目的比較生工生物工程（上海）股份有限公司、廠家A和廠家B三種無縫克隆試劑盒連接效率,為文庫構(gòu)建選擇試劑盒提供參考。方法本研究采用Nco I和Xho I酶切pET26b獲得線性化載體,PCR擴(kuò)增制備線性化片段。無縫隙克隆反應(yīng)體系轉(zhuǎn)化感受態(tài)大腸桿菌,菌落PCR鑒定三種重組試劑盒連接陽性率。結(jié)果生工生物工程（上海）股份有限公司、廠家A和廠家B三種無縫克隆試劑盒分別長出107、86和16個克隆,陽性率分別為90.91%、72.73%和43.75%。結(jié)論從試劑盒性價(jià)比,轉(zhuǎn)化總克隆數(shù)量和陽性克隆率等方面考慮,生工生物工程（上海）股份有限公司的無縫克隆試劑盒為文庫構(gòu)建的最佳選擇。 

【文章來源】：中國醫(yī)藥科學(xué). 2020,10(17)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

p ET26b酶切線性化核酸電泳圖

生工、廠家A和廠家B三種無縫克隆試劑盒連接體系轉(zhuǎn)化DH5α后，分別長出107、86和16個克隆。挑22、22和16個克隆菌液PCR鑒定。生工挑取22個單克隆菌液PCR鑒定，其中20個為陽性克隆，見圖3。圖4 廠家A無縫克隆試劑盒評價(jià)實(shí)驗(yàn)菌液PCR鑒定核酸電泳圖

廠家A無縫克隆試劑盒評價(jià)實(shí)驗(yàn)菌液PCR鑒定核酸電泳圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3451907