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高選擇性半胱氨酸熒光探針的合成及其在活細(xì)胞中的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2022-02-20 13:44
  目的同型半胱氨酸(Hcy)、半胱氨酸(Cys)和谷胱甘肽(GSH)在生理過程中起著關(guān)鍵作用。由于Cys、Hcy和GSH的結(jié)構(gòu)和化學(xué)性質(zhì)的相似性,對(duì)它們的識(shí)別一直是一個(gè)巨大的挑戰(zhàn)。旨在合成一種熒光分子用于單一識(shí)別Cys。方法基于Cys與丙烯酸酯的共軛加成環(huán)化反應(yīng),合成用于檢測(cè)Cys的近紅外熒光探針CN-NIR。在磷酸鹽緩沖液(PBS pH=7.4,含20%DMF)體系中,以紫外吸收光譜和熒光光譜為研究手段,測(cè)試探針CN-NIR對(duì)Cys的選擇性識(shí)別。結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,探針CN-NIR能夠高選擇性識(shí)別Cys,而其他19種氨基酸和6種干擾性金屬離子的存在幾乎不會(huì)干擾其識(shí)別過程。當(dāng)加入Cys后,探針溶液顏色由粉色變?yōu)樽仙?探針熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),并且熒光強(qiáng)度與Cys濃度(0~140μM)呈現(xiàn)良好線性關(guān)系(R2=0.991),對(duì)Cys的檢測(cè)限為1.03μM,該值低于細(xì)胞中Cys的正常含量(30~200μM)。同時(shí),探針可以在生理pH條件下有效識(shí)別Cys。推測(cè)探針對(duì)Cys的識(shí)別過程可能是共軛環(huán)加成機(jī)制。此外,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明,探針在HeLa細(xì)胞中具有較低的細(xì)胞毒性,并且能夠有效地識(shí)別... 

【文章來源】:河北北方學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2020,36(01)

【文章頁(yè)數(shù)】:9 頁(yè)

【文章目錄】:
1 實(shí)驗(yàn)部分
    1.1 試劑與儀器
    1.2 探針的合成(圖2)
        1.2.1 化合物1的合成[29]
        1.2.2 化合物2的合成[29]
        1.2.3 化合物3的合成[30]
        1.2.4 化合物CN-OH的合成[29]
        1.2.5 探針CN-NIR的合成[31]
    1.3 細(xì)胞毒活性及細(xì)胞成像
        1.3.1 MTT法[32]
        1.3.1 細(xì)胞成像
2 結(jié)果與討論
    2.1 光譜性質(zhì)
    2.2 探針CN-NIR對(duì)Cys的選擇性識(shí)別
    2.3 pH值對(duì)探針CN-NIR和Cys反應(yīng)的影響
    2.4 細(xì)胞成像
3 結(jié)論與討論



本文編號(hào):3635168

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