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CRISPR/Cas9系統(tǒng)中的脫靶效應及檢測技術研究進展

發(fā)布時間:2022-10-21 08:46
  聚類規(guī)則間隔的短回文重復序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)及其相關蛋白(Cas9蛋白)已經(jīng)成為精確編輯基因組的強大工具。CRISPR/Cas9系統(tǒng)源自于細菌和古生菌的免疫機制,結構簡單、易于設計,僅需改變單引導RNA(single-guide RNA,sgRNA)上的一小段序列即可快速實現(xiàn)對不同基因位點的編輯。與鋅指核酸酶(Zinc finger nucleases,ZFN)和轉錄激活因子樣效應物核酸酶(Transcription activator-like effector nucleases,TALEN)技術相比,CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯效率更高、特異性更強。但在應用過程中不可避免的脫靶事件嚴重限制了CRISPR/Cas9系統(tǒng)的進一步發(fā)展,因此本篇文章就CRISPR/Cas9系統(tǒng)的脫靶類型、影響因素、降低策略以及脫靶檢測技術進行綜述。 

【文章頁數(shù)】:10 頁

【文章目錄】:
1 CRISPR/Cas9系統(tǒng)簡述
2 CRISPR/Cas9系統(tǒng)的脫靶類型
3 脫靶影響因素
    3.1 PAM序列
    3.2 sgRNA
    3.3 其他
4 降低脫靶效應的策略
    4.1 sgRNA合理設計及修飾
    4.2 Cas9突變體
    4.3 Cas9類似物
    4.4 Cas9/sgRNA濃度改變
5 脫靶檢測技術
6 總結與展望



本文編號:3695315

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