通過轉(zhuǎn)基因擬南芥表型分析對洋蔥線粒體差異表達(dá)基因orf393的功能進(jìn)行了初步研究。通過In-Fusion Cloning的方法,將基因orf393與編碼線粒體定位的靶向肽序列Rf1b5’融合,構(gòu)建了orf393基因的線粒體定位表達(dá)載體pROK2-Rf1b5’-orf393,通過花序浸染法成功轉(zhuǎn)化至野生型擬南芥,獲得了雄性育性降低的擬南芥轉(zhuǎn)基因植株,轉(zhuǎn)基因植株的雄蕊花絲變短,柱頭表面光滑幾乎沒有花粉附著,花藥顏色暗淡無法正常開裂,種莢短小皺縮、結(jié)實率低。亞歷山大染色實驗結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)基因植株的花藥中花粉量少,僅含有極少量的活性花粉。初步證明線粒體基因orf393與細(xì)胞質(zhì)雄性不育有一定關(guān)系,為明確orf393參與洋蔥細(xì)胞質(zhì)雄性不育的分子機(jī)制提供了參考。 

【文章來源】：分子植物育種. 2020,18(18)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

重組質(zhì)粒pROK2-Rf1b-orf393菌落PCR

表達(dá)載體pROK2-Rf1b5"-orf393的酶切驗證

卡那霉素篩選壓力試驗

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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