鄰苯二甲酸酯(Phthalate esters;PAEs)是一類環(huán)境激素類物質(zhì),其毒性效應(yīng)及機制、生態(tài)風險和健康風險已受到廣泛關(guān)注。研究發(fā)現(xiàn),PAEs可致生物體生殖能力受損并影響后代發(fā)育。目前,PAEs對水生生物的生殖毒性研究較少,且側(cè)重于單一PAEs暴露,而實際水體存在多種PAEs的復合暴露,PAEs復合暴露對水生生物的生殖毒性及作用機制亟待研究。因此,本文在研究鎮(zhèn)江主要河流中典型PAEs的污染水平、來源分布及生態(tài)風險的基礎(chǔ)上,以斑馬魚為模式生物考察鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)和鄰苯二甲酸二異丁酯(DiBP)復合暴露的生殖毒性;利用轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)結(jié)合形態(tài)學、病理學等分子生物學方法,探討DBP和DiBP復合暴露的潛在生殖毒性作用機制,為PAEs污染物的生態(tài)及健康風險提供理論依據(jù)。主要研究內(nèi)容如下:(1)鎮(zhèn)江主要河流中PAEs的污染水平、來源分布及其生態(tài)風險研究。采用固相萃取(SPE)和氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用方法測定豐水期和枯水期運糧河、古運河和京杭大運河的水樣、懸浮顆粒樣(SPM)和沉積物樣中六種典型PAEs(DMP、DEP、DiBP、DBP、DEHP和DOP)的含量。結(jié)果表明...

【文章頁數(shù)】：163 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 鄰苯二甲酸酯(PAES)的污染現(xiàn)狀
        1.1.1 PAEs的理化性質(zhì)
        1.1.2 水環(huán)境中PAEs的來源、遷移和轉(zhuǎn)化
        1.1.3 PAEs在水環(huán)境中的污染
    1.2 PAES的分析檢測
        1.2.1 水環(huán)境中樣品的預處理方法
        1.2.2 PAEs的檢測方法
    1.3 PAES的毒性及其作用機制研究
        1.3.1 鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)的毒性及其作用機制
        1.3.2 鄰苯二甲酸二異丁酯(DiBP)的毒性及其作用機制
        1.3.3 復合污染的概念、分類及機制研究
        1.3.4 PAEs 的復合污染毒性及作用機制
    1.4 轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)及其在PAES研究中的應(yīng)用
        1.4.1 轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)概述
        1.4.2 轉(zhuǎn)錄組學在PAEs研究中的應(yīng)用
    1.5 選題依據(jù)及研究內(nèi)容
        1.5.1 研究目的和意義
        1.5.2 研究內(nèi)容和研究路線圖
第二章 鎮(zhèn)江主要河流中幾種典型PAEs的污染水平、來源分布及其生態(tài)風險
    2.1 儀器、材料與試劑
        2.2.1 儀器設(shè)備
        2.2.2 材料與試劑
    2.2 實驗方法
        2.2.1 研究區(qū)域和樣本收集
        2.2.2 樣品預處理
        2.2.3 儀器分析
        2.2.4 水-SPM相和水-沉積物相中的分配系數(shù)
        2.2.5 生態(tài)風險評估
        2.2.6 數(shù)據(jù)分析
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 水樣、SPM樣和沉積物樣中PAEs的萃取回收率
        2.3.2 水相、SPM相和沉積物相中PAEs的季節(jié)分布
        2.3.3 PAEs在水-SPM相和水-沉積物相中的分配
        2.3.4 PAEs的潛在污染源分析
        2.3.5 PAEs的潛在生態(tài)風險評估
    2.4 本章小結(jié)
第三章 DBP和 DiBP復合暴露對雄性斑馬魚的生殖毒性及其作用機制研究
    3.1 儀器、材料與試劑
        3.1.1 儀器
        3.1.2 試劑和材料
    3.2 實驗方法
        3.2.1 斑馬魚的飼養(yǎng)
        3.2.2 暴露實驗設(shè)計
        3.2.3 樣本采集
        3.2.4 精巢組織切片制作和病理分析
        3.2.5 血漿中性激素含量的測定
        3.2.6 轉(zhuǎn)錄組測序分析
        3.2.7 實時熒光定量PCR(RT-qPCR)驗證
        3.2.8 數(shù)據(jù)分析
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 暴露水樣中DBP和 DiBP的實測濃度
        3.3.2 生殖形態(tài)測量參數(shù)
        3.3.3 血漿性激素含量的測定
        3.3.4 精巢組織病理分析
        3.3.5 精巢轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果和生物信息學分析
        3.3.6 RT-qPCR驗證
    3.4 本章小結(jié)
第四章 DBP和 DiBP復合暴露對雌性斑馬魚的生殖毒性及其作用機制
    4.1 儀器、材料與試劑
        4.1.1 儀器
        4.1.2 試劑和材料
    4.2 實驗方法
        4.2.1 斑馬魚的飼養(yǎng)
        4.2.2 化學暴露和化學分析
        4.2.3 樣本收集
        4.2.4 卵巢組織病理學分析
        4.2.5 性激素測定
        4.2.6 轉(zhuǎn)錄組測序分析
        4.2.7 RT-qPCR驗證
        4.2.8 數(shù)據(jù)分析
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 暴露水樣分析
        4.3.2 生殖形態(tài)測量參數(shù)
        4.3.3 血漿性激素水平
        4.3.4 卵巢組織病理分析
        4.3.5 卵巢轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果和生物信息學分析
        4.3.6 RT-qPCR驗證
    4.4 本章小結(jié)
第五章 親本DBP和 DiBP復合暴露對斑馬魚子代的早期發(fā)育毒性及其作用機制
    5.1 儀器、材料與試劑
        5.1.1 儀器
        5.1.2 試劑和材料
    5.2 實驗方法
        5.2.1 胚胎培養(yǎng)液的配置
        5.2.2 斑馬魚的飼養(yǎng)及暴露實驗設(shè)計
        5.2.3 暴露液中DBP和 DiBP含量的檢測
        5.2.4 子代早期發(fā)育毒性評估
        5.2.5 轉(zhuǎn)錄組測序分析
        5.2.6 RT-qPCR驗證
        5.2.7 數(shù)據(jù)分析
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 暴露水樣中DBP和 DiBP的實測濃度
        5.3.2 親本斑馬魚的產(chǎn)卵量
        5.3.3 子代早期發(fā)育指標統(tǒng)計
        5.3.4 子代幼魚轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果和生物信息學分析
        5.3.5 RT-qPCR驗證
    5.4 本章小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 主要結(jié)論
    6.2 創(chuàng)新點
    6.3 展望
參考文獻
致謝
攻讀博士學位期間的主要科研成果



本文編號：3802684