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CRISPR/Cas9系統(tǒng)中的脫靶效應(yīng)及檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展

發(fā)布時(shí)間:2022-10-21 08:46
  聚類(lèi)規(guī)則間隔的短回文重復(fù)序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)及其相關(guān)蛋白(Cas9蛋白)已經(jīng)成為精確編輯基因組的強(qiáng)大工具。CRISPR/Cas9系統(tǒng)源自于細(xì)菌和古生菌的免疫機(jī)制,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、易于設(shè)計(jì),僅需改變單引導(dǎo)RNA(single-guide RNA,sgRNA)上的一小段序列即可快速實(shí)現(xiàn)對(duì)不同基因位點(diǎn)的編輯。與鋅指核酸酶(Zinc finger nucleases,ZFN)和轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)物核酸酶(Transcription activator-like effector nucleases,TALEN)技術(shù)相比,CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯效率更高、特異性更強(qiáng)。但在應(yīng)用過(guò)程中不可避免的脫靶事件嚴(yán)重限制了CRISPR/Cas9系統(tǒng)的進(jìn)一步發(fā)展,因此本篇文章就CRISPR/Cas9系統(tǒng)的脫靶類(lèi)型、影響因素、降低策略以及脫靶檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行綜述。 

【文章頁(yè)數(shù)】:10 頁(yè)

【文章目錄】:
1 CRISPR/Cas9系統(tǒng)簡(jiǎn)述
2 CRISPR/Cas9系統(tǒng)的脫靶類(lèi)型
3 脫靶影響因素
    3.1 PAM序列
    3.2 sgRNA
    3.3 其他
4 降低脫靶效應(yīng)的策略
    4.1 sgRNA合理設(shè)計(jì)及修飾
    4.2 Cas9突變體
    4.3 Cas9類(lèi)似物
    4.4 Cas9/sgRNA濃度改變
5 脫靶檢測(cè)技術(shù)
6 總結(jié)與展望



本文編號(hào):3695315

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