膠被作為藍(lán)藻細(xì)胞外的一層功能性結(jié)構(gòu),其提取方法仍不清晰完善.本研究選取具有不同膠被形態(tài)的魚腥藻Anabaena sp.和念珠藻Nostoc sp.為實驗材料,通過歸納近10年有關(guān)藻類膠被的提取方法,總結(jié)影響膠被提取效果的主要因素（溫度、提取劑濃度、時間等）范圍,并設(shè)置一系列因素及其梯度的雙因素實驗和正交實驗對膠被提取方法進(jìn)行優(yōu)化,觀察提取過程中藻細(xì)胞形態(tài)、自發(fā)熒光以及藻細(xì)胞密度變化.結(jié)果表明,粘液可通過離心法與藻細(xì)胞分離;莢膜提取的硫酸水浴法的最優(yōu)條件為:1 mol/L、60℃、30 min,氫氧化鈉水浴法為:0.01 mol/L、50℃、20 min;鞘提取的最優(yōu)方法條件為氫氧化鈉水浴法（0.01 mol/L、80℃、40 min）和超聲法（20 kHz,30 W,on:3 s,off:3 s,2 min）結(jié)合處理.此外,通過高效液相色譜法測定提取的藍(lán)藻膠被多糖組分,結(jié)果顯示,鞘具有較強(qiáng)的疏水性,未水化為粘液或RPS,而莢膜中含有的氨基葡萄糖（1.261±0.02 mg/g）使得莢膜比鞘更具有粘附力.將本研究得到的莢膜和鞘的最優(yōu)提取法運用到膠被形態(tài)以莢膜和鞘為主的其他藻種,均有很好的... 

【文章來源】：湖泊科學(xué). 2020,32(03)北大核心EICSCD

【文章頁數(shù)】：12 頁

【部分圖文】：

魚腥藻和念珠藻的膠被形態(tài):(a～c)FACHB-82魚腥藻;(d～e)FACHB-599念珠藻(a、b:未染色;c:印度墨水染色，莢膜(白箭頭)，粘液(紅箭頭);d:未染色，鞘(黑箭頭);e:印度墨水染色)

念珠藻在高速離心(>15000g,>1 h)后，鞘結(jié)構(gòu)發(fā)生小部分破裂，少部分藻鏈逸出，經(jīng)印度墨水染色發(fā)現(xiàn)逸出藻鏈周圍無膠被存在(圖2d)．超聲法對膠被提取效果不明顯，且功率過高容易導(dǎo)致細(xì)胞破裂(圖2e)．陽離子交換樹脂法只能提取最外層鞘，內(nèi)層鞘提取效果不明顯(圖2f)．在溫度、時間閾值內(nèi)適當(dāng)提高溫度、延長處理時間，氫氧化鈉水浴法(0.01 mol/L,80℃，40 min)可以使鞘結(jié)構(gòu)變得松散(圖2g)，但膠被依然存在(圖2h)，再用超聲法冰浴超聲(20 kHz，≥30 W，≥2 min,on:3 s,off:3 s)，即可將念珠藻藻絲與鞘層完全分離(圖2i).2.2 藍(lán)藻膠被提取方法條件優(yōu)化

念珠藻在高溫、長時間的氫氧化鈉水浴法(0.01 mol/L,80℃，40 min)條件下鞘結(jié)構(gòu)才變得松散，在光學(xué)顯微鏡下未見明顯邊緣(圖2g)，由于超聲功率過大，時間過長易對藻細(xì)胞產(chǎn)生一定的機(jī)械破壞，因此選擇低功率、短時間冰浴超聲(20 kHz,30 W,2 min,on:3 s,off:3 s)結(jié)合處理即可將膠被和藻絲完全分離(圖2i)，且自發(fā)熒光依然存在(圖3C).圖4 魚腥藻完全提取膠被實驗組下藻細(xì)胞密度

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]微囊藻膠鞘多糖和水溶性胞外多糖的化學(xué)特性[J]. 陳毛珍,謝梅娟,巫偉,喻富根,李朋富.  湖泊科學(xué). 2016(03)
[2]銅綠微囊藻（Microcystic aeruginosa var.major）胞外酸性多糖的分離、純化及其理化特性[J]. 梅秋紅,繆月秋,張成武,陸長梅,吳國榮.  湖泊科學(xué). 2005(04)



本文編號：3442020