谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶（EC 2.3.2.13,transglutaminase,TG）是一種催化肽或蛋白質(zhì)伯胺之間的γ-羧酰胺基團(tuán)與酰胺基團(tuán)發(fā)生酰基轉(zhuǎn)移反應(yīng)的酶。蛋白質(zhì)或多肽經(jīng)谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶催化交聯(lián)后穩(wěn)定性較高,對蛋白酶降解和化學(xué)損傷具有更高的抵抗力,因此,它們被廣泛應(yīng)用于食品、藥物、紡織、材料等各個(gè)工程領(lǐng)域。微生物來源的谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶（MTG）由于底物催化范圍廣泛、酶活不依賴Ca2+存在等優(yōu)點(diǎn),成為目前的研究重點(diǎn),但存在生產(chǎn)成本高、純化過程復(fù)雜的問題。本文以茂源鏈霉菌（Streptomyces mobaraensis）來源的mtg為研究對象,為了提高M(jìn)TG的產(chǎn)量和酶活,分別在枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）和乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）中構(gòu)建MTG組成型和誘導(dǎo)型重組表達(dá)載體,分別對MTG的異源表達(dá)時(shí)間、誘導(dǎo)時(shí)間和誘導(dǎo)劑濃度進(jìn)行優(yōu)化,得到高產(chǎn)量重組B.subtilis菌株和重組L.lactis菌株;通過酶原激活和Ni柱純化,得到高酶活性的MTG,相比于商品MTG,酶原激活后的MTG催化交聯(lián)大豆分離蛋白的能力更強(qiáng)。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:（1）提取S.moba... 

【文章來源】：合肥工業(yè)大學(xué)安徽省211工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶的作用機(jī)制.

圖 1.2 MTG 結(jié)構(gòu)示意圖Fig 1.2 Schematic diagram of MTG structure功能質(zhì)構(gòu)建不可或缺的一類生物大分子，食品工業(yè)研究人

mtg重組表達(dá)載體在E.coli中的構(gòu)建.a:pMA5mtg的構(gòu)建；b:pHT43mtg的構(gòu)建.Fig2.1ConstructionofmtgrecombinantexpressionvectorinE.coli.a:ConstructionofpMA5;b:ConstructionofpHT43.


本文編號：3620433