小電導鈣激活鉀通道（small conductance Ca2+activated K+channels,KCa2,SK）屬于非電壓依賴性的鈣激活鉀通道家族,主要分布于神經(jīng)系統(tǒng)和心血管系統(tǒng),對Ca2+的敏感性遠高于大電導鈣激活鉀通道（big conductance Ca2+activated K+channels,BK）,可至亞微摩爾級。Ca2+通過與SK通道羧基端鈣調(diào)蛋白（calmodulin,Ca M）結合激活通道,K+外流從而使細胞內(nèi)鈣離子穩(wěn)態(tài)的變化轉換成細胞膜電位變化。SK通道可分為三個亞型,SK1、SK2及SK3,其中SK2通道主要表達于心房,參與心肌細胞動作電位復極化形成,在生理和病理狀態(tài)下起關鍵作用。敲除小鼠SK2通道可延長動作電位復極化的時程,房顫的易感性增加;過表達SK3通道可使動作電位復極化縮短,亦增加房顫發(fā)生。由此提示,SK通道可作為治療房顫等心血管疾病的靶點,但其分子調(diào)控機制,目前所知甚少。Junctophilins（JPs）在哺乳動物可興奮細胞中可維持內(nèi)質網(wǎng)/肌質網(wǎng)（endoplasmic reticulum/sarcoplasmic reticulum,ER... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

重組JP2片段質粒雙酶切鑒定圖

第一部分：JP2蛋白與SK2通道相互作用區(qū)域的驗證18的目的基因片段，由此可證實重組質粒構建成功。采用雙向測序的方法鑒定構建的重組質粒pIRES2-EGFP-SK2-N、pIRES2-EGFP-SK2-M和pIRES2-EGFP-SK2-C，測序結果與GenBank中的小鼠SK2基因序列同源性比對分析，結果一致，表明重組質粒插入目的片段正確。圖1.2重組SK2片段質粒雙酶切鑒定圖。A：pIRES2-EGFP-SK2-N；B：pIRES2-EGFP-SK2-M；C：pIRES2-EGFP-SK2-C。3.3JP2蛋白與SK2通道有相互作用在大鼠心肌組織和H9c2細胞中分別進行免疫共沉淀實驗，結果證實JP2蛋白與SK2通道均可形成免疫沉淀復合物。如圖1.3A和圖1.3B所示，用抗JP2抗體檢測到≈97kD條帶，與JP2的分子量相符（左圖）；相反，用抗SK2抗體檢測到≈60kD的條帶，剛好是SK2的分子量大�。ㄓ覉D），表明在大鼠心臟和H9c2細胞中SK2和JP2之間可能存在相互作用。圖1.3SK2通道與JP2蛋白的相互作用。

第一部分：JP2蛋白與SK2通道相互作用區(qū)域的驗證18的目的基因片段，由此可證實重組質粒構建成功。采用雙向測序的方法鑒定構建的重組質粒pIRES2-EGFP-SK2-N、pIRES2-EGFP-SK2-M和pIRES2-EGFP-SK2-C，測序結果與GenBank中的小鼠SK2基因序列同源性比對分析，結果一致，表明重組質粒插入目的片段正確。圖1.2重組SK2片段質粒雙酶切鑒定圖。A：pIRES2-EGFP-SK2-N；B：pIRES2-EGFP-SK2-M；C：pIRES2-EGFP-SK2-C。3.3JP2蛋白與SK2通道有相互作用在大鼠心肌組織和H9c2細胞中分別進行免疫共沉淀實驗，結果證實JP2蛋白與SK2通道均可形成免疫沉淀復合物。如圖1.3A和圖1.3B所示，用抗JP2抗體檢測到≈97kD條帶，與JP2的分子量相符（左圖）；相反，用抗SK2抗體檢測到≈60kD的條帶，剛好是SK2的分子量大�。ㄓ覉D），表明在大鼠心臟和H9c2細胞中SK2和JP2之間可能存在相互作用。圖1.3SK2通道與JP2蛋白的相互作用。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Synaptobrevin-2 facilitates the trafficking and function of atrial SK2 channel[J]. Tao Li,Xuehui Fan,Yiyan Yu,Linlin Chen,Wenjun Huang,Yan Yang,Jimin Cao,Xiaorong Zeng,Xiaoqiu Tan.  Science China（Life Sciences）. 2018(05)



本文編號：3495915