間充質(zhì)干細(xì)胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）由于其優(yōu)異的免疫調(diào)節(jié)及分化潛能,被公認(rèn)為再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域最有前景的細(xì)胞之一。但是供體組織直接分離出的MSCs數(shù)量有限,而現(xiàn)有的MSCs擴(kuò)增用含血清培養(yǎng)基無法應(yīng)用于臨床,商業(yè)化無血清培養(yǎng)基又存在諸如對(duì)MSCs功能特性的維持能力較差等問題,導(dǎo)致MSCs相關(guān)的臨床應(yīng)用面臨較大阻礙。究其原因,主要是對(duì)培養(yǎng)基中關(guān)鍵因子對(duì)細(xì)胞增殖及功能的影響及其相關(guān)機(jī)制的認(rèn)識(shí)十分有限。而血清成分不明,商業(yè)化無血清培養(yǎng)基成分保密,因此無法基于這些培養(yǎng)基探究培養(yǎng)基組分對(duì)擴(kuò)增的BMSCs生物學(xué)特性的影響,也無法精確調(diào)控細(xì)胞行為。針對(duì)上述問題,本文采用實(shí)驗(yàn)方法設(shè)計(jì)適合大鼠骨髓來源MSCs（Bone marrow-derived MSCs,BMSCs）體外擴(kuò)增并維持其功能特性的無血清培養(yǎng)基,進(jìn)一步探究關(guān)鍵組分轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（Transforming growth factor-β31,TGF-β31）對(duì)BMSCs增殖的影響及其分子機(jī)制。根據(jù)BMSCs的生物學(xué)特性和文獻(xiàn)調(diào)研選擇了19種無血清培養(yǎng)基的添加成分,采用Plackett-Burman設(shè)計(jì)方法,以細(xì)胞增殖... 

【文章來源】：華東理工大學(xué)上海市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１?ＭＳＣｓ的來源及特性＿??Ｆｉｇ?１．１?ＭＳＣｓ?ｓｏｕｒｃｅｓ?ａｎｄ?ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ??

２．３．２．１?０Ｍ中ＢＭＳＣｓ的形態(tài)觀察和增殖檢測(cè)??將Ｐ４代或Ｐ５代ＢＭＳＣｓ以ｌｘｌ〇４?ｃｅｌｌｓ／ｃｍ２的密度接種至上述各組培養(yǎng)基后，培養(yǎng)??至第６天觀察細(xì)胞形態(tài)。由圖２．４?（ａ）可知，對(duì)照組含血清培養(yǎng)基ＳＣＭ和商業(yè)化無血??清培養(yǎng)基Ｌｚ中細(xì)胞呈細(xì)長(zhǎng)的梭狀，魚群狀分布，細(xì)胞匯合率達(dá)到９０％以上。實(shí)驗(yàn)組中，??Ｏｐｔ－１、Ｏｐｔ－７、Ｏｐｔ－８、Ｏｐｔ－１５、Ｏｐｔ－１８無血清培養(yǎng)基中ＢＭＳＣｓ能夠進(jìn)行貼壁生長(zhǎng)，細(xì)??胞呈梭狀，密度較其他５組更高，與圖２．１中的對(duì)應(yīng)初篩培養(yǎng)基相比，細(xì)胞數(shù)量和形態(tài)??均得到改善，但仍差于ＳＣＭ組和Ｌｚ組。其他５組中細(xì)胞數(shù)量較少，其中，Ｏｐｔ－９、Ｏｐｔ－??１３和Ｏｐｔ－２０中細(xì)胞成簇生長(zhǎng)，Ｏｐｔ－２１和Ｏｐｔ－２２中雖有部分細(xì)胞貼壁，但細(xì)胞數(shù)量較??少。圖２．４（ｂ）為Ｐ５代ＢＭＳＣｓ在ＯＭ各培養(yǎng)基中培養(yǎng)至第６天的形態(tài)，和Ｐ４代ＢＭＳＣｓ??相比，無明顯差別。??

圖２．４?ＯＭ中ＢＭＳＣｓ的形態(tài)??Ｆｉｇ．２．４?ＢＭＳＣｓ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｉｎ?ＯＭ??用ＣＣＫ－８試劑盒測(cè)定ＢＭＳＣｓ在各組培養(yǎng)基中的增殖情況。如圖２．５所示，Ｌｚ組和??ＳＣＭ組細(xì)胞增殖基本相當(dāng)。和初篩無血清培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)組（見圖２．２）相比，０？１－１、０卩１－??７、Ｏｐｔ－８、Ｏｐｔ－１５、Ｏｐｔ－１８實(shí)驗(yàn)組在第６天獲得的細(xì)胞數(shù)有明顯提升。??ａ??３．０－｜??２－５－?｜??ｌｌｉｌｉｉ??ｂ?＃?〇今?〇／?〇／?ｃ／?〇／?ｃ／?ｃ／?Ｖ?＃??Ａ?Ｍｅｄｉｕｍ??茗?１２０－??＾１００－?ｎ??１?８０－?ｉ??２?６〇ｉ｜｜｜｜ｉ｜ｆｌ｜ｎ?ａｌｌｌ?Ｉ?ｍ?ｈ??１?－；ＰＰ??Ｍｅｄｉｕｍ??□?Ｐ４－ｔｈｅ?ｆｉｒｓｔ?ｂａｔｃｈ?□?Ｐ４－ｔｈｅ?ｓｅｃｏｎｄ?ｂａｔｃｈ?■?Ｐ４－ｔｈｅ?ｔｈｉｒｄ?ｂ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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