目的對(duì)比NaOH裂解法、PBS裂解法以及直接煮沸法3種方法提取乳制品中核酸的提取效果,優(yōu)化提取條件,確定一種更適用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)、簡(jiǎn)便快速的的乳制品DNA快速提取技術(shù)。方法以牛奶、水牛奶、牦牛奶、羊奶、駱駝奶、以及驢奶6種常見的乳制品為材料,分別用NaOH裂解法、PBS裂解法以及直接煮沸法3種提取方法提取乳制品中的DNA,并根據(jù)裂解液用量和裂解時(shí)間進(jìn)行優(yōu)化,通過PCR擴(kuò)增和瓊脂糖凝膠電泳分析,檢測(cè)DNA提取的質(zhì)量和靈敏度。結(jié)果 NaOH裂解法能夠提取所有物種的乳制品DNA,而且可以在最佳裂解條件下提取模擬摻假混合乳的DNA進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)其檢測(cè)限能達(dá)到1%的牛奶含量。結(jié)論該方法取樣量小,成本低,在15 min內(nèi)即可完成快速提取,為實(shí)驗(yàn)室乳制品DNA定性或定量鑒別,以及乳制品的現(xiàn)場(chǎng)摻假鑒別提供了一種快速靈敏低成本的樣品前處理技術(shù)。

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【文章目錄】：
1 引言
2 材料與方法
    2.1 儀器與試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 2種裂解液的配制
        2.2.2 DNA提取
        2.2.3 PCR反應(yīng)
        2.2.4 優(yōu)化裂解液的用量和裂解時(shí)間
        2.2.5 對(duì)DNA快提技術(shù)的靈敏度的檢測(cè)
3 結(jié)果與分析
    3.1 不同提取方法對(duì)乳制品DNA的提取效果
    3.2 裂解液用量和裂解時(shí)間對(duì)乳制品DNA質(zhì)量的影響
    3.3 DNA快提技術(shù)的靈敏度分析
4 結(jié)論與討論



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