馬鈴薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是嚴(yán)重危害茄科作物的一種病毒,揭示馬鈴薯Y病毒與寄主的互作關(guān)系將為研究馬鈴薯Y病毒的致病機(jī)理及有效控制提供理論依據(jù)。本課題組在前期的工作中從山西煙草根際土壤中分離得到一株對(duì)馬鈴薯Y病毒具有鈍化效果的細(xì)菌,經(jīng)16S r RNA及Biolog Micro Plate鑒定為黏質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcescen-S3)。通過蛋白質(zhì)組學(xué)及泛素化組學(xué)聯(lián)合分析,初步篩選出Nb Hsc70-2蛋白,推測(cè)該蛋白泛素化修飾在Serratia marcescen-S3抗病毒誘導(dǎo)抗性作用機(jī)制中可能起重要作用,本研究通過多種生物化學(xué)與分子生物學(xué)方法,進(jìn)一步揭示寄主Nb Hsc70-2蛋白的泛素化修飾在黏質(zhì)沙雷氏菌S3誘導(dǎo)抗性中的作用機(jī)理,主要研究結(jié)果如下:(1)黏質(zhì)沙雷氏菌S3是一株具有抗病毒生物活性的細(xì)菌菌株,在1.0×10⁹CFU/m L條件下對(duì)馬鈴薯Y病毒抑制作用可達(dá)到100%,以S3菌株處理的本氏煙為目標(biāo)材料,選取了S3防治馬鈴薯Y病毒最佳反應(yīng)時(shí)間點(diǎn),通過非標(biāo)定量技術(shù)、高效液相色譜分級(jí)技術(shù)、泛素化肽段的富集技術(shù)以及基...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 植物病毒病害防治現(xiàn)狀
    1.2 抗病毒制劑作用機(jī)理研究
        1.2.1 抗病毒制劑對(duì)寄主的作用
        1.2.2 抗病毒制劑對(duì)病毒的作用
    1.3 植物Hsp70熱激蛋白研究概況
        1.3.1 植物Hsp70的結(jié)構(gòu)
        1.3.2 Hsp70的功能
        1.3.3 Hsp70與病毒侵染
    1.4 泛素化修飾在抗病毒天然免疫中的作用
        1.4.1 泛素化修飾調(diào)控天然免疫信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程
        1.4.2 E3連接酶和病毒蛋白在抗病毒天然免疫信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)控中發(fā)揮作用
    1.5 研究內(nèi)容及意義
第二章 SERRATIA MARCESCENS-S3 發(fā)酵液誘導(dǎo)煙草蛋白組學(xué)和泛素化組學(xué)分析及NBHSC70-2基因克隆
    2.1 材料與方法
        2.1.1 植物材料及培養(yǎng)條件
        2.1.2 供試菌株
        2.1.3 試驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果分析
        2.2.1 Serratia Marcescens-S3 發(fā)酵液誘導(dǎo)煙草蛋白組學(xué)和泛素化組學(xué)聯(lián)合分析
        2.2.2 NbHsc70-2基因克隆與序列分析
        2.2.3 NbHsc70-2組織表達(dá)特異性
第三章 NBHSC70-2 對(duì)馬鈴薯Y病毒的促進(jìn)作用
    3.1 材料與方法
        3.1.1 植物材料與培養(yǎng)條件
        3.1.2 供試毒株及菌株
        3.1.3 載體與質(zhì)粒
        3.1.4 試驗(yàn)方法
    3.2 結(jié)果分析
        3.2.1 PVY侵染對(duì)Nb Hsc70-2 的影響
        3.2.2 沉默Nb Hsc70-2對(duì)PVY積累量的影響
        3.2.3 過表達(dá)Nb Hsc70-2對(duì)PVY積累量的影響
第四章 NBHSC70-2 及其泛素化修飾在SERRATIA MARCESCENS-S3誘導(dǎo)煙草獲得抗性中的作用分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 植物材料及培養(yǎng)條件
        4.1.2 供試毒株及菌株
        4.1.3 試驗(yàn)方法
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 驗(yàn)證Nb Hsc70-2在Serratia Marcescens-S3 誘導(dǎo)抗性的作用
        4.2.2 Serratia Marcescens-S3 抑制由PVY誘導(dǎo)產(chǎn)生的Nb Hsc70-2 蛋白的增加
        4.2.3 抑制泛素化修飾導(dǎo)致Serratia Marcescens-S3 抑制的Nb Hsc70-2 蛋白合成失效
第五章 討論
    5.1 蛋白組學(xué)與泛素化組學(xué)分析揭示Serratia Marcescens-S3 菌株誘導(dǎo)抗性機(jī)制
    5.2 Nb Hsc70-2 促進(jìn)馬鈴薯Y病毒的復(fù)制侵染
    5.3 NbHsc70-2的泛素化修飾誘導(dǎo)煙草獲得抗病毒活性
致謝
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡介



本文編號(hào)：3753792