發(fā)布時間：2021-10-17 18:56

　　雜交瘤細胞具有無限繁殖和抗體分泌的雙重優(yōu)勢,其規(guī)�；囵B(yǎng)工藝是當前生產(chǎn)抗體產(chǎn)品的重要技術。規(guī)�；療o血清培養(yǎng)雜交瘤細胞具有簡化工藝、降低生產(chǎn)成本、提高抗體產(chǎn)量等優(yōu)點。本文研究了血清對骨髓瘤及雜交瘤細胞生長的影響,在此基礎上研發(fā)了適合雜交瘤細胞生長的無血清培養(yǎng)基,并進一步研究了雜交瘤細胞無血清培養(yǎng)基的轉瓶擴大培養(yǎng),主要內容包括以下幾個部分:第一,配制含不同血清濃度（10%、7.5%、5%）的DMEM培養(yǎng)基,將生長狀態(tài)良好、處于對數(shù)期的5H2、Sp2/0-Ab、Sp2/0三種細胞分別以三種不同的接種密度接種到含上述培養(yǎng)基的12孔細胞培養(yǎng)板中,考查了不同血清濃度、不同接種密度對細胞生長與增殖的影響。通過細胞計數(shù)儀測量的數(shù)據(jù)表明血清濃度對三種細胞都有較大影響,三種細胞在10%血清濃度培養(yǎng)基中正常生長而在低血清濃度中不能正常生長,在相同的血清濃度下,具有高細胞接種密度的細胞增殖較快并且倍增時間短。第二,將DMEM培養(yǎng)基、Ham’s F-12培養(yǎng)基和RPMI1640培養(yǎng)基按照一定比例配制成基礎培養(yǎng)基,在此基礎上加入不同量的胰島素、水解蛋白、轉鐵蛋白、膽固醇和乙醇胺等成分配制成無血清低蛋白培養(yǎng)基。通過... 

【文章來源】：河北大學河北省

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

H2細胞在不同血清濃度下低密度接種生長曲線

圖 2-2 5H2 細胞在不同血清濃度下中密度接種生長曲線Figure 2-2 Medium density seeding growth curve of 5H2 cells at different serum concentration圖 2-3 5H2 細胞在不同血清濃度下高密度接種生長曲線Figure 2-3 High-density inoculation growth curve of 5H2 cells at different serum concentration

13圖 2-3 5H2 細胞在不同血清濃度下高密度接種生長曲線Figure 2-3 High-density inoculation growth curve of 5H2 cells at different serum concentration從表2-3中可以看出，在目前常用的10%血清濃度的培養(yǎng)基中，以三種接種密度0.5×105個/mL，中密度1.4×105個/mL，高密度2.8×105個/mL）的細胞都能夠的生長，且細胞大小均勻、狀態(tài)良好。其中即使以較低的0.5×105個/mL來進細胞也能正常存活，并且最終達到4.84×105個/mL。而當以2.8×105個/mL接種4天的培養(yǎng)，細胞密度最高達到了18.07×105個/mL（見圖2-3）。這些結果表明，濃度的培養(yǎng)基能夠為細胞的生長和增殖提供必需的各種因子和營養(yǎng)物質。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]動物細胞無血清培養(yǎng)技術研究進展[J]. 阿爾祖古麗,馬桂蘭,阿依木古麗,喬自林.  甘肅畜牧獸醫(yī). 2018(10)
[2]雜交瘤細胞體外大規(guī)模培養(yǎng)研究進展[J]. 孫靜靜,周偉偉,周雷鳴,趙巧輝,李桂林.  中國生物工程雜志. 2018(10)
[3]靶點介導的藥物處置模型在單克隆抗體藥物研發(fā)中應用的探討[J]. 季雙敏,朱校.  中國臨床藥理學與治療學. 2018(03)
[4]不同pH值聚乙二醇對雞紅細胞融合的影響[J]. 張麗嬌,丁亦男,魏健,高立宏.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2018(05)
[5]毛細管電泳技術在單克隆抗體藥物分析中的應用[J]. 陳泓序,屈鋒.  色譜. 2018(03)
[6]動物細胞規(guī)模化培養(yǎng)技術現(xiàn)狀[J]. 楚品品,蔣智勇,勾紅潮,宋帥,李淼,李艷,李春玲,蔡汝健.  動物醫(yī)學進展. 2018(02)
[7]無血清培養(yǎng)基的研究進展[J]. 張松,喬自林,王家敏.  江西畜牧獸醫(yī)雜志. 2018(01)
[8]單克隆抗體和基因工程抗體在感染性疾病病原體檢測中的應用[J]. 趙笑,張冬梅.  中國病原生物學雜志. 2016(08)
[9]單克隆抗體純化技術研究進展[J]. 汪立法.  黑龍江科技信息. 2016(24)
[10]抗表皮生長因子受體（EGFR）單克隆抗體高表達細胞株的克隆篩選[J]. 李鄭武,姜媛媛,李國軍,高晶,袁淑杰.  黑龍江科技信息. 2016(13)

博士論文
[1]哺乳動物細胞培養(yǎng)工藝優(yōu)化[D]. 貢向輝.中國科學院研究生院（上海生命科學研究院） 2006

碩士論文
[1]CHO DG44穩(wěn)定細胞株無血清培養(yǎng)基的研發(fā)與優(yōu)化[D]. 郭紀元.廈門大學 2014
[2]CHO細胞表達rhFSH的大規(guī)模無血清培養(yǎng)工藝的研究[D]. 石欣欣.吉林大學 2012
[3]重組CHO細胞的無血清懸浮培養(yǎng)[D]. 張大鶴.華東理工大學 2011



本文編號：3442257