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紫花苜蓿MsCIPK8基因的克隆與表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2023-05-31 19:55
  CIPK是植物中一類絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,在植物響應(yīng)逆境脅迫中發(fā)揮著重要的作用。本研究根據(jù)鹽堿脅迫下紫花苜蓿(Medicago sativa L.)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)設(shè)計(jì)引物,通過(guò)RT-PCR克隆獲得紫花苜蓿MsCIPK8基因,該基因CDS全長(zhǎng)1341bp,編碼446個(gè)氨基酸,編碼蛋白相對(duì)分子質(zhì)量50.73 kD,等電點(diǎn)6.72,具有CIPKS家族蛋白所特有的N端激酶域和C端NAF/FISL結(jié)構(gòu)域。生物信息學(xué)分析結(jié)果顯示,MsCIPK8為可溶性蛋白,二級(jí)結(jié)構(gòu)多為無(wú)規(guī)矩卷曲;系統(tǒng)進(jìn)化分析表明,紫花苜蓿MsCIPK8與蒺藜苜蓿(Medicago truncatula Gaertn.)MtCIPK8親緣關(guān)系最近。兩個(gè)蛋白序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)存在4個(gè)差異位點(diǎn),其中3個(gè)在保守結(jié)構(gòu)域內(nèi)。MsCIPK8在低溫、干旱、鹽和鹽堿脅迫下表達(dá)量均受到誘導(dǎo)上調(diào)表達(dá)。低溫脅迫下,MsCIPK8在根和葉中的表達(dá)量分別在12 h和3 h達(dá)到峰值;鹽脅迫下,MsCIPK8在根中的表達(dá)量12 h達(dá)到峰值;鹽堿脅迫下,根和葉中MsCIPK8的表達(dá)量在12 h后持續(xù)高表達(dá);干旱脅迫下,MsCIPK8在根和葉中的表達(dá)量在12 h均達(dá)到峰值...

【文章頁(yè)數(shù)】:9 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 植物材料與試劑
    1.2 材料的培養(yǎng)及處理
    1.3 MsCIPK8基因的克隆
    1.4 MsCIPK8基因的生物信息學(xué)分析
    1.5 MsCIPK8基因的表達(dá)分析
    1.6 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 MsCIPK8基因的克隆
    2.2 MsCIPK8基因的生物信息學(xué)分析
    2.3 紫花苜蓿MsCIPK8基因的組織特異性表達(dá)分析
    2.4 MsCIPK8基因在非生物脅迫下的表達(dá)分析
3 討論



本文編號(hào):3825902

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