機制的探究
    2.1 引言
    2.2 材料
        2.2.1 菌株與質(zhì)粒
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 主要儀器
    2.3 方法
        2.3.1 培養(yǎng)基的配制與菌株的培養(yǎng)
        2.3.2 引物設計
        2.3.3 重組載體的構建與驗證
        2.3.4 pucBAd缺失突變子的篩選與驗證
        2.3.5 pucBAd基因?qū)旯膺m應性的影響
        2.3.6 LH2與LH4 能量傳遞活性的比較
    2.4 結果與分析
        2.4.1 重組載體的構建與驗證
        2.4.2 pucBAd缺失突變子的篩選與驗證
        2.4.3 pucBAd基因?qū)旯膺m應性的影響
        2.4.4 LH2與LH4 能量傳遞活性的比較
    2.5 討論
    2.6 小結
第3章 沼澤紅假單胞菌CGA009ΔpucBA突變株的構建及其特性探究
    3.1 引言
    3.2 材料
        3.2.1 菌株與質(zhì)粒
        3.2.2 主要試劑
        3.2.3 主要儀器
    3.3 方法
        3.3.1 培養(yǎng)基的配制和菌株的培養(yǎng)
        3.3.2 引物設計
        3.3.3 pucBA基因敲除
        3.3.4 pucBA基因?qū)旯膺m應性的影響
    3.4 結果與分析
        3.4.1 ΔpucBAda突變株的篩選及鑒定
        3.4.2 ΔpucBAdab突變株的篩選及鑒定
        3.4.3 ΔpucBAdabe突變株的篩選及鑒定
        3.4.4 ΔpucBA突變株的篩選及鑒定
        3.4.5 pucBA基因?qū)旯膺m應性的影響
    3.5 討論
    3.6 小結
第4章 沼澤紅假單胞菌CGA009 pucBAd的回補表達探究
    4.1 引言
    4.2 材料
        4.2.1 菌株和質(zhì)粒
        4.2.2 主要試劑
        4.2.3 主要儀器
    4.3 方法
        4.3.1 培養(yǎng)基的配制和菌株的培養(yǎng)
        4.3.2 引物設計
        4.3.3 基因的回補表達
    4.4 結果與分析
        4.4.1 pucBAd基因在ΔpucBAd中的回補
        4.4.2 pucBAd基因在ΔpucBA中的回補
    4.5 討論
    4.6 小結
第5章 結論與展望
    5.1 結論
    5.2 展望
參考文獻
致謝
附錄A Rps.palustris CGA009 多拷貝pucBA基因信息
個人簡歷、在學期間發(fā)表的學術論文與研究成果



本文編號:3830593

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