目的探討重組家蠶素基因（MBbxⅡ）穩(wěn)定轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞后對(duì)細(xì)胞的生物學(xué)作用.方法將MBbxⅡ基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染于HepG2細(xì)胞中,以轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒及未進(jìn)行轉(zhuǎn)染的HepG2細(xì)胞作為空白對(duì)照組,分別應(yīng)用MTT方法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)率,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期.結(jié)果穩(wěn)定轉(zhuǎn)染MBbxⅡ基因的HepG2細(xì)胞增殖能力增強(qiáng),且細(xì)胞多處于G2和S期.結(jié)論 MBbxⅡ促進(jìn)了HepG2細(xì)胞增殖,可為研究MBbxⅡ在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的胰島素樣作用奠定基礎(chǔ). 

【文章來源】：北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2020,21(01)

【文章頁(yè)數(shù)】：3 頁(yè)

【部分圖文】：

細(xì)胞周期

1)細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:應(yīng)用0.25%胰酶消化終止原細(xì)胞培養(yǎng)液;離心保留細(xì)胞沉淀;應(yīng)用預(yù)冷的0.1 mol PBS進(jìn)行沖洗;離心保留細(xì)胞沉淀;重懸細(xì)胞．2)細(xì)胞固定:應(yīng)用預(yù)冷的70%乙醇1 m L與重懸細(xì)胞混勻;離心保留細(xì)胞沉淀;預(yù)冷0.1 mol PBS重懸細(xì)胞;離心保留細(xì)胞沉淀．3)染色:每個(gè)樣品加0.5 m L碘化丙啶染色液，緩慢重懸細(xì)胞沉淀;37℃避光溫浴30 min.4)流式檢測(cè)和分析:應(yīng)用流式細(xì)胞儀激發(fā)紅色熒光及光散射情況，在波長(zhǎng)488 n m處測(cè)定吸光度值，并行細(xì)胞DNA含量分析和光散射分析．2 結(jié)果

3組細(xì)胞各取3個(gè)樣，并計(jì)算平均值，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示:pcDNA3.1-MBbxⅡ-HepG2組G2+S期細(xì)胞為52.17%，較pcDNA3.1-HepG2組(42.99%)及未轉(zhuǎn)染組(34.221%)HepG2細(xì)胞G2+S期比例增高，進(jìn)一步證實(shí)MBbxⅡ基因?qū)ep G2細(xì)胞具有促進(jìn)增殖作用．見表1，圖3.圖3 細(xì)胞周期

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]重組家蠶素Ⅱ?qū)Σ溉榧?xì)胞胰島素樣作用及其機(jī)制的體外研究[D]. 王玲玲.吉林大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3561456