目的:采用基因敲除斑馬魚(yú)模型,觀測(cè)microRNA-1（miR-1）對(duì)神經(jīng)嵴細(xì)胞（neural crest cell,NCC）和顱面發(fā)育的影響。方法:用CRISPR/Cas9基因敲除系統(tǒng)敲除斑馬魚(yú)miR-1,觀察其神經(jīng)嵴衍生物的表型。原位雜交檢測(cè)NCC誘導(dǎo)分化相關(guān)基因的表達(dá),并用實(shí)時(shí)定量PCR（qRT-PCR）等檢驗(yàn)與凋亡相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果:基因敲除組斑馬魚(yú)下頜骨嚴(yán)重萎縮,色素細(xì)胞延遲出現(xiàn)。原位雜交顯示,受精后24 h,tfap2a、dlx3b、ngn1和snailb表達(dá)下降。qRT-PCR結(jié)果證明miR-1影響凋亡相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)論:miR-1參與NCC的調(diào)控進(jìn)而影響顱面發(fā)育,其可能通過(guò)凋亡相關(guān)通路而發(fā)揮作用。 

【文章來(lái)源】：南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2020,40(09)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 斑馬魚(yú)mi R-1基因敲除F5純合突變體鑒定
        1.2.2 阿爾新藍(lán)染色
        1.2.3 整胚原位雜交
        1.2.4 q RT-PCR
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 純合子斑馬魚(yú)基因型鑒定
    2.2 mi R-1敲除后斑馬魚(yú)的表型變化
    2.3 與斑馬魚(yú)顱面硬組織有關(guān)的基因原位雜交
    2.4 q RT-PCR檢測(cè)凋亡相關(guān)基因
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]麥考酚酸對(duì)斑馬魚(yú)胚胎顱面部發(fā)育的影響[J]. 楊迷芳,馬蘭,嚴(yán)冬琳,蔣玲玲.  口腔醫(yī)學(xué). 2019(02)
[2]過(guò)表達(dá)miR-155對(duì)斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育的影響[J]. 黃夢(mèng)圓,李德利,張加良,袁櫟,王暉.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2018(08)



本文編號(hào)：3445472