大菱鲆是我國重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖魚類,具有很高的經(jīng)濟價值和良好的市場前景,但由微生物引起的大菱鲆腐敗變質(zhì)也是十分嚴重。研究表明,熒光假單胞菌（Pseudomonas fluorescens）和腐敗希瓦氏菌（Shewanella putrefaciens）是養(yǎng)殖魚類低溫貯藏過程中的特定腐敗菌。而腐敗菌的生長及特性的表達受其群體感應系統(tǒng)（Quorum Sensing,QS）的調(diào)控,其中,N-�；�-高絲氨酸內(nèi)酯（N-acyl-homoserine lactones,AHLs）是革蘭氏陰性菌QS系統(tǒng)中最常見的一類信號分子。課題組已分離出大菱鲆源熒光假單胞菌P.fluorescens PF08和腐敗希瓦氏菌S.putrefaciens SP01,其中熒光假單胞菌能產(chǎn)生AHLs,而腐敗希瓦氏菌不產(chǎn)AHLs。鑒于此,本研究比較分析了不同類型外源AHLs對菌株SP01 QS信號分子表達情況的影響,進一步探討菌株PF08對菌株SP01 AHL-QS系統(tǒng)及致腐性的影響,并通過接種于大菱鲆魚塊分析菌株PF08和菌株SP01的致腐能力。主要結(jié)論如下:1.生物報告菌法及氣相色譜-質(zhì)譜技術（Gas Chromatogr... 

【文章來源】：渤海大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 細菌群體感應
        1.1.1 細菌群體感應概況
        1.1.2 群體感應的類型
    1.2 大菱鲆簡介
        1.2.1 大菱鲆資源及消費現(xiàn)狀
        1.2.2 大菱鲆研究現(xiàn)狀
    1.3 大菱鲆腐敗與群體感應
        1.3.1 大菱鲆腐敗過程中菌相變化
        1.3.2 大菱鲆腐敗與群體感應
    1.4 細菌間的相互作用
        1.4.1 概況
        1.4.2 群體感應在細菌相互作用中的研究進展
    1.5 研究目的意義、內(nèi)容
        1.5.1 研究目的意義
        1.5.2 研究內(nèi)容
第二章 腐敗希瓦氏菌群體感應相關基因luxR及腐敗相關基因csB、trxR篩選及驗證
    2.1 前言
    2.2 材料與設備
        2.2.1 菌株及培養(yǎng)條件
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 主要設備
    2.3 方法
        2.3.1 菌株SP01的AHLs檢測
        2.3.2 基因PCR擴增及序列分析
        2.3.3 菌株SP01 群體感應調(diào)控基因luxR及腐敗相關基因csB、trxR的驗證
        2.3.4 luxR基因的分析及其編碼蛋白質(zhì)
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 檢測菌株SP01中AHLs信號分子
        2.4.2 菌株SP01群體感應調(diào)控基因luxR及腐敗相關基因csB、trxR的驗證
        2.4.3 luxR蛋白序列分析
    2.5 小結(jié)
第三章 外源信號分子AHLs對腐敗希瓦氏菌AHL-QS系統(tǒng)表達情況的影響.
    3.1 前言
    3.2 材料與設備
        3.2.1 菌種與培養(yǎng)條件
        3.2.2 材料準備
        3.2.3 主要試劑及儀器
    3.3 材料與方法
        3.3.1 外源AHLs添加對菌株SP01生長的影響
        3.3.2 外源AHLs添加對菌株SP01蛋白酶活性的影響
        3.3.3 外源AHLs添加對菌株SP01運動性的影響
        3.3.4 外源AHLs添加對菌株SP01生物被膜的影響
        3.3.5 外源AHLs添加對菌株SP01luxR及腐敗相關基因表達水平的影響
        3.3.6 外源AHLs對菌株SP01 受體蛋白luxR影響
        3.3.7 數(shù)據(jù)分析
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 外源AHLs對菌株SP01生長的影響
        3.4.2 外源AHLs對菌株SP01蛋白酶及運動性的影響
        3.4.3 外源AHLs對菌株SP01生物被膜的影響
        3.4.4 外源AHLs對菌株SP01QS及腐敗相關基因表達水平的影響
        3.4.5 外源AHLs對菌株SP01luxR受體蛋白影響
    3.5 小結(jié)
第四章 熒光假單胞菌對腐敗希瓦氏菌AHL-QS系統(tǒng)及致腐性的影響
    4.1 前言
    4.2 材料與儀器
        4.2.1 菌種及培養(yǎng)條件
        4.2.2 試劑
        4.2.3 儀器
    4.3 方法
        4.3.1 菌株PF08無細胞上清液(CFS)及菌體重懸液(CS)的制備
        4.3.2 菌株PF08CFS及CS對菌株SP01菌體密度的影響
        4.3.3 菌株PF08CFS及CS對菌株SP01蛋白酶和運動活性的影響
        4.3.4 菌株PF08CFS及CS對菌株SP01生物被膜形成的影響
        4.3.5 菌株PF08與菌株SP01共培養(yǎng)對菌株SP01活菌數(shù)的影響
        4.3.6 菌株PF08與菌株SP01共培養(yǎng)對菌株SP01蛋白酶和運動活性的影響
        4.3.7 菌株PF08與菌株SP01共培養(yǎng)對菌株SP01生物被膜形成的影響
        4.3.8 菌株PF08與菌株SP01共培養(yǎng)對AHLs活性的影響
        4.3.9 菌株PF08對菌株SP01QS及腐敗基因表達水平的影響
        4.3.10 數(shù)據(jù)分析
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 菌株PF08CFS及CS對菌株SP01生長的影響
        4.4.2 菌株PF08CFS及CS對菌株SP01蛋白酶及運動活性的影響
        4.4.3 菌株PF08CFS及CS對菌株SP01生物被膜形成的影響
        4.4.4 菌株PF08與菌株SP01共培養(yǎng)對菌株SP01的影響
        4.4.5 菌株PF08對菌株SP01 luxR基因表達的影響
        4.4.6 菌株PF08對菌株SP01腐敗相關基因表達的影響
    4.5 小結(jié)
第五章 腐敗希瓦氏菌及其與熒光假單胞菌共培養(yǎng)對微凍和冷藏大菱鲆致腐能力的影響
    5.1 引言
    5.2 材料和方法
        5.2.1 材料
        5.2.2 儀器與設備
    5.3 方法
        5.3.1 無菌魚塊制備
        5.3.2 細菌菌懸液制備
        5.3.3接種與貯藏實驗
        5.3.4 指標測定
        5.3.5 數(shù)據(jù)分析
    5.4 結(jié)果與分析
        5.4.1 菌落計數(shù)
        5.4.2 pH
        5.4.3 TBA
        5.4.4 GC-MS分析結(jié)果
    5.5 小結(jié)
第六章 總結(jié)、創(chuàng)新點和展望
    6.1 總結(jié)
    6.2 創(chuàng)新點
    6.3 展望
參考文獻
碩士期間發(fā)表論文情況
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]2017年鲆鰈魚養(yǎng)殖生產(chǎn)形勢特點及建議[J]. 李凱,李魯晶.  河北漁業(yè). 2018(03)
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[8]產(chǎn)業(yè)集聚視角下我國大菱鲆養(yǎng)殖品牌建設分析[J]. 曹自強,楊正勇.  上海海洋大學學報. 2017(01)
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博士論文
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碩士論文
[1]基于DKP-LuxR的群體感應系統(tǒng)對Shewanella baltica腐敗能力以及菌膜形成的調(diào)控研究[D]. 王飛飛.浙江工商大學 2018
[2]P.fluorescens和S.baltica共培養(yǎng)下生物被膜形成及互作機制研究[D]. 嚴羽萍.浙江工商大學 2018
[3]預制牛肉貯藏期間品質(zhì)變化及微生物生長模型的建立[D]. 李凱利.浙江農(nóng)林大學 2018
[4]大黃魚腐敗希瓦氏菌群體感應信號分子AHLs對其致腐性的影響及機制研究[D]. 張笑笑.浙江工商大學 2017
[5]基于群體感應分析腐敗希瓦氏菌對副溶血弧菌毒力因子的影響機制[D]. 李燦.廣東海洋大學 2016
[6]細菌共培養(yǎng)對豬源糞腸球菌生物學特性的影響[D]. 武二麗.河南農(nóng)業(yè)大學 2016
[7]腐敗希瓦氏菌致腐相關基因分析及群體感應信號分子對其調(diào)控作用的研究[D]. 劉娜娜.浙江工商大學 2015
[8]基于群體感應分析對蝦優(yōu)勢腐敗菌對副溶血弧菌毒力因子的影響[D]. 張煜琛.廣東海洋大學 2015
[9]大黃魚源希瓦氏菌的分離鑒定及菌株致腐能力差異機制初探[D]. 趙二科.浙江工商大學 2015
[10]茶多酚處理對冷藏大菱鲆的品質(zhì)變化影響及其抑菌機理研究[D]. 劉劍俠.渤海大學 2014



本文編號：3390864