細胞凋亡是細胞程序性死亡。Bcl-2家族蛋白作為內(nèi)源凋亡的關(guān)鍵蛋白在內(nèi)源凋亡途徑中發(fā)揮重要功能。Bcl-2家族蛋白中的抗凋亡蛋白通過BH3結(jié)構(gòu)域（motif）與促凋亡蛋白相互作用,阻止促凋亡蛋白改變線粒體外膜的通透性（MOMP）引發(fā)細胞凋亡,從而導(dǎo)致癌癥的發(fā)生與發(fā)展。諸多研究表明除16個經(jīng)典的Bcl-2家族蛋白以外,生物體中還存在許多未知的含BH3溝槽的BH3受體蛋白,能夠與BH3 motif相互作用從而影響凋亡的發(fā)生。發(fā)現(xiàn)這些蛋白并揭示它們與其所在通路調(diào)控凋亡的新機制將為抗腫瘤治療提供新的癌癥靶標(biāo),為精準(zhǔn)治療提供依據(jù)。然而BH3結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)的蛋白-蛋白相互作用通常具有結(jié)合力弱、結(jié)合瞬時發(fā)生、可逆等特點,傳統(tǒng)的生物學(xué)手段例如免疫共沉淀難以發(fā)現(xiàn)新的BH3受體蛋白。近年來化學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)快速發(fā)展,其中應(yīng)用最廣泛的是基于活性的小分子探針技術(shù)（activity-based probes,ABPs）。ABPs技術(shù)的核心是設(shè)計一個能與蛋白質(zhì)活性氨基酸殘基發(fā)生共價反應(yīng)的活性分子探針。該探針以小分子蛋白抑制劑為結(jié)構(gòu)核心,在保留對靶點蛋白的抑制能力的基礎(chǔ)上,通過光交聯(lián)反應(yīng)實現(xiàn)細胞內(nèi)原位識別-捕獲抑制劑靶... 

【文章來源】：大連理工大學(xué)遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 引言
    1.2 凋亡相關(guān)蛋白是腫瘤治療的分子靶標(biāo)
        1.2.1 Bcl-2 家族蛋白是內(nèi)源凋亡的關(guān)鍵蛋白
        1.2.2 熱休克70 家族蛋白平衡蛋白質(zhì)質(zhì)量與細胞凋亡
        1.2.3 其他調(diào)控細胞凋亡的分子靶標(biāo)
    1.3 未知BH3 受體蛋白
    1.4 化學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)與腫瘤靶標(biāo)的發(fā)現(xiàn)
        1.4.1 基于活性的小分子探針技術(shù)(ABPs)
        1.4.2 發(fā)現(xiàn)新的BH3 受體蛋白
2 利用S1b-probe發(fā)現(xiàn)Hsp70 是新的BH3 受體蛋白
    2.1 引言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 實驗材料、試劑與儀器
        2.2.2 實驗方法
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 基于BH3 功能模擬物設(shè)計、合成探針分子庫
        2.3.2 基于表型篩選獲得活性小分子探針S1b-probe
        2.3.3 Hsp70是S1b的靶蛋白
        2.3.4 Hsp70 是新的BH3 受體蛋白
3 Hsp70與Bim的二聚體及其功能
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 實驗材料,試劑與儀器
        3.2.2 實驗原理與方法
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 Hsp70/Bim二聚體正向調(diào)控HSP70 的分子伴侶功能
        3.3.2 Hsp70/Bim二聚體通過穩(wěn)定癌蛋白AKT和 Raf來抗凋亡
結(jié)論
展望
參考文獻
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝



本文編號：3283927