細胞凋亡是細胞程序性死亡。Bcl-2家族蛋白作為內源凋亡的關鍵蛋白在內源凋亡途徑中發(fā)揮重要功能。Bcl-2家族蛋白中的抗凋亡蛋白通過BH3結構域（motif）與促凋亡蛋白相互作用,阻止促凋亡蛋白改變線粒體外膜的通透性（MOMP）引發(fā)細胞凋亡,從而導致癌癥的發(fā)生與發(fā)展。諸多研究表明除16個經典的Bcl-2家族蛋白以外,生物體中還存在許多未知的含BH3溝槽的BH3受體蛋白,能夠與BH3 motif相互作用從而影響凋亡的發(fā)生。發(fā)現這些蛋白并揭示它們與其所在通路調控凋亡的新機制將為抗腫瘤治療提供新的癌癥靶標,為精準治療提供依據。然而BH3結構域介導的蛋白-蛋白相互作用通常具有結合力弱、結合瞬時發(fā)生、可逆等特點,傳統(tǒng)的生物學手段例如免疫共沉淀難以發(fā)現新的BH3受體蛋白。近年來化學蛋白質組學技術快速發(fā)展,其中應用最廣泛的是基于活性的小分子探針技術（activity-based probes,ABPs）。ABPs技術的核心是設計一個能與蛋白質活性氨基酸殘基發(fā)生共價反應的活性分子探針。該探針以小分子蛋白抑制劑為結構核心,在保留對靶點蛋白的抑制能力的基礎上,通過光交聯反應實現細胞內原位識別-捕獲抑制劑靶... 

【文章來源】：大連理工大學遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：64 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 引言
    1.2 凋亡相關蛋白是腫瘤治療的分子靶標
        1.2.1 Bcl-2 家族蛋白是內源凋亡的關鍵蛋白
        1.2.2 熱休克70 家族蛋白平衡蛋白質質量與細胞凋亡
        1.2.3 其他調控細胞凋亡的分子靶標
    1.3 未知BH3 受體蛋白
    1.4 化學蛋白質組學與腫瘤靶標的發(fā)現
        1.4.1 基于活性的小分子探針技術(ABPs)
        1.4.2 發(fā)現新的BH3 受體蛋白
2 利用S1b-probe發(fā)現Hsp70 是新的BH3 受體蛋白
    2.1 引言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 實驗材料、試劑與儀器
        2.2.2 實驗方法
    2.3 結果與討論
        2.3.1 基于BH3 功能模擬物設計、合成探針分子庫
        2.3.2 基于表型篩選獲得活性小分子探針S1b-probe
        2.3.3 Hsp70是S1b的靶蛋白
        2.3.4 Hsp70 是新的BH3 受體蛋白
3 Hsp70與Bim的二聚體及其功能
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 實驗材料,試劑與儀器
        3.2.2 實驗原理與方法
    3.3 結果與討論
        3.3.1 Hsp70/Bim二聚體正向調控HSP70 的分子伴侶功能
        3.3.2 Hsp70/Bim二聚體通過穩(wěn)定癌蛋白AKT和 Raf來抗凋亡
結論
展望
參考文獻
攻讀碩士學位期間發(fā)表學術論文情況
致謝



本文編號：3283927