甜菜BvCPD基因的表達及其啟動子區(qū)域的克隆與分析
發(fā)布時間:2021-10-29 11:34
甜菜(Beta vulgar L.)作為主要的制糖作物,其塊根是產(chǎn)糖的來源。由于外界環(huán)境的變化可直接影響其根重及含糖率等經(jīng)濟性狀,因此探究不同栽培條件下甜菜塊根的發(fā)育是提高其產(chǎn)質(zhì)量水平的基礎(chǔ)。本研究以甜菜塊根發(fā)育轉(zhuǎn)錄組研究為基礎(chǔ),對與塊根發(fā)育相關(guān)的油菜素內(nèi)酯(BR)合成酶基因BvCPD進行了表達模式分析,并對其啟動子區(qū)域5’端缺失片段進行克隆,通過轉(zhuǎn)化擬南芥,探究其在調(diào)控根發(fā)育過程中的作用,為闡明不同環(huán)境下BvCPD基因催化合成BR調(diào)控甜菜塊根發(fā)育的分子機制奠定理論基礎(chǔ)。研究取得如下結(jié)果:(1)BvCPD基因表達對環(huán)境條件和植物激素響應(yīng)。干旱脅迫可誘導(dǎo)BvCPD表達量上調(diào),避光和低溫脅迫可誘導(dǎo)BvCPD表達量下調(diào);BR使其通過負反饋調(diào)節(jié)抑制BvCPD的表達;施加蕓苔素唑(BRz)使BvCPD表達量上調(diào),茉莉酸甲酯(MEJA)、脫落酸(ABA)、水楊酸(SA)導(dǎo)致BvCPD表達量下調(diào)。(2)應(yīng)用PlantCARE啟動子預(yù)測軟件分析BvCPD轉(zhuǎn)錄翻譯起始位點ATG前3100 bp序列,得出該啟動子區(qū)域含有真核生物典型的順式作用元件TATA-motif和CAAT-motif,此外含有植物激素...
【文章來源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:74 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
甜菜塊根快速生長的分子調(diào)控根型(引自張永豐2017)
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【參考文獻】:
期刊論文
[1]ERF轉(zhuǎn)錄因子家族在甜菜塊根發(fā)育中的功能分析[J]. 曹國麗,張永豐,孫亞卿,李國龍,張少英. 植物生理學(xué)報. 2018(05)
[2]高等植物啟動子研究概述[J]. 楊鵬芳,段國琴,胡曉煒,繆秀梅,南淑珍,張麗靜. 分子植物育種. 2018(05)
[3]植物TCP轉(zhuǎn)錄因子的作用機理及其應(yīng)用研究進展[J]. 馮志娟,徐盛春,劉娜,張古文,胡齊贊,龔亞明. 植物遺傳資源學(xué)報. 2018(01)
[4]小麥MIKC型MADS-box基因家族分析[J]. 焦志鑫,李俊暢,牛吉山. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2017(11)
[5]茶樹HD-Zip轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆及其對非生物脅迫的響應(yīng)分析[J]. 滕瑞敏,李輝,王文麗,沈威,汪迎,崔新,莊靜. 植物生理學(xué)報. 2017(09)
[6]蒺藜苜蓿和天藍苜蓿熱激因子(HSF)家族的篩選與功能分析[J]. 李菲,何小紅,張習(xí)敏,龔記熠,乙引. 分子植物育種. 2017(07)
[7]植物GOLDEN2-Like轉(zhuǎn)錄因子研究進展[J]. 劉俊芳,張佳,李賀,趙婷婷,李景富. 分子植物育種. 2017(10)
[8]大豆ZF-HD轉(zhuǎn)錄因子GmZHD1的克隆及表達分析[J]. 張晉玉,晁毛妮,杜弘楊,喻德躍,黃方. 華北農(nóng)學(xué)報. 2017(02)
[9]異源表達胡楊PeCPD基因提高煙草對鹽、高氮和干旱脅迫的抗性[J]. 陳永富,王陽,馮倩,唐海,吳英青,高永峰. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報. 2017(02)
[10]玉米ZmPGP1基因啟動子的克隆及結(jié)構(gòu)功能分析[J]. 葉凌鳳,劉琳,張志高,徐啟來,王俊仁,康定明. 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2017(03)
博士論文
[1]鉀素對膜下滴灌甜菜產(chǎn)質(zhì)量及生理特性的影響[D]. 黃春燕.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]水稻OsSCPD1基因?qū)Ω珊得{迫響應(yīng)機理的研究[D]. 羅光宇.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]馬鈴薯油菜素內(nèi)酯合成限速酶基因StCPD和StDWF4對干旱和鹽脅迫的響應(yīng)[D]. 周香艷.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]胡楊油菜素類固醇激素合成酶基因DWF4(PeDWF4)和CPD(PeCPD)在擬南芥生長發(fā)育中的作用[D]. 司建萍.蘭州大學(xué) 2016
[5]Tkn4基因在番茄生長發(fā)育過程中的功能研究[D]. 燕芳.重慶大學(xué) 2015
[6]中間錦雞兒3個非生物脅迫相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的克隆與功能分析[D]. 韓曉敏.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
碩士論文
[1]表油菜素內(nèi)酯對高粱低溫脅迫的緩解作用研究[D]. 劉巾瑞.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2018
[2]Cu2+脅迫下擬南芥AtRD22的表達及作用分析[D]. 鐘活權(quán).深圳大學(xué) 2017
[3]4種植物生長調(diào)節(jié)劑對甜菜生長及產(chǎn)質(zhì)量的調(diào)控[D]. 菅彩媛.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]基于iTRAQ技術(shù)對甜菜塊根膨大蛋白質(zhì)組學(xué)的研究[D]. 王雪峰.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[5]水稻病原誘導(dǎo)啟動子POs2H16順式作用元件的分離與鑒定[D]. 何康.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[6]苗期低溫誘導(dǎo)對煙草莖尖油菜素內(nèi)酯含量及其受體基因表達的影響[D]. 朱俊.西南大學(xué) 2016
[7]甜瓜轉(zhuǎn)錄因子家族全基因組預(yù)測及ARF轉(zhuǎn)錄因子家族分析[D]. 牛鵬輝.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
本文編號:3464577
【文章來源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:74 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
甜菜塊根快速生長的分子調(diào)控根型(引自張永豐2017)
?forever??2.啟動了?片段的克隆??純化膠I"丨收PCR產(chǎn)物后,檢測濃度(230?ng/|iL)達標后進行克降(圖4)??克隆載休連接體系(20卟):???組成成分?體積??純化后
??^??2.?2.?8轉(zhuǎn)基因植株陽性對照表達載體35S::只7/?£-/?/的構(gòu)建??由于pORE-Rl載體為專項插入啟動子載體(不含35S啟動子),為設(shè)置轉(zhuǎn)基??因擬南芥陽性植株對照,通過酶切PCAMBIA1300表達載體中的35S強啟動子插入??pORE_Rl表達載體中構(gòu)建35S::PO勝i?/表達載體(圖6)。??(1)分別雙酶切空載pORE-Rl和pCAMBIA1300,37°C,水。欤,??酶切體系(10?^L)?:????組成成分????lOxQuickOut?Green?Buffer?1?|iL??空載體(¥1胳)?5?^iL??QuickOut?EcoR?I?1?\\L??QuickOut?Sacl?1?[iL??dd*H2〇?2?(iL??(2)膠回收目的片段后T4連接酶過液連接,轉(zhuǎn)化DH5ct挑取單克隆檢驗。??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]ERF轉(zhuǎn)錄因子家族在甜菜塊根發(fā)育中的功能分析[J]. 曹國麗,張永豐,孫亞卿,李國龍,張少英. 植物生理學(xué)報. 2018(05)
[2]高等植物啟動子研究概述[J]. 楊鵬芳,段國琴,胡曉煒,繆秀梅,南淑珍,張麗靜. 分子植物育種. 2018(05)
[3]植物TCP轉(zhuǎn)錄因子的作用機理及其應(yīng)用研究進展[J]. 馮志娟,徐盛春,劉娜,張古文,胡齊贊,龔亞明. 植物遺傳資源學(xué)報. 2018(01)
[4]小麥MIKC型MADS-box基因家族分析[J]. 焦志鑫,李俊暢,牛吉山. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2017(11)
[5]茶樹HD-Zip轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆及其對非生物脅迫的響應(yīng)分析[J]. 滕瑞敏,李輝,王文麗,沈威,汪迎,崔新,莊靜. 植物生理學(xué)報. 2017(09)
[6]蒺藜苜蓿和天藍苜蓿熱激因子(HSF)家族的篩選與功能分析[J]. 李菲,何小紅,張習(xí)敏,龔記熠,乙引. 分子植物育種. 2017(07)
[7]植物GOLDEN2-Like轉(zhuǎn)錄因子研究進展[J]. 劉俊芳,張佳,李賀,趙婷婷,李景富. 分子植物育種. 2017(10)
[8]大豆ZF-HD轉(zhuǎn)錄因子GmZHD1的克隆及表達分析[J]. 張晉玉,晁毛妮,杜弘楊,喻德躍,黃方. 華北農(nóng)學(xué)報. 2017(02)
[9]異源表達胡楊PeCPD基因提高煙草對鹽、高氮和干旱脅迫的抗性[J]. 陳永富,王陽,馮倩,唐海,吳英青,高永峰. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報. 2017(02)
[10]玉米ZmPGP1基因啟動子的克隆及結(jié)構(gòu)功能分析[J]. 葉凌鳳,劉琳,張志高,徐啟來,王俊仁,康定明. 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2017(03)
博士論文
[1]鉀素對膜下滴灌甜菜產(chǎn)質(zhì)量及生理特性的影響[D]. 黃春燕.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]水稻OsSCPD1基因?qū)Ω珊得{迫響應(yīng)機理的研究[D]. 羅光宇.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]馬鈴薯油菜素內(nèi)酯合成限速酶基因StCPD和StDWF4對干旱和鹽脅迫的響應(yīng)[D]. 周香艷.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]胡楊油菜素類固醇激素合成酶基因DWF4(PeDWF4)和CPD(PeCPD)在擬南芥生長發(fā)育中的作用[D]. 司建萍.蘭州大學(xué) 2016
[5]Tkn4基因在番茄生長發(fā)育過程中的功能研究[D]. 燕芳.重慶大學(xué) 2015
[6]中間錦雞兒3個非生物脅迫相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的克隆與功能分析[D]. 韓曉敏.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
碩士論文
[1]表油菜素內(nèi)酯對高粱低溫脅迫的緩解作用研究[D]. 劉巾瑞.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2018
[2]Cu2+脅迫下擬南芥AtRD22的表達及作用分析[D]. 鐘活權(quán).深圳大學(xué) 2017
[3]4種植物生長調(diào)節(jié)劑對甜菜生長及產(chǎn)質(zhì)量的調(diào)控[D]. 菅彩媛.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]基于iTRAQ技術(shù)對甜菜塊根膨大蛋白質(zhì)組學(xué)的研究[D]. 王雪峰.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[5]水稻病原誘導(dǎo)啟動子POs2H16順式作用元件的分離與鑒定[D]. 何康.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[6]苗期低溫誘導(dǎo)對煙草莖尖油菜素內(nèi)酯含量及其受體基因表達的影響[D]. 朱俊.西南大學(xué) 2016
[7]甜瓜轉(zhuǎn)錄因子家族全基因組預(yù)測及ARF轉(zhuǎn)錄因子家族分析[D]. 牛鵬輝.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
本文編號:3464577
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