萜類吲哚類生物堿（Terpenoid Indole Alkaloids,TIAs）是一類有重要藥用價(jià)值的生物堿,尤其在癌癥治療方面。長春花作為TIA的唯一商用來源,其體內(nèi)可以積累150多種具有藥用活性的TIAs,如長春堿和長春瑞濱等。目前研究發(fā)現(xiàn)茉莉酸在TIA的生物合成過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用,但大多數(shù)主要是對(duì)單個(gè)或幾個(gè)基因的研究,并且主要集中在轉(zhuǎn)錄水平和代謝水平上研究TIA對(duì)茉莉酸的響應(yīng)。所以,本研究為了探究長春花中茉莉酸調(diào)控TIA合成的分子機(jī)制,利用組學(xué)手段,分別從轉(zhuǎn)錄水平、翻譯水平和代謝水平對(duì)其進(jìn)行系統(tǒng)、深入的研究,以期為提高TIA產(chǎn)量提供理論支持。在轉(zhuǎn)錄水平上,KEGG功能注釋發(fā)現(xiàn)茉莉酸可以顯著增強(qiáng)類萜類途徑基因的表達(dá)。qRT-PCR驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)茉莉酸顯著提高長春花根部TIA上游合成途徑基因的表達(dá)。長春花基因組注釋共發(fā)現(xiàn)2011個(gè)轉(zhuǎn)錄因子。通過相關(guān)性及熱圖分析篩選到長春花一個(gè)AP2/ERF家族成員CrERF1。亞細(xì)胞定位確定CrERF1屬于核定位轉(zhuǎn)錄因子。Dual-LUC實(shí)驗(yàn)表明CrERF1可以識(shí)別長春花TIA途徑核心調(diào)控限速酶基因STR的啟動(dòng)子區(qū),顯著增強(qiáng)STR的表達(dá)。此外,本研... 

【文章來源】：東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：119 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１長春花基本形態(tài)特征圖（引自中國高等植物圖簽）??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?Ｔｈｅ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃ?ｃｈａｒａｃｔｅｒ?ｏｆ?Ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ?ｒｏｓｅｕｓ??

長春花現(xiàn)如今己是非常理想的ＴＩＡ代謝通路及其相關(guān)轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)研宂的模??式植物。多個(gè)課題組一直致力于揭示ＴＩＡ的代謝通路。２０１８年０’?Ｃｏｎｎｏｒ等人將長春??質(zhì)堿合成途徑解析后，ＴＩＡ代謝通路己較為清晰的被闡明［８５］。如圖１－２所示ＴＩＡ的合??成通路以關(guān)鍵化合物異胡豆苷為界分成上游和下游途徑。上游途徑包括由類萜類途徑合??成的裂環(huán)馬錢子苷和由吲哚類途徑合成的色胺，在異胡豆苷合成酶（Ｓｔｒｉｃｔｏｓｉｄｉｎｅ??Ｓｙｎｔｈａｓｅ，?ＳＴＲ）催化下耦合成異胡豆苷，異胡豆苷作為共同的合成前體在下游途徑中進(jìn)??一步轉(zhuǎn)化成一系列含有多種結(jié)構(gòu)多種生物功能的萜類生物堿＠－８７］。??吲哚途徑也可稱為莽草酸途徑，由酚類合成途徑的中間產(chǎn)物分支酸經(jīng)６步酶促反應(yīng)??得到Ｌ－色氨酸。１９８９年Ｄｅ?Ｌｕｃａ等人１８８１在長春花中克隆出色氨酸脫羧酶（Ｔｒｙｐｔｏｐｈａｎ??ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ，?ＴＤＣ），并且發(fā)現(xiàn)７ＰＣ的表達(dá)有明顯的組織特異性，只在葉片的上表皮細(xì)??胞表達(dá)。所以Ｌ－色氨酸進(jìn)入葉表皮細(xì)胞在ＴＤＣ作用下最終生成色氨酸［８９￣９（）］。??類蔽類途徑的共同前體異戊條焦磷酸（Ｉｓｏｐｅｎｔｅｎｙｌ?ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ，?ＩＰＰ），主要由胞質(zhì)??中的甲羥戊酸途徑（ＭＶＡ）和質(zhì)體中的非甲羥戊酸途徑（ＭＥＰ）合成。ＭＥＰ和ＭＶＡ??途徑在植物中很早就己經(jīng)被發(fā)現(xiàn)，他們同時(shí)存在于植物中，但存在于不同部位，分別為??不同萜類物質(zhì)提供前體物質(zhì)ＩＰＰ［９１］。單個(gè)ＩＰＰ與單個(gè)ＤＭＡＰＰ在香葉基二磷酸合酶??（Ｇｅｒａｎｙｌ?Ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ?Ｓｙｎｔｈａｓｅ

白質(zhì)基本理化性質(zhì)分析??Ｅｘｐａｓｙ?網(wǎng)站?Ｐｒｏｔｐａｒａｍ?工具（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｘｐａｓｖ．ｏｒｇ／ｔｏｏｌｓ／ｐｒｏｔｐａｒａｍ．ｈｔｒｎｌ）又＇士物理化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行預(yù)測包括相對(duì)分子質(zhì)量、氨基酸組成、等電點(diǎn)（ｐ／）、消期、不穩(wěn)定系數(shù)和總平均親水性等。??ｒＥＲＦ蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測分析??ＰｒｅｄｉｃｔＰｒｏｔｅｉｎ?軟件（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｐｒｅｄｉｃｔｐｒｏｔｅｉｎ．ｏｒｇ／）．將?ＣｒＥＲＦ?的?ｆａｓｔａ?序列，可以進(jìn)行蛋白功能預(yù)測、二級(jí)結(jié)構(gòu)、基序、二硫鍵結(jié)構(gòu)和結(jié)構(gòu)域等蛋白質(zhì)錄組學(xué)分析??２０１８年０’?Ｃｏｎｎｏｒ等人更新完善的長春花基因組信息及ＧＦＦ注釋文件。網(wǎng)下?：ｐｓ：／／ｄａｔａｄｒｖａｄ．Ｏｒｇ／ｂｉｔｓｔｒｅａｍ／ｈａｎｄｌｅ／ｌ?０２５５／ｄｒｖａｄ．?１９６３０９／ｃｒｏ?ｖ２?ａｓｍ．ｆａｓｔａ？ｓｅｑｕｃｎｃＮＣＢ丨中ＳＲＡ數(shù)據(jù)庫中對(duì)長春花的轉(zhuǎn)錄組分析數(shù)據(jù)，共丨３個(gè)長春花轉(zhuǎn)錄組，共７７個(gè)樣品，所有測序樣品的詳細(xì)信息如圖２－１所示。下載其ＳＲＡ格。??／，?ｖｒＫｎ？ｗ?＼??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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