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‘新泰紅’桃果實線粒體DNA聚合酶基因克隆與表達水平分析

發(fā)布時間:2022-02-11 10:12
  線粒體DNA聚合酶基因(PolIB)是植物線粒體DNA損傷修復(fù)過程中的關(guān)鍵基因,對維持線粒體功能,延長果實保質(zhì)期具有重要作用。本研究以‘新泰紅’桃為材料,利用RT-PCR技術(shù)克隆到線粒體DNA聚合酶基因PpPolIB的CDS區(qū)序列全長;蛐蛄蟹治霰砻,Pp PolIB基因CDS區(qū)長度為3 201 bp,編碼1 066個氨基酸。編碼蛋白進行生物信息學(xué)分析顯示,Pp PolIB蛋白的預(yù)測的分子量為11 905.67 kD,理論等電點為7.91。利用MEGA 5.1軟件構(gòu)建系統(tǒng)進化樹,結(jié)果表明PpPolIB與甜櫻桃和梅花的PolIB親緣關(guān)系較近。通過實時熒光定量PCR分析PpPolIB基因表達水平表明,與對照相比,外源NO處理能夠顯著延緩PpPolIB基因的下降,從而保護線粒體功能,維持桃果實貯藏品質(zhì)。本研究結(jié)果為果實采后貯藏保鮮的深入研究奠定了理論基礎(chǔ)。 

【文章來源】:分子植物育種. 2020,18(24)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:6 頁

【部分圖文】:

‘新泰紅’桃果實線粒體DNA聚合酶基因克隆與表達水平分析


桃果實總RNA瓊脂糖凝膠電泳

電泳圖,果實,進化樹,瓊脂糖


桃果實PolⅠB基因PCR擴增電泳

氨基酸序列,親疏,果實,水性


利用MEGA 5.1軟件,將桃果實的PolⅠB蛋白與其他物種的PolⅠB蛋白的氨基酸序列構(gòu)建系統(tǒng)進化樹(圖4),結(jié)果發(fā)現(xiàn)桃果實PolⅠB與其它植物氨基酸序列有較高的同源性,其中,與甜櫻桃(Prunus avium)、梅花(Prunus mume)、白梨(Pyrus x bretschneideri)、蘋果(Malus domestica)、月季(Rosa chinensis)、野草莓(Fragaria vesca subsp.vesca)、酸棗(Ziziphus jujuba)、核桃(Juglans regia)、栓皮櫟(Quercus suber)的相似度分別是97.94%、90.34%、72.89%、73.22%,72.25%、71.31%、63.35%、62.32%、75.72%,說明植物的PolⅠB氨基酸序列具有較高的保守性,其相似度的順序,也與這些植物根據(jù)植物學(xué)分類系統(tǒng)確定的遺傳距離一致。1.5 NO對冷藏桃果實Pp PolⅠB基因表達的影響

【參考文獻】:
期刊論文
[1]人線粒體DNA聚合酶基因的克隆及序列分析[J]. 金洪濤,趙晶華,盛彥敏.  中國生物制品學(xué)雜志. 2015(09)
[2]改良CTAB法提取成熟肥城桃果實的總RNA[J]. 陳長寶,朱樹華,周杰.  山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(05)

碩士論文
[1]高質(zhì)量桃線粒體DNA提取技術(shù)體系的建立及線粒體基因組測序[D]. 張穎.河北科技師范學(xué)院 2019
[2]線粒體聚合酶γ的原核表達及純化[D]. 趙晶華.長春師范大學(xué) 2015



本文編號:3620093

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