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氯化銨裂解法與非裂解法提取人脂肪干細(xì)胞生物學(xué)特性的差異

發(fā)布時(shí)間:2021-08-18 16:49
  背景:脂肪干細(xì)胞的提取及純化流程尚未建立統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。最常用的純化脂肪干細(xì)胞的方法是利用紅細(xì)胞裂解液處理基質(zhì)血管成分。但這一步驟是否對(duì)脂肪干細(xì)胞存在不良影響仍缺乏證據(jù),是否有利于未來(lái)臨床應(yīng)用仍有待探討。目的:比較氯化銨紅細(xì)胞裂解液法和非裂解法提取脂肪干細(xì)胞的效率,并進(jìn)一步比較兩種方法提取脂肪干細(xì)胞的生物學(xué)特性。方法:收集吸脂手術(shù)患者脂肪組織,經(jīng)Ⅰ型膠原酶消化后,利用或不用氯化銨紅細(xì)胞裂解液對(duì)基質(zhì)血管成分進(jìn)行純化,MuseTM細(xì)胞狀態(tài)分析儀對(duì)活細(xì)胞計(jì)數(shù)及活細(xì)胞比例評(píng)估;將基質(zhì)血管成分接種后培養(yǎng)人脂肪干細(xì)胞至第2代,光學(xué)顯微鏡觀察脂肪干細(xì)胞形態(tài),流式細(xì)胞學(xué)分析脂肪干細(xì)胞表型,CCK-8法繪制細(xì)胞增殖曲線,成脂及成骨培養(yǎng)基誘導(dǎo)后油紅O及茜素紅染色法分別評(píng)估成脂、成骨分化能力。該實(shí)驗(yàn)經(jīng)中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院整形外科醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn),并與患者簽署相關(guān)知情同意書。結(jié)果與結(jié)論:①與裂解組相比,非裂解組提取即刻的基質(zhì)血管成分中非紅活細(xì)胞數(shù)更多,活細(xì)胞百分比更大;②兩組脂肪干細(xì)胞均呈梭形、魚群狀排列;③兩組細(xì)胞均高表達(dá)CD90、CD73、CD105等細(xì)胞表面抗原,低表達(dá)或不表達(dá)CD11b、C... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)組織工程研究. 2020,24(01)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)

【部分圖文】:

氯化銨裂解法與非裂解法提取人脂肪干細(xì)胞生物學(xué)特性的差異


人脂肪干細(xì)胞成脂分化及鑒定(×200)Figure5Adipogenicdifferentiationandidentificationofhumanadipose-derivedstemcells(×200)非裂解組裂解組0色累積光密度值


本文編號(hào):3350258

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