發(fā)布時(shí)間：2022-10-30 20:02

　　目的:探討海馬外泌體中miR-219a-1-3p對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞（neural stem cells, NSCs）向神經(jīng)元分化的影響。方法:切割穹窿海馬傘,構(gòu)建去神經(jīng)支配海馬大鼠模型,分離提取切割組和正常組海馬外泌體,與SD大鼠海馬NSCs共培養(yǎng),利用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（real-time polymerase chain reaction, Real-time PCR）、Western Blot和免疫熒光技術(shù)檢測(cè)外泌體在NSCs向神經(jīng)元分化中的作用;通過(guò)RNA-seq方法檢測(cè)外泌體中表達(dá)變化的miRNA,利用Real-time PCR對(duì)差異表達(dá)的miR-219a-1-3p進(jìn)行驗(yàn)證,并檢測(cè)其在成年SD大鼠各組織以及NSCs、星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元中的表達(dá)水平。利用miR-219a-1-3p mimic轉(zhuǎn)染NSCs,Real-time PCR、Western Blot和細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)miR-219a-1-3p對(duì)NSCs向神經(jīng)元分化的影響。結(jié)果:切割組海馬組織外泌體可促進(jìn)NSCs向神經(jīng)元分化;海馬組織外泌體中差異表達(dá)的miR-219a-1-3p與RNA-seq結(jié)果一致;miR-219a-1... 

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 海馬微環(huán)境總外泌體提取
    1.3 胚胎海馬NSCs分離培養(yǎng)及體外誘導(dǎo)分化
    1.4神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞的分離培養(yǎng)
    1.5 Real-time PCR
    1.6 Western Blot
    1.7 細(xì)胞免疫熒光
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 大鼠海馬外泌體促進(jìn)NSCs向神經(jīng)元分化
    2.2 大鼠海馬外泌體RNA-seq及驗(yàn)證
    2.3 miR-219a-1-3p在大鼠多組織細(xì)胞中的表達(dá)
    2.4 miR-219a-1-3p對(duì)NSCs向神經(jīng)元分化的影響
3 討論
李雯，等.海馬外泌體中miR-219a-1-3p對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元分化的影響



本文編號(hào)：3699394