【目的】鯊烯環(huán)氧酶（squalene epoxidases,SQE）是苜蓿皂甙合成途徑中的一種限速酶,與苜蓿皂甙的合成密切相關(guān)。通過對(duì)苜蓿鯊烯環(huán)氧酶（MsSQE1）基因的克隆及在苜蓿中過表達(dá),探究鯊烯環(huán)氧酶對(duì)皂甙合成的作用機(jī)制�！痉椒ā恳阅Ｊ街参镙疝架俎ｕ徬┉h(huán)氧酶基因序列設(shè)計(jì)引物,同源克隆苜蓿MsSQE1。對(duì)MsSQE1進(jìn)行生物信息學(xué)分析;通過基因槍轟擊技術(shù),使MsSQE1在洋蔥表皮瞬時(shí)表達(dá),進(jìn)行亞細(xì)胞定位。利用qRT-PCR方法分析該基因在根、莖、葉中的表達(dá)水平,以及在紫外輻射、ABA和GA3條件下的表達(dá)模式。在茉莉酸甲酯（MeJA）的誘導(dǎo)下,分析MsSQE1的轉(zhuǎn)錄水平,及對(duì)苜蓿皂甙含量的影響。利用根癌農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化體系,獲得過表達(dá)MsSQE1的陽性轉(zhuǎn)基因植株,并測(cè)定轉(zhuǎn)基因植株的皂甙含量�！窘Y(jié)果】克隆了MsSQE1的cDNA序列,開放閱讀框1 578 bp,編碼525個(gè)氨基酸,等電點(diǎn)為8.59。同源性比對(duì)分析,其氨基酸序列與蒺藜苜蓿中SQE1氨基酸序列同源性為98.6%,與擬南芥的同源性為80%。亞細(xì)胞定位顯示,MsSQE1可能定位于細(xì)胞膜。組織特異性表達(dá)分析顯示,MsSQE1在葉中的表... 

【文章來源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,53(02)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：14 頁(yè)

【部分圖文】：

MsSQE1的克隆與cDNA全序列

代表性物種SQE1氨基酸序列的多重比對(duì)

紫花苜蓿與其他物種SQE的系統(tǒng)進(jìn)化樹

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]牛樟芝鯊烯環(huán)氧酶基因的克隆、生物信息學(xué)及表達(dá)分析[J]. 李晶,林雄杰,王澤輝,劉艷玲,林占熺.  中草藥. 2018(10)
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本文編號(hào)：3399101