從白樺（Betula platyphylla Suk）中克隆獲得CDS為357 bp的BpLTP4。該BpLTP4蛋白為疏水性蛋白且具有一個潛在的跨膜區(qū),蛋白三級結(jié)構(gòu)含有一個疏水腔,該蛋白具有LTP家族基因特有的8個Cys殘基結(jié)構(gòu)。BpLTP4與其他物種LTP耐鹽基因的親緣關(guān)系較近。qRT-PCR分析表明,NaCl脅迫處理48 h高度誘導(dǎo)BpLTP4表達。通過葉盤法獲得BpLTP4過表達煙草轉(zhuǎn)基因株系,用150 mmol/L NaCl脅迫處理轉(zhuǎn)基因和野生型株系后發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)基因株系耐鹽能力高于野生型,其平均發(fā)芽率是WT的5.6倍;根長是WT的1.099倍;DAB、NBT、Evans blue染色均淺于WT,POD活性比WT增高了0.28倍,SOD活性較WT增高了0.12倍。BpLTP4響應(yīng)鹽脅迫處理,通過提高保護酶活性、清除活性氧、維持細胞完整性來提高轉(zhuǎn)基因草的耐鹽能力。 

【文章來源】：生物技術(shù)通報. 2020,36(12)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

BpLTP4的PCR擴增

為分析鹽脅迫條件下轉(zhuǎn)基因煙草的耐鹽性,首先對其進行NaCl處理下的發(fā)芽率分析(圖7),WT和3個轉(zhuǎn)基因株系在不含NaCl的培養(yǎng)基上種子發(fā)芽率為100%,在含有150 mmol/L NaCl的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時,發(fā)芽率均明顯下降,WT的發(fā)芽率僅為11.42%,轉(zhuǎn)基因株系的發(fā)芽率分別為64.7%、54.54%和51.51%,是WT的5.6倍、4.7倍和4.5倍。說明轉(zhuǎn)基因株系種子較WT耐鹽性高。2.6 鹽脅迫下生長性狀分析

LTP4蛋白與其他LTP抗性基因蛋白序列比對分析

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]非特異性脂轉(zhuǎn)移蛋白NtLTP4作為正調(diào)控因子參與煙草對非生物和生物脅迫的響應(yīng)[D]. 徐揚.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018

碩士論文
[1]煙草NtLTP4基因的克隆及功能分析[D]. 鄭新新.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]陸地棉LTP家族基因的克隆與功能的初步研究[D]. 韓慧超.上海交通大學(xué) 2013
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本文編號：3310866