甜菜（Beta vulgar L.）作為主要的制糖作物,其塊根是產糖的來源。由于外界環(huán)境的變化可直接影響其根重及含糖率等經濟性狀,因此探究不同栽培條件下甜菜塊根的發(fā)育是提高其產質量水平的基礎。本研究以甜菜塊根發(fā)育轉錄組研究為基礎,對與塊根發(fā)育相關的油菜素內酯（BR）合成酶基因BvCPD進行了表達模式分析,并對其啟動子區(qū)域5’端缺失片段進行克隆,通過轉化擬南芥,探究其在調控根發(fā)育過程中的作用,為闡明不同環(huán)境下BvCPD基因催化合成BR調控甜菜塊根發(fā)育的分子機制奠定理論基礎。研究取得如下結果:（1）BvCPD基因表達對環(huán)境條件和植物激素響應。干旱脅迫可誘導BvCPD表達量上調,避光和低溫脅迫可誘導BvCPD表達量下調;BR使其通過負反饋調節(jié)抑制BvCPD的表達;施加蕓苔素唑（BRz）使BvCPD表達量上調,茉莉酸甲酯（MEJA）、脫落酸（ABA）、水楊酸（SA）導致BvCPD表達量下調。（2）應用PlantCARE啟動子預測軟件分析BvCPD轉錄翻譯起始位點ATG前3100 bp序列,得出該啟動子區(qū)域含有真核生物典型的順式作用元件TATA-motif和CAAT-motif,此外含有植物激素... 

【文章來源】：內蒙古農業(yè)大學內蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

甜菜塊根快速生長的分子調控根型(引自張永豐2017)

?ｆｏｒｅｖｅｒ??２．啟動了？片段的克隆??純化膠Ｉ＂丨收ＰＣＲ產物后，檢測濃度（２３０?ｎｇ／｜ｉＬ）達標后進行克降（圖４）??克隆載休連接體系（２０卟）：???組成成分?體積??純化后

??＾??２．?２．?８轉基因植株陽性對照表達載體３５Ｓ：：只７／？￡－／？／的構建??由于ｐＯＲＥ－Ｒｌ載體為專項插入啟動子載體（不含３５Ｓ啟動子），為設置轉基??因擬南芥陽性植株對照，通過酶切ＰＣＡＭＢＩＡ１３００表達載體中的３５Ｓ強啟動子插入??ｐＯＲＥ＿Ｒｌ表達載體中構建３５Ｓ：：ＰＯ勝ｉ？／表達載體（圖６）。??（１）分別雙酶切空載ｐＯＲＥ－Ｒｌ和ｐＣＡＭＢＩＡ１３００，３７°Ｃ，水�。欤瑁�??酶切體系（１０?＾Ｌ）?：????組成成分????ｌＯｘＱｕｉｃｋＯｕｔ?Ｇｒｅｅｎ?Ｂｕｆｆｅｒ?１?｜ｉＬ??空載體（￥１胳）?５?＾ｉＬ??ＱｕｉｃｋＯｕｔ?ＥｃｏＲ?Ｉ?１?＼＼Ｌ??ＱｕｉｃｋＯｕｔ?Ｓａｃｌ?１?［ｉＬ??ｄｄ＊Ｈ２〇?２?（ｉＬ??（２）膠回收目的片段后Ｔ４連接酶過液連接，轉化ＤＨ５ｃｔ挑取單克隆檢驗。??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]ERF轉錄因子家族在甜菜塊根發(fā)育中的功能分析[J]. 曹國麗,張永豐,孫亞卿,李國龍,張少英.  植物生理學報. 2018(05)
[2]高等植物啟動子研究概述[J]. 楊鵬芳,段國琴,胡曉煒,繆秀梅,南淑珍,張麗靜.  分子植物育種. 2018(05)
[3]植物TCP轉錄因子的作用機理及其應用研究進展[J]. 馮志娟,徐盛春,劉娜,張古文,胡齊贊,龔亞明.  植物遺傳資源學報. 2018(01)
[4]小麥MIKC型MADS-box基因家族分析[J]. 焦志鑫,李俊暢,牛吉山.  農業(yè)生物技術學報. 2017(11)
[5]茶樹HD-Zip轉錄因子基因的克隆及其對非生物脅迫的響應分析[J]. 滕瑞敏,李輝,王文麗,沈威,汪迎,崔新,莊靜.  植物生理學報. 2017(09)
[6]蒺藜苜蓿和天藍苜蓿熱激因子（HSF）家族的篩選與功能分析[J]. 李菲,何小紅,張習敏,龔記熠,乙引.  分子植物育種. 2017(07)
[7]植物GOLDEN2-Like轉錄因子研究進展[J]. 劉俊芳,張佳,李賀,趙婷婷,李景富.  分子植物育種. 2017(10)
[8]大豆ZF-HD轉錄因子GmZHD1的克隆及表達分析[J]. 張晉玉,晁毛妮,杜弘楊,喻德躍,黃方.  華北農學報. 2017(02)
[9]異源表達胡楊PeCPD基因提高煙草對鹽、高氮和干旱脅迫的抗性[J]. 陳永富,王陽,馮倩,唐海,吳英青,高永峰.  應用與環(huán)境生物學報. 2017(02)
[10]玉米ZmPGP1基因啟動子的克隆及結構功能分析[J]. 葉凌鳳,劉琳,張志高,徐啟來,王俊仁,康定明.  中國農業(yè)大學學報. 2017(03)

博士論文
[1]鉀素對膜下滴灌甜菜產質量及生理特性的影響[D]. 黃春燕.內蒙古農業(yè)大學 2017
[2]水稻OsSCPD1基因對干旱脅迫響應機理的研究[D]. 羅光宇.湖南農業(yè)大學 2017
[3]馬鈴薯油菜素內酯合成限速酶基因StCPD和StDWF4對干旱和鹽脅迫的響應[D]. 周香艷.甘肅農業(yè)大學 2016
[4]胡楊油菜素類固醇激素合成酶基因DWF4（PeDWF4）和CPD（PeCPD）在擬南芥生長發(fā)育中的作用[D]. 司建萍.蘭州大學 2016
[5]Tkn4基因在番茄生長發(fā)育過程中的功能研究[D]. 燕芳.重慶大學 2015
[6]中間錦雞兒3個非生物脅迫相關轉錄因子的克隆與功能分析[D]. 韓曉敏.內蒙古農業(yè)大學 2015

碩士論文
[1]表油菜素內酯對高粱低溫脅迫的緩解作用研究[D]. 劉巾瑞.黑龍江八一農墾大學 2018
[2]Cu2+脅迫下擬南芥AtRD22的表達及作用分析[D]. 鐘活權.深圳大學 2017
[3]4種植物生長調節(jié)劑對甜菜生長及產質量的調控[D]. 菅彩媛.內蒙古農業(yè)大學 2016
[4]基于iTRAQ技術對甜菜塊根膨大蛋白質組學的研究[D]. 王雪峰.內蒙古農業(yè)大學 2016
[5]水稻病原誘導啟動子POs2H16順式作用元件的分離與鑒定[D]. 何康.山東農業(yè)大學 2016
[6]苗期低溫誘導對煙草莖尖油菜素內酯含量及其受體基因表達的影響[D]. 朱俊.西南大學 2016
[7]甜瓜轉錄因子家族全基因組預測及ARF轉錄因子家族分析[D]. 牛鵬輝.華中農業(yè)大學 2013



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