根負(fù)責(zé)吸收水分和養(yǎng)分,是重要的植物組織,但易受生物及非生物脅迫,影響作物的生長(zhǎng)發(fā)育和產(chǎn)量。設(shè)計(jì)合成根特異啟動(dòng)子,可為與脅迫相關(guān)的抗性基因在作物根部的功能研究及高效表達(dá)提供候選啟動(dòng)子。文中將4拷貝的根特異性順式作用元件（OSE1ROOTNODULE、OSE2ROOTNODULE、SP8BFIBSP8AIB和ROOTMOTIFAPOX1）以串聯(lián)排列方式設(shè)計(jì)合成了一個(gè)根特異性模塊（pro-SRS）,并與來(lái)自CaMV35S啟動(dòng)子的最小啟動(dòng)子融合,合成一個(gè)人工合成啟動(dòng)子SRSP。通過(guò)替換CaMV35S啟動(dòng)子將SRSP啟動(dòng)子克隆到pCAMBIA2300.1中以驅(qū)動(dòng)GUS表達(dá)。將攜帶SRSP啟動(dòng)子的構(gòu)建體通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)化到煙草中。GUS組織化學(xué)染色分析和實(shí)時(shí)PCR （RT-PCR）分析顯示SRSP啟動(dòng)子在轉(zhuǎn)基因煙草中賦予根特異性表達(dá)。說(shuō)明順式作用元件重復(fù)排列可實(shí)現(xiàn)啟動(dòng)子預(yù)期功能,本研究為理性設(shè)計(jì)植物組織特異啟動(dòng)子奠定了理論基礎(chǔ)。 

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

轉(zhuǎn)SRSP煙草GUS染色后的根部的橫切圖與縱切圖

pro-SRS、35S-mini promoter、?模塊及啟動(dòng)子SRSP序列PCR擴(kuò)增結(jié)果

人工合成根特異性啟動(dòng)子SRSP結(jié)構(gòu)示意圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]水稻組織特異型人工合成啟動(dòng)子的設(shè)計(jì)、構(gòu)建及功能鑒定[J]. 王睿,朱夢(mèng)琳,高方遠(yuǎn),任鄄勝,陸賢軍,任光俊,林擁軍.  作物學(xué)報(bào). 2017(06)

碩士論文
[1]花生根特異啟動(dòng)子的克隆及功能分析[D]. 馮艷芳.山西師范大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3705659