芽孢桿菌以其獨特的益生特性被應用于各個行業(yè),但部分芽孢桿菌菌株中存在前噬菌體,易被紫外線或絲裂霉素等外界因素誘導轉(zhuǎn)變?yōu)榱倚允删w,從而影響菌株的生長以及工業(yè)化生產(chǎn),進而造成巨大的損失。因此,本實驗通過不同的方法誘導一株溶源性芽孢桿菌,以得到的噬菌體為研究對象,對其形態(tài)特征、生物學特性、環(huán)境因素對吸附能力的影響,以及溫度與化學試劑對該噬菌體的滅活效果進行了研究。結(jié)果如下:（1）該溶原性芽孢桿菌噬菌體的最佳誘導方法是在距紫外燈（254nm）10-15cm處照射40s。經(jīng)透射電鏡觀察該芽孢桿菌噬菌體（B1）屬于肌尾噬菌體科。該噬菌體的最佳感染復數(shù)為10,潛伏期為45min,之后進入裂解期,在105min時進入平穩(wěn)期,裂解量平均為104.48±2.70PFU。（2）溫度與pH值對該噬菌體影響較大。在pH值為2和3時,噬菌體B1完全失活。當溫度為0°C時,存活率僅有19.37%。而溫度為36℃時,噬菌體B1的存活率達到90.22%。（3）pH值對噬菌體B1的吸附率影響較小,在pH 5-9時,噬菌體B1的吸附率在90%以上。溫度為0℃-36℃時,對噬菌體B1的吸附能力沒有明顯影響,其吸附率均可達到... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２?菌株１６Ｓ?ｒＤＮＡ系統(tǒng)發(fā)育分析??

圖３?紫外誘導甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌??Ｆｉｇｕｒｅ．３?Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ?ｉｎｄｕｃｅｄ?Ｂａｃｉｌｌｕｓ?ｍｅｔｈｙｌｏｔｒｏｐｈｉｃ??紫外誘導原噬菌體釋放是溶源性噬菌體誘導的常規(guī)方法之一［４６］。圖３??顯示了溶原性甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌菌懸液經(jīng)過紫外（２５４ｎｍ）照射不同時??間后，培養(yǎng)期６ｈ內(nèi)菌液ＯＤ６〇〇值的變化情況。由圖可知，照射４０ｓ時溶原??性甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌誘導液的〇Ｄ６〇０值變化比較平穩(wěn)；當照射３０ｓ時溶??原性甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌的誘導液〇Ｄ＿值呈下降趨勢；照射２０ｓ時溶原??性甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌的誘導液〇〇＿值呈先下降然后平穩(wěn)的趨勢；照射??１０ｓ時溶原性甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌的誘導液ＯＤ６Ｇ（）值呈先上升然后下降的??趨勢。??２００５年，金雨華通過對溶源性乳酸菌紫外誘變前后生長特性的初步研??宄結(jié)果顯示，嗜熱鏈球菌在１５Ｗ紫外燈下，在３０ｃｍ處照射誘導９０ｓ后進??行培養(yǎng)，細菌的〇Ｄ６〇（）值總是低于對照樣的ＯＤ６〇（）值。由此可以判斷，菌??體中的溫和噬菌體經(jīng)過紫外誘變轉(zhuǎn)變?yōu)榱倚允删w［４７］。２００２年，Ｗｏｏｄｓ等??將５．?菌株在２５４ｎｍ紫外燈下在距離２５ｃｍ處照射２０ｓ后，通??過雙層平板實驗結(jié)果產(chǎn)生清晰的斑塊噬菌體［４８］。Ｈｅｎｓ等在２００５年對??ＤＲ１１菌株進行紫外線誘導，測定其噻菌體的效價為??２．３Ｍ〇８ＰＦＵ／ｍＬ。透射電鏡顯示該噬菌體的形態(tài)為六角形頭部

很多研究采用絲裂霉素作為溶源性噬菌體的誘變劑，也被認為是最簡??單易行的誘導手段［５°］。本研究采用不同濃度的絲裂霉素對溶原性甲基營養(yǎng)??型芽孢桿菌培養(yǎng)液進行誘導，結(jié)果如圖所示。由圖４可知，利用０．５ｐｇ／ｍＬ??和ｌＵｇ／ｍＬ絲裂霉素誘導溶原性甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌時，其培養(yǎng)液的ＯＤ６００??值都有下降趨勢，但是ｌｐｇ／ｍＬ絲裂霉素比０．５｜＿ｉｇ／ｍＬ下降的快，推測是噬??菌體的出現(xiàn)導致溶原性甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌培養(yǎng)液的〇Ｄ６〇〇值下降。取誘??導后的溶原性甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌上清液，以實驗菌株甲基營養(yǎng)型芽孢桿??菌為宿主菌進行雙層平板實驗，結(jié)果顯示培養(yǎng)基平板上沒有噬菌斑的出現(xiàn)。??２０１１年，Ｌｅｅ等利用Ｕｉｇ／ｍＬ的絲裂霉素Ｃ誘導蠟狀芽孢桿菌２５０，并??獲得溫和噬菌體Ｔｐ２５０。通過分析溫和噬菌體Ｔｐ２５０核苷酸序列，已知ＯＦＲ??

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]植物乳桿菌烈性噬菌體P2生物學特性的研究[D]. 范夢茹.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學 2017
[2]植物乳桿菌烈性噬菌體P2的滅活及基因組學的研究[D]. 吳文茹.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學 2017
[3]一株乳桿菌烈性噬菌體的分離鑒定及其生物學特性的研究[D]. 習羽.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學 2016
[4]枯草桿菌噬菌體TXp1的生物學特性及抗性菌株的選育[D]. 張建璀.河南師范大學 2014



本文編號：3443053