目的探究通過階段性調(diào)控經(jīng)典Wnt信號通路促使人誘導多潛能干細胞向心肌細胞分化。方法采用階段性激活或抑制Wnt信號通路的方案使人尿路上皮細胞來源的多潛能干細胞（U1細胞系）定向分化為心肌細胞,在分化第14天,采用流式細胞術檢測U1細胞向心肌細胞分化的效率,利用免疫細胞化學檢測心肌細胞肌鈣蛋白表達,通過激光掃描共聚焦熒光顯微鏡檢測人誘導多潛能干細胞來源的心肌細胞（hiPSC-CMs）的Ca²⁺活動,利用全細胞膜片鉗技術記錄hiPSC-CMs的電生理特性。結果 U1細胞系向hiPSC-CMs分化的效率為（88±3）%;全細胞膜片鉗技術記錄的動作電位特征顯示hiPSC-CMs可分為心室肌樣細胞、心房肌樣細胞和竇房結樣細胞,其中主要是心室肌樣細胞。竇房結樣細胞的比例、動作電位時程、動作電位幅度及最大去極化速率均明顯小于心室肌樣細胞和心房肌樣細胞。結論階段性調(diào)控Wnt信號通路能促使hiPSCs定向分化為hiPSC-CMs,并且hiPSC-CMs具有哺乳動物心肌細胞相似的電生理特征。 

【文章來源】：心血管病學進展. 2020,41(07)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

顯微鏡下觀察hi PSC-CMs以及流式檢測分化效率

免疫熒光:hi PSC-CMs表達c Tn T

Ca2+作為一種普遍的第二信使參與了各種細胞的病理生理過程，心肌細胞內(nèi)Ca2+濃度節(jié)律性改變是心臟收縮功能的基礎。心肌細胞的興奮收縮偶聯(lián)過程均伴隨著細胞內(nèi)Ca2+濃度的改變，這種濃度變化的時間及空間效應形成了心肌細胞內(nèi)的鈣瞬變。本實驗用Ca2+指示劑Fluo4-AM轉染hi PSC-CMs，并用激光掃描共聚焦熒光顯微鏡觀察，用Leica Application Suite X軟件進行圖像采集。結果顯示，hi PSC-CMs展現(xiàn)出自發(fā)的節(jié)律性Ca2+活動(圖4)。2.3 hi PSC-CMs的動作電位特征

【參考文獻】：
期刊論文
[1]干細胞治療心力衰竭臨床研究進展[J]. 梁小婷,范慧敏,劉中民.  心血管病學進展. 2018(03)



本文編號：3231306