星形膠質(zhì)細(xì)胞來源的GJA1-20k在氧化應(yīng)激后參與神經(jīng)元保護作用的機制
發(fā)布時間:2022-07-27 17:56
目的:觀察星形膠質(zhì)細(xì)胞(astrocyte)通過上調(diào)神經(jīng)元(neuron)內(nèi)源性縫隙連接蛋白α1截短單體-20k(gap junction protein alpha 1 truncated monomer-20k,GJA1-20k)參與氧化應(yīng)激損傷后神經(jīng)保護作用的機制。方法:采用C57BL/6胎鼠以原代培養(yǎng)法獲取神經(jīng)元及星形膠質(zhì)細(xì)胞,建立共培養(yǎng)模型,給予神經(jīng)元過氧化氫(H2O2)損傷,及星形膠質(zhì)細(xì)胞胰島素樣生長因子1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)受體阻滯劑AG1024,分別設(shè)立Neuron組、Neuron+Stress組、Neuron+Astrocyte+Stress組及Neuron+Astrocyte+Stress+AG1024組,通過Western blot測定神經(jīng)元GJA1-20k、去磷酸化(non-phosphorylated,NP)-Cx43的表達(dá),谷氨酸轉(zhuǎn)運酶(glutamate transporter-1,GLT-1)、線粒體功能相關(guān)蛋白(PGC-1α、mtTFA、Tom20、CoxⅣ)、凋亡相關(guān)蛋白(Bcl-2、Bax、Cas...
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 原代細(xì)胞的獲取及共培養(yǎng)細(xì)胞模型的建立
1.2.2 實驗分組
1.2.3 Western blot實驗
1.2.4 ELFA、ELISA法
1.2.5 Annexin V-FITC/PI法測定神經(jīng)元凋亡
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
2.1 星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)能顯著升高神經(jīng)元內(nèi)GJA1-20k和NP-Cx43表達(dá),且與IGF-1相關(guān)
2.2 星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)能顯著升高神經(jīng)元內(nèi)興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白GLT-1表達(dá),且與IGF-1相關(guān)
2.3 星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)能顯著升高神經(jīng)元線粒體功能相關(guān)蛋白的表達(dá),且與IGF-1相關(guān)
2.4 星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)能明顯上調(diào)凋亡抑制蛋白Bcl-2的表達(dá),下調(diào)神經(jīng)元內(nèi)凋亡促進蛋白Bax、Caspases-9的表達(dá),且與IGF-1相關(guān)
2.5 星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)可明顯抑制NAPDH氧化酶活性,且與IGF-1相關(guān)
2.6 星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)可明顯降低神經(jīng)元炎性代謝產(chǎn)物的表達(dá),且與IGF-1相關(guān)
2.7 星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)可明顯降低神經(jīng)元的凋亡率,且與IGF-1相關(guān)
3 討論
本文編號:3665916
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 原代細(xì)胞的獲取及共培養(yǎng)細(xì)胞模型的建立
1.2.2 實驗分組
1.2.3 Western blot實驗
1.2.4 ELFA、ELISA法
1.2.5 Annexin V-FITC/PI法測定神經(jīng)元凋亡
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
2.1 星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)能顯著升高神經(jīng)元內(nèi)GJA1-20k和NP-Cx43表達(dá),且與IGF-1相關(guān)
2.2 星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)能顯著升高神經(jīng)元內(nèi)興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白GLT-1表達(dá),且與IGF-1相關(guān)
2.3 星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)能顯著升高神經(jīng)元線粒體功能相關(guān)蛋白的表達(dá),且與IGF-1相關(guān)
2.4 星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)能明顯上調(diào)凋亡抑制蛋白Bcl-2的表達(dá),下調(diào)神經(jīng)元內(nèi)凋亡促進蛋白Bax、Caspases-9的表達(dá),且與IGF-1相關(guān)
2.5 星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)可明顯抑制NAPDH氧化酶活性,且與IGF-1相關(guān)
2.6 星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)可明顯降低神經(jīng)元炎性代謝產(chǎn)物的表達(dá),且與IGF-1相關(guān)
2.7 星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)可明顯降低神經(jīng)元的凋亡率,且與IGF-1相關(guān)
3 討論
本文編號:3665916
本文鏈接:http://sikaile.net/projectlw/swxlw/3665916.html
最近更新
教材專著