鈣聯(lián)蛋白（Calnexin）是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的凝集素樣分子伴侶蛋白,也是線粒體結(jié)合內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的重要蛋白,在心臟疾病中發(fā)揮著重要作用,但其在心肌成纖維細(xì)胞活化中的作用和機(jī)制并未闡明。本研究通過(guò)小鼠胸主動(dòng)脈縮窄（TAC）模型來(lái)觀察體內(nèi)心肌纖維化情況,并利用心臟超聲,蘇木精-伊紅、Masson和天狼星紅染色,以及心臟纖維化標(biāo)志物表達(dá)水平,鑒定模型是否成功。體外實(shí)驗(yàn)利用轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子TGFβ1刺激建立心肌成纖維細(xì)胞活化模型,通過(guò)定量PCR、Western blot、EdU滲入法及劃痕實(shí)驗(yàn)等方法檢測(cè)其活化、細(xì)胞增殖、遷移的變化。利用腺病毒過(guò)表達(dá)和沉默Calnexin,來(lái)觀察Calnexin在體外心肌成纖維細(xì)胞活化中的作用。結(jié)果顯示,Calnexin在TAC模型和體外心肌成纖維細(xì)胞活化過(guò)程中均表達(dá)降低。過(guò)表達(dá)Calnexin能緩解心肌成纖維細(xì)胞活化;相反,沉默Calnexin導(dǎo)致其活化加重。進(jìn)一步探究發(fā)現(xiàn),內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在心肌成纖維細(xì)胞活化過(guò)程中被激活,過(guò)表達(dá)Calnexin后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激緩解,相反,敲低Calnexin后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激加重,與活化表型變化一致。結(jié)果表明,過(guò)表達(dá)Calnexin可能通過(guò)緩解內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激... 

【文章來(lái)源】：生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2020,37(03)北大核心EICSCD

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Calnexin在心肌成纖維細(xì)胞活化過(guò)程中的表達(dá)降低

研究顯示，在心肌肥厚相關(guān)疾病發(fā)展過(guò)程中，Calnexin的蛋白表達(dá)呈現(xiàn)下調(diào)趨勢(shì)，由于Calnexin在蛋白折疊過(guò)程中發(fā)揮著重要作用，Calnexin含量不足可能導(dǎo)致錯(cuò)誤折疊蛋白的積累，引起ER stress，從而造成心肌肥厚的發(fā)展[28]。通過(guò)對(duì)TAC時(shí)間梯度小鼠模型的研究，我們發(fā)現(xiàn)在TAC手術(shù)組小鼠心肌組織中，Calnexin基因表達(dá)始終低于Sham組小鼠的基因表達(dá)。這可能是TAC術(shù)后ER stress迅速被激活，繼而隨著時(shí)間延長(zhǎng)有一定緩解，最后形成新的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)穩(wěn)態(tài)的潛在原因。這一結(jié)果提示，Calnexin的有效表達(dá)在心肌組織維持正常狀態(tài)的過(guò)程中發(fā)揮著積極作用[29]。圖4 敲低Calnexin加重TGFβ1誘導(dǎo)的心肌成纖維細(xì)胞活化

圖3 過(guò)表達(dá)Calnexin緩解TGFβ1誘導(dǎo)的心肌成纖維細(xì)胞活化TGFβ1可以誘導(dǎo)心肌成纖維細(xì)胞活化并促進(jìn)其ECM分泌[30-31]。我們的研究發(fā)現(xiàn)，心肌成纖維細(xì)胞在受到TGFβ1刺激后，Calnexin通過(guò)介導(dǎo)ER stress通路中IRE1/Xbp1和PERK/ATF4分支引起其活化。研究表明，給予TGFβ1刺激之后，α-SMA陽(yáng)性的細(xì)胞均存在TGF-β受體蛋白1/2的表達(dá)增加[32]。我們發(fā)現(xiàn)，TGFβ1可以負(fù)向調(diào)控Calnexin，而另一方面Calnexin同樣能夠負(fù)向調(diào)控TGF-β的表達(dá)，這提示心肌成纖維細(xì)胞活化過(guò)程中，TGF-β受體1/2可能和Calnexin之間存在相互作用，但這種相互作用的確切機(jī)制還有待進(jìn)一步探討。


本文編號(hào)：3507326