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氯化銨裂解法與非裂解法提取人脂肪干細胞生物學特性的差異

發(fā)布時間:2021-08-18 16:49
  背景:脂肪干細胞的提取及純化流程尚未建立統(tǒng)一標準。最常用的純化脂肪干細胞的方法是利用紅細胞裂解液處理基質(zhì)血管成分。但這一步驟是否對脂肪干細胞存在不良影響仍缺乏證據(jù),是否有利于未來臨床應(yīng)用仍有待探討。目的:比較氯化銨紅細胞裂解液法和非裂解法提取脂肪干細胞的效率,并進一步比較兩種方法提取脂肪干細胞的生物學特性。方法:收集吸脂手術(shù)患者脂肪組織,經(jīng)Ⅰ型膠原酶消化后,利用或不用氯化銨紅細胞裂解液對基質(zhì)血管成分進行純化,MuseTM細胞狀態(tài)分析儀對活細胞計數(shù)及活細胞比例評估;將基質(zhì)血管成分接種后培養(yǎng)人脂肪干細胞至第2代,光學顯微鏡觀察脂肪干細胞形態(tài),流式細胞學分析脂肪干細胞表型,CCK-8法繪制細胞增殖曲線,成脂及成骨培養(yǎng)基誘導后油紅O及茜素紅染色法分別評估成脂、成骨分化能力。該實驗經(jīng)中國醫(yī)學科學院整形外科醫(yī)院倫理委員會批準,并與患者簽署相關(guān)知情同意書。結(jié)果與結(jié)論:①與裂解組相比,非裂解組提取即刻的基質(zhì)血管成分中非紅活細胞數(shù)更多,活細胞百分比更大;②兩組脂肪干細胞均呈梭形、魚群狀排列;③兩組細胞均高表達CD90、CD73、CD105等細胞表面抗原,低表達或不表達CD11b、C... 

【文章來源】:中國組織工程研究. 2020,24(01)北大核心

【文章頁數(shù)】:6 頁

【部分圖文】:

氯化銨裂解法與非裂解法提取人脂肪干細胞生物學特性的差異


人脂肪干細胞成脂分化及鑒定(×200)Figure5Adipogenicdifferentiationandidentificationofhumanadipose-derivedstemcells(×200)非裂解組裂解組0色累積光密度值


本文編號:3350258

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