溶血磷脂（LPLs）作為一種生物活性信號分子,在細胞內(nèi)各種生命活動中發(fā)揮著重要作用。以往研究表明,生物體內(nèi)LPLs與多種疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān),并可作為相關(guān)疾病潛在的生物標記物。研究生物樣本中LPLs的測定方法對相關(guān)疾病的臨床診斷、預(yù)防,特異性生物標記物的篩選意義重大。以LPLs作為目標物,利用傅里葉變換離子回旋共振質(zhì)譜儀（FTICR-MS）,研究不同生物樣品中LPLs的有效檢測方法。主要實驗研究如下:1.建立了FTICR-MS測定血漿樣品中LPLs的方法;2.建立了基質(zhì)輔助激光解吸/電離FTICR-MS（MALDI-FTICR-MS）分析血漿、肌肉樣品中LPLs的方法;3.利用MALDI-FTICR質(zhì)譜原位成像分析生物切片中LPLs的空間分布;4.制備特異性和生物相容性表面涂層固相微萃�。⊿PME）探針實現(xiàn)敞開式質(zhì)譜下的生物活體及癌癥組織中的LPLs檢測。主要結(jié)論如下:（1）建立了FTICR-MS測定血漿樣品中4種溶血磷脂酰膽堿（LPCs）的方法。血漿樣品用甲醇-氯仿（9:1,V/V）提取,采用外標法定量分析。該方法在0.5¹00μg/L內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系... 

【文章來源】：沈陽工業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同提取溶劑對LPCs提取效率的影響

沈陽工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文16甲醇、甲醇-二氯甲烷(9:1，V/V)、甲醇-氯仿(9:1，V/V)對樣品的提取效果。以血漿樣品為例，由圖2.1可知，甲醇對四種LPCs的提取效率最低，甲醇-氯仿(9:1，V/V)的提取效率最高，LPC15:0、LPC16:0、LPC18:0的響應(yīng)值均明顯增大，且雜質(zhì)干擾較校為保證4種LPCs在生物樣品中得到更好的提取，本文選擇甲醇-氯仿(9:1，V/V)為最佳提取溶劑。圖2.1不同提取溶劑對LPCs提取效率的影響Fig.2.1EffectofdifferentextractionsolventsonextractionefficiencyofLPCs2.3.2質(zhì)譜條件的優(yōu)化（1）檢測模式的選擇LPCs是一種帶有正電荷的極性脂質(zhì)，分子結(jié)構(gòu)通式見圖2.2。為確定質(zhì)譜檢測條件，本文首先對LPCs在質(zhì)譜中的檢測模式進行了優(yōu)化。選取50μg/L的LPCs混合標準溶液，分別在電噴霧離子源的正離子模式和負離子模式下進行檢測。結(jié)果顯示，所得結(jié)果如圖2.3所示。從質(zhì)譜圖中可以得知，4種LPCs在正離子模式下的響應(yīng)均高于在負離子模式下的響應(yīng)，為保證檢測結(jié)果的靈敏度，本文選擇正離子模式對LPCs進行檢測。圖2.2溶血磷脂酰膽堿(LPCs)的分子結(jié)構(gòu)通式Fig.2.2Generalformulaofmolecularstructureoflysophosphatidylcholine(LPCs)

第2章FTICR-MS測定生物樣品中的溶血磷脂酰膽堿17圖2.3LPCs混合標準溶液(50μg/L)在正離子模式(A)和負離子模式(B)下的質(zhì)譜圖Fig.2.3Positive(A)andnegativeion(B)massspectraforLPCsmixedstandardsolution(50μg/L)（2）定量離子的選擇為進一步確定四種LPCs的定量離子，保證分析結(jié)果的準確性，本文分別在碰撞誘導(dǎo)解離電壓為30V的條件下對四種LPCs在混合標準溶液和血漿提取液中進行MS/MS分析，結(jié)果如圖2.4所示。由該圖可知，四種50μg/L的LPCs混合標準溶液(圖4A)的主要二級質(zhì)譜碎片為[M+Na-59]+，其主要是由于LPCs是一類含有N原子的化合物，其中氮原子上存在孤電子對容易加合鈉離子，因此得到待測物的基峰離子均為[M+Na]+，進行MS/MS分析時，在碰撞能量的誘導(dǎo)下脫去三甲基丙胺基（59Da）,從而得到了二級碎片離子[M+Na-59]+。此外，該圖中血漿提取液(圖2.4B)的MS/MS質(zhì)譜圖中4種LPCs均能得到相應(yīng)的二級碎片離子[M+Na-59]+，進一步證實了4種LPCs的定量離子為[M+Na]+。

【參考文獻】：
期刊論文
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