杜氏鹽藻類胡蘿卜素代謝對光強和光質(zhì)變化的響應(yīng)機制
發(fā)布時間：2021-11-20 18:10
自天津長蘆漢沽鹽場的水樣中分離純化并鑒定了一株杜氏鹽藻,對其培養(yǎng)基和營養(yǎng)模式進(jìn)行篩選;研究了杜氏鹽藻在不同光強、不同光質(zhì)條件下生長、轉(zhuǎn)錄表達(dá)的差異及其適應(yīng)機制:使用光合作用的抑制劑培養(yǎng)杜氏鹽藻,在不同光強條件下探究β-胡蘿卜素生物合成相關(guān)基因與光合電子傳遞鏈氧化還原狀態(tài)的關(guān)系,主要結(jié)果如下:（1）自天津長蘆漢沽鹽場的高鹽水樣中,分離純化得到一株單細(xì)胞綠藻;經(jīng)ITS內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)的PCR擴增、測序、序列比對和系統(tǒng)進(jìn)化樹構(gòu)建,表明該藻株為杜氏鹽藻（Dunalielle salina）。（2）比較七種不同的培養(yǎng)基對杜氏鹽藻生長的影響,發(fā)現(xiàn)改良的Pick培養(yǎng)基培養(yǎng)最適合杜氏鹽藻的生長。分別使用不同濃度的葡萄糖、甘油和乙酸鈉培養(yǎng)杜氏鹽藻,最適合鹽藻生長的有機碳濃度為2 g/L葡萄糖和2 g/L甘油,乙酸鈉的濃度變化對杜氏鹽藻生長的影響沒有顯著性差別。兼養(yǎng)培養(yǎng)時的生物量低于光合自養(yǎng)時的生物量,在使用相同的碳源培養(yǎng)海洋微擬球藻時,也發(fā)現(xiàn)了類似的結(jié)果。（3）使用不同強度的光（150-1500 μmol photons·m-2s-1）培養(yǎng)杜氏鹽藻,結(jié)果表明,杜氏鹽藻生長的最適光強為600 μmol pho...
【文章來源】：中國科學(xué)院大學(xué)(中國科學(xué)院海洋研究所)山東省
【文章頁數(shù)】：157 頁
【學(xué)位級別】：博士
【部分圖文】：
圖２．１水樣采集后的顯微照片（放大倍數(shù)１００倍）
?配制新鮮的培養(yǎng)基，等體積添加至水樣中，對藻細(xì)胞進(jìn)行富集培養(yǎng)。待水樣??由紅色轉(zhuǎn)為綠色后，均勻涂布至固體培養(yǎng)基中。如圖２．２所示，１－２周后，固體??培養(yǎng)基中生長出大小不一的藻落。挑取不同的單藻落至４８孔板中，靜置培養(yǎng)１－２??周，待藻液呈現(xiàn)淡綠色后，使用顯微鏡進(jìn)行觀察。在顯微鏡下選擇游動能力強，??藻細(xì)胞相對較大的藻細(xì)胞，轉(zhuǎn)移至新的４８孔板中使用新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行梯度稀釋??（圖２．３），使藻液中含有盡可能少的藻細(xì)胞。將稀釋后的藻細(xì)胞涂布至固體培??養(yǎng)基中進(jìn)行純化，經(jīng)過２－３次純化后，得到細(xì)胞形態(tài)單一，游動能力強的綠色藻??細(xì)胞（圖２．４?ａ），命名為ＨＧＯＩ。??．?Ｖ??ｈｉ?－；?．?ＸＡ??Ａ??．?？、??？?．Ｖ?？?？：－??圖２．２平板涂布法分離藻細(xì)胞。??Ｆｉｇｕｒｅ?２．２?Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ?ｏｆ?ａｌｇａｌ?ｃｅｌｌｓ?ｂｙ?ｐｌａｔｅ?ｃｏａｔｉｎｇ．??２７??
?配制新鮮的培養(yǎng)基，等體積添加至水樣中，對藻細(xì)胞進(jìn)行富集培養(yǎng)。待水樣??由紅色轉(zhuǎn)為綠色后，均勻涂布至固體培養(yǎng)基中。如圖２．２所示，１－２周后，固體??培養(yǎng)基中生長出大小不一的藻落。挑取不同的單藻落至４８孔板中，靜置培養(yǎng)１－２??周，待藻液呈現(xiàn)淡綠色后，使用顯微鏡進(jìn)行觀察。在顯微鏡下選擇游動能力強，??藻細(xì)胞相對較大的藻細(xì)胞，轉(zhuǎn)移至新的４８孔板中使用新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行梯度稀釋??（圖２．３），使藻液中含有盡可能少的藻細(xì)胞。將稀釋后的藻細(xì)胞涂布至固體培??養(yǎng)基中進(jìn)行純化，經(jīng)過２－３次純化后，得到細(xì)胞形態(tài)單一，游動能力強的綠色藻??細(xì)胞（圖２．４?ａ），命名為ＨＧＯＩ。??．?Ｖ??ｈｉ?－；?．?ＸＡ??Ａ??．?？、??？?．Ｖ?？?？：－??圖２．２平板涂布法分離藻細(xì)胞。??Ｆｉｇｕｒｅ?２．２?Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ?ｏｆ?ａｌｇａｌ?ｃｅｌｌｓ?ｂｙ?ｐｌａｔｅ?ｃｏａｔｉｎｇ．??２７??
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]3種不同培養(yǎng)基對斜生柵藻生長和油脂積累的影響[J]. 王麗娟,楊宋琪,丁麗梅,楊生輝,羅光宏. 中國油脂. 2018(09)
碩士論文
[1]不同氮濃度對埃氏小球藻生長及油脂積累的影響[D]. 邵雪梅.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]部分南海可培養(yǎng)微藻的分子鑒定及富油藻株的篩選[D]. 馮甜.中國海洋大學(xué) 2013
[3]杜氏鹽藻生物學(xué)特征及表達(dá)載體pGEM-D18S-BAR的構(gòu)建[D]. 牛向麗.鄭州大學(xué) 2003
本文編號：3507866
【文章來源】：中國科學(xué)院大學(xué)(中國科學(xué)院海洋研究所)山東省
【文章頁數(shù)】：157 頁
【學(xué)位級別】：博士
【部分圖文】：
圖２．１水樣采集后的顯微照片（放大倍數(shù)１００倍）
?配制新鮮的培養(yǎng)基，等體積添加至水樣中，對藻細(xì)胞進(jìn)行富集培養(yǎng)。待水樣??由紅色轉(zhuǎn)為綠色后，均勻涂布至固體培養(yǎng)基中。如圖２．２所示，１－２周后，固體??培養(yǎng)基中生長出大小不一的藻落。挑取不同的單藻落至４８孔板中，靜置培養(yǎng)１－２??周，待藻液呈現(xiàn)淡綠色后，使用顯微鏡進(jìn)行觀察。在顯微鏡下選擇游動能力強，??藻細(xì)胞相對較大的藻細(xì)胞，轉(zhuǎn)移至新的４８孔板中使用新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行梯度稀釋??（圖２．３），使藻液中含有盡可能少的藻細(xì)胞。將稀釋后的藻細(xì)胞涂布至固體培??養(yǎng)基中進(jìn)行純化，經(jīng)過２－３次純化后，得到細(xì)胞形態(tài)單一，游動能力強的綠色藻??細(xì)胞（圖２．４?ａ），命名為ＨＧＯＩ。??．?Ｖ??ｈｉ?－；?．?ＸＡ??Ａ??．?？、??？?．Ｖ?？?？：－??圖２．２平板涂布法分離藻細(xì)胞。??Ｆｉｇｕｒｅ?２．２?Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ?ｏｆ?ａｌｇａｌ?ｃｅｌｌｓ?ｂｙ?ｐｌａｔｅ?ｃｏａｔｉｎｇ．??２７??
?配制新鮮的培養(yǎng)基，等體積添加至水樣中，對藻細(xì)胞進(jìn)行富集培養(yǎng)。待水樣??由紅色轉(zhuǎn)為綠色后，均勻涂布至固體培養(yǎng)基中。如圖２．２所示，１－２周后，固體??培養(yǎng)基中生長出大小不一的藻落。挑取不同的單藻落至４８孔板中，靜置培養(yǎng)１－２??周，待藻液呈現(xiàn)淡綠色后，使用顯微鏡進(jìn)行觀察。在顯微鏡下選擇游動能力強，??藻細(xì)胞相對較大的藻細(xì)胞，轉(zhuǎn)移至新的４８孔板中使用新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行梯度稀釋??（圖２．３），使藻液中含有盡可能少的藻細(xì)胞。將稀釋后的藻細(xì)胞涂布至固體培??養(yǎng)基中進(jìn)行純化，經(jīng)過２－３次純化后，得到細(xì)胞形態(tài)單一，游動能力強的綠色藻??細(xì)胞（圖２．４?ａ），命名為ＨＧＯＩ。??．?Ｖ??ｈｉ?－；?．?ＸＡ??Ａ??．?？、??？?．Ｖ?？?？：－??圖２．２平板涂布法分離藻細(xì)胞。??Ｆｉｇｕｒｅ?２．２?Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ?ｏｆ?ａｌｇａｌ?ｃｅｌｌｓ?ｂｙ?ｐｌａｔｅ?ｃｏａｔｉｎｇ．??２７??
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]3種不同培養(yǎng)基對斜生柵藻生長和油脂積累的影響[J]. 王麗娟,楊宋琪,丁麗梅,楊生輝,羅光宏. 中國油脂. 2018(09)
碩士論文
[1]不同氮濃度對埃氏小球藻生長及油脂積累的影響[D]. 邵雪梅.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]部分南海可培養(yǎng)微藻的分子鑒定及富油藻株的篩選[D]. 馮甜.中國海洋大學(xué) 2013
[3]杜氏鹽藻生物學(xué)特征及表達(dá)載體pGEM-D18S-BAR的構(gòu)建[D]. 牛向麗.鄭州大學(xué) 2003
本文編號：3507866
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