嗜酸性喜溫硫桿菌（Acidithiobacillus caldus,A.caldus）具有高效硫氧化能力和對極端環(huán)境（低pH、高濃度金屬離子）的適應(yīng)能力,在生物浸出和生物修復(fù)領(lǐng)域存在廣泛的應(yīng)用前景和巨大的工業(yè)應(yīng)用價值,受到人們的廣泛關(guān)注。根據(jù)目前相關(guān)研究分析,影響A.caldus工業(yè)應(yīng)用的主要因素之一是在浸礦后期極低pH的生長環(huán)境會對其生理活性產(chǎn)生強(qiáng)烈的抑制作用,嚴(yán)重影響A.caldus的生長和繁殖。因此,研究A.caldus與極端酸性生態(tài)系統(tǒng)之間的相互作用關(guān)系,闡明A.caldus適應(yīng)低pH的機(jī)制及抗酸模式,對于理解和完善A.caldus的環(huán)境適應(yīng)性及其生態(tài)行為具有重要的理論意義與實(shí)際應(yīng)用價值。嗜酸菌的抗酸模式與中性菌的抗酸模式相比既有相同的抗酸系統(tǒng)又有其獨(dú)特的抗酸機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn),在酸刺激（pH=0.5）條件下,A.caldus中鐵吸收調(diào)節(jié)蛋白（ferric uptakeregulator,Fur）的轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)了大約3倍,這暗示了 Fur蛋白在A.caldus的酸耐受響應(yīng)中發(fā)揮一定的作用�；趯�(shí)驗(yàn)室前期研究基礎(chǔ)及文獻(xiàn)報道,本論文從以下三個方面開展了A.caldus中Fu... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１?ＡＭＤ中細(xì)菌的分類以及與ｐＨ的相關(guān)性（Ｃｈｅｎ?ｅ／ａ／．?２０１６）

?山東大學(xué)碩士學(xué)位論文???的產(chǎn)生和堿性緩沖物質(zhì)的生成（Ｒｉｃｈａｒｄ?ａｎｄ?Ｆｏｓｔｅｒ?２００４，?Ｇｒｉｓｗｏｌｄ，?Ｃｈｅｎ?ａｎｄ?Ｂｕｍｅ??２００４），如圖１．４所示。??革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌通常采取不同的抗酸系統(tǒng)或機(jī)制以維持胞質(zhì)??ｐＨ穩(wěn)定，革蘭氏陰性嗜酸菌可以使用革蘭氏陰性中性菌的多種類似的策略來增??強(qiáng)抗酸能力（Ｋｒｕｌｗｉｃｈ?ｅ／?ａ／．?２０１１，Ｌｕｎｄ，?Ｔｒａｍｏｎｔｉ?ａｎｄ?Ｄｅ?Ｂｉａｓｅ?２０１４），在嗜酸菌中??進(jìn)一步介導(dǎo)它們以抵御極端酸性挑戰(zhàn)，例如更多的陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和大量的??ＤＮＡ和蛋白質(zhì)修復(fù)系統(tǒng)（Ｂａｋｅｒ－ＡｕｓｔｉｎａｎｄＤｏｐｓｏｎ２００７）。據(jù)報道，在大多數(shù)細(xì)闡??中，一些全局轉(zhuǎn)錄因子如ＯｍｐＲ，ＲｐｏＳ和Ｆｕｒ能夠以調(diào)節(jié)細(xì)胞質(zhì)子穩(wěn)態(tài)的角色??出現(xiàn)（Ｌｕｎｄ?ｄａ／．?２０１４）。酸度是不可避免的環(huán)境壓力，也是影響嗜酸菌在其酸性??自然棲息地中生存的關(guān)鍵因素。然而，目前尚不清楚嗜酸菌抵抗低ｐＨ而采用的??調(diào)控策略。??（ｉ）?Ｋ＊?（“＞?ｈ＊??＾?＾?－??Ｘｍ?ａｔｐ?ａｄｐ??〇ｉｉ）?｜??１?Ｉ??（ｖｉｉ）Ｃ０＊?＋?Ｈ＊?Ｈ＊?ｙ?＾?（ｖ）Ｈ３Ｐ０４?Ｉ?Ｉ??ＶＶ?＇?“?ｔ??＼＼ｔｔ?±?＋?ｔ??？＊?？參參擎魯像？嫵？？癱？籲？暑魯參？魯？魯魯？參參？籲魯？（＊參參令？啤峰畢■？參■？拳癱？參暴＃暴參？參？魯＃?．？？???????？？？??Ｔ?▼??ＨＣＯＯＨ??圖１．４嗜酸菌中酸抗性模型圖（Ｂａｋｅｒ－Ａｕｓｔｉｎ?ａｎｄ?Ｄｏｐｓｏｎ?２００７）。??Ｆｉｇｕｒｅ?１．４?Ｍｏｄｅｌ

?山東大學(xué)碩士學(xué)位論文???的生長具有明顯的抑制作用。因此，選擇氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶（ｃａｒ）基因??構(gòu)建／ｗｃ－ｃ＾操縱子，并將質(zhì)粒ｐＪＲＤ２１５作為骨架質(zhì)粒。成功構(gòu)建了?ｐＪＲＤ２１５－??Ｌｕｃ－Ｃｍ探測母體質(zhì)粒，該質(zhì)粒包含了蠻火蟲熒光素酶（／ｗｃ）基因，核糖體結(jié)合??位點(diǎn)（ＲＢＳ，ＡＡＴＴＧＴＧＡＧＣＧＧＡＴＡＡＣＡＡＴＴＴＣＡＣＡＣＡＧＧＡＡＡＣＡ），氯霉素??乙酰轉(zhuǎn)移酶（ｃｗ）基因和終止子（Ｔ，?ＡＧＡＡＧＧＣＣＡＴＣＣＴＧＡＣＧＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＴ）??（圖２．１）。??Ｆｕｓｉｏｎ?ＰＣｒＴ??Ｎｉｌｅ］?▼?ＲＢＳ?Ｔ??丨?丨ＵＲＤＵＳ?Ｊ?Ｙ／｜?ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ?ｌｉｇａｔｉｏｎ??私，，－－＇丨??ｐＪＲＤ２１５?Ｌｕｃ?Ｃｍ??＼ｙＫｌｌｌ?（１２－６Ｋｂ）?ｍＪ／??Ｎ??圖２．１?／ｗｃ探測載體構(gòu)建的示意圖。??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｆｏｒ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?Ｉｎｃ?ｐｒｏｂｅ?ｖｅｃｔｏｒ．??為了測試報告基因的功能，將質(zhì)粒ｐＪＲＤ２１５－Ｌｕｃ－Ｃｍ和ｐＪＲＤ２１５－Ｐ＿－Ｌｕｃ－??Ｃｍ?轉(zhuǎn)化到五．ｃｏ／／?ＳＭ１０?和?ＡｃｇＷ批?ＭＴＨ－０４?中。含?ｐＪＲＤ２１５－ＰｔｅｔＨ－Ｌｕｃ－Ｃｍ?的?￡．??ｃｏ／／?ＳＭ１０和ＭＴＨ－０４均能在含Ｃｍ的固體平板上生長，顯示出了對Ｍ??霉素的抗性，而含ｐＪＲＤ２１５－Ｌｕｃ－Ｃｍ的菌株均不能形成菌落（圖２．２Ａ．Ｂ）。通過??螢光素酶酶活的測定，表明／ｍｃ基因在￡．〇？／／和中均能表達(dá)。在含冇??ｐＪＲＤ２１５－Ｌｕｃ－Ｃｍ質(zhì)粒的細(xì)胞中幾乎未檢測到螢光素酶活性

【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]嗜酸性喜溫硫桿菌硫代謝過程中底物吸附與胞內(nèi)硫轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制研究[D]. 楊春龍.山東大學(xué) 2019
[2]嗜酸性喜溫硫桿菌中連四硫酸鹽介導(dǎo)的硫代硫酸鹽代謝途徑（S4I）的調(diào)控機(jī)制研究[D]. 王兆寶.山東大學(xué) 2017

碩士論文
[1]施氏假單胞菌海藻糖合酶性質(zhì)及其活性改造的研究[D]. 李珍珍.齊魯工業(yè)大學(xué) 2016



本文編號：3451588