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來源于嗜堿芽孢桿菌N16-5甘露聚糖利用基因簇的乙酰酯酶AesA的克隆及性質(zhì)分析

發(fā)布時(shí)間:2022-10-21 09:05
  天然來源的多糖底物上常存在乙酰基取代,特異性的乙酰酯酶能夠切割這些底物上的乙;,從而有利于聚糖底物的進(jìn)一步降解。對(duì)Bacillus sp. N16-5甘露聚糖利用基因簇上編碼的乙酰酯酶AesA進(jìn)行了基因克隆和異源表達(dá),并對(duì)其酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了研究。aesA基因長957bp,編碼318個(gè)氨基酸,屬于碳水化合物酯酶第7家族。AesA對(duì)4-甲基傘形酮乙酸酯(4-methylumbelliferyl-acetate)表現(xiàn)出較好的催化活性,金屬離子Fe3+、Fe2+、Mn2+及Cu2+對(duì)AesA活性均有不同程度的促進(jìn)作用。AesA與甘露聚糖酶ManA對(duì)乙酰化的甘露聚糖底物具有顯著的協(xié)同作用。此項(xiàng)研究有助于理解嗜堿芽孢桿菌Bacillus sp. N16-5對(duì)甘露聚糖的水解機(jī)制,并且在甘露聚糖降解中具有潛在的應(yīng)用前景。 

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 菌種和表達(dá)載體
        1.1.2 主要試劑及分析軟件
    1.2 方法
        1.2.1 序列分析
        1.2.2 重組菌株的構(gòu)建
        1.2.3 目的蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)及純化
        1.2.4 Aes A酶活及動(dòng)力學(xué)常數(shù)的測定
        1.2.5 Aes A酶學(xué)性質(zhì)分析
        1.2.6 Aes A與β-甘露聚糖酶對(duì)乙;事毒厶堑孜飬f(xié)同作用的測定
2 結(jié)果與分析
    2.1 序列分析
    2.2 異源表達(dá)及純化
    2.3 Aes A的酶活及動(dòng)力學(xué)參數(shù)測定
    2.4 Aes A的酶學(xué)性質(zhì)分析
    2.5 Aes A和β-甘露聚糖酶ManA對(duì)乙酰甘露聚糖底物的協(xié)同作用
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]甘露聚糖酶協(xié)同水解甘露聚糖研究進(jìn)展[J]. 王瑤,王睿琪,那金,郭尚旭,趙丹.  中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2017(21)
[2]乙酰木聚糖酯酶研究進(jìn)展[J]. 吳紅麗,薛勇,劉健,甘禮惠,龍敏南.  中國生物工程雜志. 2016(03)
[3]乙酸酐對(duì)魔芋葡甘聚糖的改性[J]. 光善儀,宮曉梅,高曉燕,徐洪耀.  精細(xì)化工. 2004(07)
[4]甘露消毒丹的臨床運(yùn)用[J]. 張?jiān)瞥?,張艷 ,張洋 ,張宏亮.  陜西中醫(yī). 2002(02)



本文編號(hào):3695343

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