環(huán)境水體中典型鄰苯二甲酸酯的污染水平及其復(fù)合暴露對(duì)斑馬魚的生殖毒性
發(fā)布時(shí)間:2023-04-27 02:31
鄰苯二甲酸酯(Phthalate esters;PAEs)是一類環(huán)境激素類物質(zhì),其毒性效應(yīng)及機(jī)制、生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)和健康風(fēng)險(xiǎn)已受到廣泛關(guān)注。研究發(fā)現(xiàn),PAEs可致生物體生殖能力受損并影響后代發(fā)育。目前,PAEs對(duì)水生生物的生殖毒性研究較少,且側(cè)重于單一PAEs暴露,而實(shí)際水體存在多種PAEs的復(fù)合暴露,PAEs復(fù)合暴露對(duì)水生生物的生殖毒性及作用機(jī)制亟待研究。因此,本文在研究鎮(zhèn)江主要河流中典型PAEs的污染水平、來源分布及生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)的基礎(chǔ)上,以斑馬魚為模式生物考察鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)和鄰苯二甲酸二異丁酯(DiBP)復(fù)合暴露的生殖毒性;利用轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)結(jié)合形態(tài)學(xué)、病理學(xué)等分子生物學(xué)方法,探討DBP和DiBP復(fù)合暴露的潛在生殖毒性作用機(jī)制,為PAEs污染物的生態(tài)及健康風(fēng)險(xiǎn)提供理論依據(jù)。主要研究?jī)?nèi)容如下:(1)鎮(zhèn)江主要河流中PAEs的污染水平、來源分布及其生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)研究。采用固相萃取(SPE)和氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用方法測(cè)定豐水期和枯水期運(yùn)糧河、古運(yùn)河和京杭大運(yùn)河的水樣、懸浮顆粒樣(SPM)和沉積物樣中六種典型PAEs(DMP、DEP、DiBP、DBP、DEHP和DOP)的含量。結(jié)果表明...
【文章頁數(shù)】:163 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
1.1 鄰苯二甲酸酯(PAES)的污染現(xiàn)狀
1.1.1 PAEs的理化性質(zhì)
1.1.2 水環(huán)境中PAEs的來源、遷移和轉(zhuǎn)化
1.1.3 PAEs在水環(huán)境中的污染
1.2 PAES的分析檢測(cè)
1.2.1 水環(huán)境中樣品的預(yù)處理方法
1.2.2 PAEs的檢測(cè)方法
1.3 PAES的毒性及其作用機(jī)制研究
1.3.1 鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)的毒性及其作用機(jī)制
1.3.2 鄰苯二甲酸二異丁酯(DiBP)的毒性及其作用機(jī)制
1.3.3 復(fù)合污染的概念、分類及機(jī)制研究
1.3.4 PAEs 的復(fù)合污染毒性及作用機(jī)制
1.4 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)及其在PAES研究中的應(yīng)用
1.4.1 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)概述
1.4.2 轉(zhuǎn)錄組學(xué)在PAEs研究中的應(yīng)用
1.5 選題依據(jù)及研究?jī)?nèi)容
1.5.1 研究目的和意義
1.5.2 研究?jī)?nèi)容和研究路線圖
第二章 鎮(zhèn)江主要河流中幾種典型PAEs的污染水平、來源分布及其生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)
2.1 儀器、材料與試劑
2.2.1 儀器設(shè)備
2.2.2 材料與試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 研究區(qū)域和樣本收集
2.2.2 樣品預(yù)處理
2.2.3 儀器分析
2.2.4 水-SPM相和水-沉積物相中的分配系數(shù)
2.2.5 生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估
2.2.6 數(shù)據(jù)分析
2.3 結(jié)果與討論
2.3.1 水樣、SPM樣和沉積物樣中PAEs的萃取回收率
2.3.2 水相、SPM相和沉積物相中PAEs的季節(jié)分布
2.3.3 PAEs在水-SPM相和水-沉積物相中的分配
2.3.4 PAEs的潛在污染源分析
2.3.5 PAEs的潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估
2.4 本章小結(jié)
第三章 DBP和 DiBP復(fù)合暴露對(duì)雄性斑馬魚的生殖毒性及其作用機(jī)制研究
3.1 儀器、材料與試劑
3.1.1 儀器
3.1.2 試劑和材料
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 斑馬魚的飼養(yǎng)
3.2.2 暴露實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
3.2.3 樣本采集
3.2.4 精巢組織切片制作和病理分析
3.2.5 血漿中性激素含量的測(cè)定
3.2.6 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析
3.2.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)驗(yàn)證
3.2.8 數(shù)據(jù)分析
3.3 結(jié)果與討論
3.3.1 暴露水樣中DBP和 DiBP的實(shí)測(cè)濃度
3.3.2 生殖形態(tài)測(cè)量參數(shù)
3.3.3 血漿性激素含量的測(cè)定
3.3.4 精巢組織病理分析
3.3.5 精巢轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果和生物信息學(xué)分析
3.3.6 RT-qPCR驗(yàn)證
3.4 本章小結(jié)
第四章 DBP和 DiBP復(fù)合暴露對(duì)雌性斑馬魚的生殖毒性及其作用機(jī)制
4.1 儀器、材料與試劑
4.1.1 儀器
4.1.2 試劑和材料
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 斑馬魚的飼養(yǎng)
4.2.2 化學(xué)暴露和化學(xué)分析
4.2.3 樣本收集
4.2.4 卵巢組織病理學(xué)分析
4.2.5 性激素測(cè)定
4.2.6 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析
4.2.7 RT-qPCR驗(yàn)證
4.2.8 數(shù)據(jù)分析
4.3 結(jié)果與討論
4.3.1 暴露水樣分析
4.3.2 生殖形態(tài)測(cè)量參數(shù)
4.3.3 血漿性激素水平
4.3.4 卵巢組織病理分析
4.3.5 卵巢轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果和生物信息學(xué)分析
4.3.6 RT-qPCR驗(yàn)證
4.4 本章小結(jié)
第五章 親本DBP和 DiBP復(fù)合暴露對(duì)斑馬魚子代的早期發(fā)育毒性及其作用機(jī)制
5.1 儀器、材料與試劑
5.1.1 儀器
5.1.2 試劑和材料
5.2 實(shí)驗(yàn)方法
5.2.1 胚胎培養(yǎng)液的配置
5.2.2 斑馬魚的飼養(yǎng)及暴露實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
5.2.3 暴露液中DBP和 DiBP含量的檢測(cè)
5.2.4 子代早期發(fā)育毒性評(píng)估
5.2.5 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析
5.2.6 RT-qPCR驗(yàn)證
5.2.7 數(shù)據(jù)分析
5.3 結(jié)果與討論
5.3.1 暴露水樣中DBP和 DiBP的實(shí)測(cè)濃度
5.3.2 親本斑馬魚的產(chǎn)卵量
5.3.3 子代早期發(fā)育指標(biāo)統(tǒng)計(jì)
5.3.4 子代幼魚轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果和生物信息學(xué)分析
5.3.5 RT-qPCR驗(yàn)證
5.4 本章小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
6.1 主要結(jié)論
6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
6.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀博士學(xué)位期間的主要科研成果
本文編號(hào):3802684
【文章頁數(shù)】:163 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
1.1 鄰苯二甲酸酯(PAES)的污染現(xiàn)狀
1.1.1 PAEs的理化性質(zhì)
1.1.2 水環(huán)境中PAEs的來源、遷移和轉(zhuǎn)化
1.1.3 PAEs在水環(huán)境中的污染
1.2 PAES的分析檢測(cè)
1.2.1 水環(huán)境中樣品的預(yù)處理方法
1.2.2 PAEs的檢測(cè)方法
1.3 PAES的毒性及其作用機(jī)制研究
1.3.1 鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)的毒性及其作用機(jī)制
1.3.2 鄰苯二甲酸二異丁酯(DiBP)的毒性及其作用機(jī)制
1.3.3 復(fù)合污染的概念、分類及機(jī)制研究
1.3.4 PAEs 的復(fù)合污染毒性及作用機(jī)制
1.4 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)及其在PAES研究中的應(yīng)用
1.4.1 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)概述
1.4.2 轉(zhuǎn)錄組學(xué)在PAEs研究中的應(yīng)用
1.5 選題依據(jù)及研究?jī)?nèi)容
1.5.1 研究目的和意義
1.5.2 研究?jī)?nèi)容和研究路線圖
第二章 鎮(zhèn)江主要河流中幾種典型PAEs的污染水平、來源分布及其生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)
2.1 儀器、材料與試劑
2.2.1 儀器設(shè)備
2.2.2 材料與試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 研究區(qū)域和樣本收集
2.2.2 樣品預(yù)處理
2.2.3 儀器分析
2.2.4 水-SPM相和水-沉積物相中的分配系數(shù)
2.2.5 生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估
2.2.6 數(shù)據(jù)分析
2.3 結(jié)果與討論
2.3.1 水樣、SPM樣和沉積物樣中PAEs的萃取回收率
2.3.2 水相、SPM相和沉積物相中PAEs的季節(jié)分布
2.3.3 PAEs在水-SPM相和水-沉積物相中的分配
2.3.4 PAEs的潛在污染源分析
2.3.5 PAEs的潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估
2.4 本章小結(jié)
第三章 DBP和 DiBP復(fù)合暴露對(duì)雄性斑馬魚的生殖毒性及其作用機(jī)制研究
3.1 儀器、材料與試劑
3.1.1 儀器
3.1.2 試劑和材料
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 斑馬魚的飼養(yǎng)
3.2.2 暴露實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
3.2.3 樣本采集
3.2.4 精巢組織切片制作和病理分析
3.2.5 血漿中性激素含量的測(cè)定
3.2.6 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析
3.2.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)驗(yàn)證
3.2.8 數(shù)據(jù)分析
3.3 結(jié)果與討論
3.3.1 暴露水樣中DBP和 DiBP的實(shí)測(cè)濃度
3.3.2 生殖形態(tài)測(cè)量參數(shù)
3.3.3 血漿性激素含量的測(cè)定
3.3.4 精巢組織病理分析
3.3.5 精巢轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果和生物信息學(xué)分析
3.3.6 RT-qPCR驗(yàn)證
3.4 本章小結(jié)
第四章 DBP和 DiBP復(fù)合暴露對(duì)雌性斑馬魚的生殖毒性及其作用機(jī)制
4.1 儀器、材料與試劑
4.1.1 儀器
4.1.2 試劑和材料
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 斑馬魚的飼養(yǎng)
4.2.2 化學(xué)暴露和化學(xué)分析
4.2.3 樣本收集
4.2.4 卵巢組織病理學(xué)分析
4.2.5 性激素測(cè)定
4.2.6 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析
4.2.7 RT-qPCR驗(yàn)證
4.2.8 數(shù)據(jù)分析
4.3 結(jié)果與討論
4.3.1 暴露水樣分析
4.3.2 生殖形態(tài)測(cè)量參數(shù)
4.3.3 血漿性激素水平
4.3.4 卵巢組織病理分析
4.3.5 卵巢轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果和生物信息學(xué)分析
4.3.6 RT-qPCR驗(yàn)證
4.4 本章小結(jié)
第五章 親本DBP和 DiBP復(fù)合暴露對(duì)斑馬魚子代的早期發(fā)育毒性及其作用機(jī)制
5.1 儀器、材料與試劑
5.1.1 儀器
5.1.2 試劑和材料
5.2 實(shí)驗(yàn)方法
5.2.1 胚胎培養(yǎng)液的配置
5.2.2 斑馬魚的飼養(yǎng)及暴露實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
5.2.3 暴露液中DBP和 DiBP含量的檢測(cè)
5.2.4 子代早期發(fā)育毒性評(píng)估
5.2.5 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析
5.2.6 RT-qPCR驗(yàn)證
5.2.7 數(shù)據(jù)分析
5.3 結(jié)果與討論
5.3.1 暴露水樣中DBP和 DiBP的實(shí)測(cè)濃度
5.3.2 親本斑馬魚的產(chǎn)卵量
5.3.3 子代早期發(fā)育指標(biāo)統(tǒng)計(jì)
5.3.4 子代幼魚轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果和生物信息學(xué)分析
5.3.5 RT-qPCR驗(yàn)證
5.4 本章小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
6.1 主要結(jié)論
6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
6.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀博士學(xué)位期間的主要科研成果
本文編號(hào):3802684
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