PVY6K2蛋白與本氏煙RubisCO小亞基蛋白的互作研究
發(fā)布時(shí)間:2021-10-31 20:42
馬鈴薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是一種正義單鏈RNA病毒,寄主范圍廣泛,能侵染馬鈴薯、辣椒、番茄等植物,嚴(yán)重影響農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)量,給生產(chǎn)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。研究PVY與寄主互作關(guān)系,有助于深入揭示PVY的致病機(jī)理,為馬鈴薯Y病毒病的防治提供理論依據(jù)。PVY編碼的膜蛋白6K2能誘導(dǎo)形成含有病毒復(fù)制復(fù)合體(VRC)的復(fù)制囊泡,對(duì)病毒復(fù)制有著不可或缺的調(diào)控作用。筆者所在實(shí)驗(yàn)室前期利用PVY 6K2蛋白為“誘餌”,通過酵母雙雜交技術(shù)(Y2H)對(duì)模式植物本氏煙(Nicotiana benthamiana)cDNA文庫(kù)進(jìn)行篩選,篩選出13種可能與PVY 6K2蛋白存在互作的蛋白質(zhì)。本研究以篩選到的N.benthamiana中疑似互作蛋白1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RubisCO)的小亞基蛋白(NbRbcS)為研究對(duì)象,利用分子生物學(xué)、生物化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和病毒生物學(xué)等技術(shù)手段,驗(yàn)證PVY 6K2蛋白與寄主NbRbcS蛋白存在互作,明確寄主NbRbcS蛋白對(duì)PVY侵染復(fù)制的調(diào)控作用,主要研究結(jié)果如下:(1)PVY 6K2蛋白與寄主NbRbcS蛋白互作。為驗(yàn)證篩庫(kù)結(jié)果,通...
【文章來源】:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:49 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
Y2H驗(yàn)證PVY6K2與寄主NbRbcS蛋白的互作Figure2.2AnalysisoftheinteractionbetweenPVY6K2andNbRbcSproteinbyY2H
驗(yàn)證 PVY 6K2 與寄主 NbRbcS 互作T7-53 +pGADT7-T pGBKT7-Lam +pGADT7-T 6K2-pGBKT7 +RbcS- pGBKT7+pGADT7 6K2-pGBKT7 +pGADT7 pGBKT7+RbcS- pGADT圖 2.2 Y2H 驗(yàn)證 PVY6K2 與寄主 NbRbcS 蛋白的互作igure 2.2 Analysis of the interaction between PVY 6K2 and NbRbcS protein by
Y 侵染的通路。PVY 6K2 與本氏煙 NbRbcS 的亞細(xì)胞共定位6K2-GFP HDEL- mCherry Merge圖 3.1 PVY 侵染對(duì) NbRbcS 基因的表達(dá)的影響Figure 3.1 The impact of PVY on NbRbcS
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]兩株根際促生細(xì)菌對(duì)TMV的生防作用研究[J]. 劉笑瑋,秦元霞,袁蓮蓮,何青云,楊金廣,申莉莉. 中國(guó)煙草學(xué)報(bào). 2018(06)
[2]栽培大豆Rubisco小亞基基因(rbcS)全長(zhǎng)cDNA的克隆及原核表達(dá)[J]. 崔喜艷,董雅致,劉曉慶,張治安. 中國(guó)油料作物學(xué)報(bào). 2014(03)
[3]馬鈴薯Y病毒屬病毒的細(xì)胞生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 崔曉艷,魏太云,陳新. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(07)
[4]馬鈴薯Y病毒屬病毒P3和P3-PiPo蛋白功能研究進(jìn)展[J]. 崔曉艷,陳新,顧和平,張紅梅,陳華濤,袁星星. 微生物學(xué)通報(bào). 2012(01)
[5]芥菜Rubisco小亞基的基因克隆及其在蕪菁花葉病毒侵染后的表達(dá)分析[J]. 朱磊,楊景華,張明方. 核農(nóng)學(xué)報(bào). 2011(05)
[6]Rubisco的研究進(jìn)展[J]. 全光華,劉鍇棟. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(21)
[7]Rubisco小亞基前體蛋白preSSU的互作蛋白分析(英文)[J]. 夏蘭芹,Soll Jürgen,何中虎. 作物學(xué)報(bào). 2006(05)
[8]大豆1,5-二磷酸核酮糖羧化酶小亞基基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)分析[J]. 賀超英,王偉權(quán),東方陽,張勁松,蓋鈞鎰,陳受宜. 科學(xué)通報(bào). 2001(16)
[9]煙草感染馬鈴薯Y病毒(PVY)后光合作用的變化規(guī)律[J]. 郭興啟,溫孚江,朱漢城. 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版). 2000(01)
博士論文
[1]馬鈴薯Y病毒屬編碼的膜相關(guān)蛋白的功能研究[D]. 崔曉艷.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010
碩士論文
[1]植物病毒抑制寄主光合作用的機(jī)理和弱病毒保護(hù)研究[D]. 付東亞.浙江大學(xué) 2002
本文編號(hào):3468819
【文章來源】:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:49 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
Y2H驗(yàn)證PVY6K2與寄主NbRbcS蛋白的互作Figure2.2AnalysisoftheinteractionbetweenPVY6K2andNbRbcSproteinbyY2H
驗(yàn)證 PVY 6K2 與寄主 NbRbcS 互作T7-53 +pGADT7-T pGBKT7-Lam +pGADT7-T 6K2-pGBKT7 +RbcS- pGBKT7+pGADT7 6K2-pGBKT7 +pGADT7 pGBKT7+RbcS- pGADT圖 2.2 Y2H 驗(yàn)證 PVY6K2 與寄主 NbRbcS 蛋白的互作igure 2.2 Analysis of the interaction between PVY 6K2 and NbRbcS protein by
Y 侵染的通路。PVY 6K2 與本氏煙 NbRbcS 的亞細(xì)胞共定位6K2-GFP HDEL- mCherry Merge圖 3.1 PVY 侵染對(duì) NbRbcS 基因的表達(dá)的影響Figure 3.1 The impact of PVY on NbRbcS
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[3]馬鈴薯Y病毒屬病毒的細(xì)胞生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 崔曉艷,魏太云,陳新. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(07)
[4]馬鈴薯Y病毒屬病毒P3和P3-PiPo蛋白功能研究進(jìn)展[J]. 崔曉艷,陳新,顧和平,張紅梅,陳華濤,袁星星. 微生物學(xué)通報(bào). 2012(01)
[5]芥菜Rubisco小亞基的基因克隆及其在蕪菁花葉病毒侵染后的表達(dá)分析[J]. 朱磊,楊景華,張明方. 核農(nóng)學(xué)報(bào). 2011(05)
[6]Rubisco的研究進(jìn)展[J]. 全光華,劉鍇棟. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(21)
[7]Rubisco小亞基前體蛋白preSSU的互作蛋白分析(英文)[J]. 夏蘭芹,Soll Jürgen,何中虎. 作物學(xué)報(bào). 2006(05)
[8]大豆1,5-二磷酸核酮糖羧化酶小亞基基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)分析[J]. 賀超英,王偉權(quán),東方陽,張勁松,蓋鈞鎰,陳受宜. 科學(xué)通報(bào). 2001(16)
[9]煙草感染馬鈴薯Y病毒(PVY)后光合作用的變化規(guī)律[J]. 郭興啟,溫孚江,朱漢城. 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版). 2000(01)
博士論文
[1]馬鈴薯Y病毒屬編碼的膜相關(guān)蛋白的功能研究[D]. 崔曉艷.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010
碩士論文
[1]植物病毒抑制寄主光合作用的機(jī)理和弱病毒保護(hù)研究[D]. 付東亞.浙江大學(xué) 2002
本文編號(hào):3468819
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