目的利用新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）反向遺傳系統(tǒng)構(gòu)建表達(dá)呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）F蛋白的重組病毒,并以BALB/c小鼠為動(dòng)物模型,評(píng)價(jià)其免疫原性。方法在已建立的NDV反向遺傳系統(tǒng)的基礎(chǔ)上,將RSV F基因插入NDV全長cDNA克隆中,構(gòu)建并拯救獲得表達(dá)RSV F蛋白的重組病毒r LS/RSV-F。采用間接免疫熒光（indirect immunoinfluscent assay,IFA）法鑒定RSV F蛋白的表達(dá);以HA、病毒半數(shù)雞胚感染量（50%infective dose,EID50）、半數(shù)組織感染量（50%tissue infectious dose,TCID50）及生長曲線等生物學(xué)指標(biāo)對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行鑒定;將r LS/RSV-F滴鼻免疫BALB/c小鼠,于免疫后第49天經(jīng)眼眶后靜脈叢采血,分離血清,ELISA法檢測(cè)IgG抗體效價(jià),中和試驗(yàn)檢測(cè)中和抗體效價(jià)。結(jié)果成功拯救表達(dá)RSV F蛋白的NDV重組病毒r LS/RSV-F,具有與親本病毒相似的感染能力及生長動(dòng)力學(xué)特性;r LS/RSV... 

【文章來源】：中國生物制品學(xué)雜志. 2020,33(02)CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

重組病毒r LS/RSV-F插入片段的鑒定

IFA法檢測(cè)F蛋白的表達(dá)（×100)

中和試驗(yàn)結(jié)果顯示，PBS及rLS對(duì)照組均未檢測(cè)到中和抗體，而rLS/RSV-F實(shí)驗(yàn)組檢測(cè)到高水平中和抗體，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t均為-3.055,P均<0.05），見圖6，表明rLS/RSV-F能有效誘導(dǎo)RSV中和抗體的產(chǎn)生。圖5 各組小鼠血清IgG抗體水平的ELISA檢測(cè)


本文編號(hào)：3350442